葡萄灰霉病生防芽胞杆菌的筛选与防效评价.pdf

38 2 440 446 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2022 年 4 月 收稿日期 2020 02 04 基金项目 国家重点研发计划 2017YFD0200603 北京市农林科学院青年科研基金 QNJJ201908 作者简介 共同第一作者 付莉媛 女 硕士研究生 E mail liyuan fu 蔡瑞杰 女 硕士研究生 E mail cairuijir1997 通信作者 史凤玉 副教授 E mail shify2021 刘建斌 副研究员 E mail liujianbin1981 DOI 10 16409 ki 2095 039x 2022 02 016 葡萄灰霉病生防芽胞杆菌的筛选与防效评价 付莉媛 1 2 3 蔡瑞杰 冯志敏 2 宋新娜 1 2 朱英波 1 史凤玉 1 3 刘建斌 2 1 河北科技师范学院农学与生物科技学院 昌黎 066004 2 北京市农林科学院植物营养与资源环境研究所 北京 100097 3 河北科技师范学院 河北省作物逆境生物学重点实验室 筹 秦皇岛 066000 摘要 本研究从新疆 山东及河北等地区采集的健康葡萄根际土壤中分离生防菌 以葡萄灰霉病菌 Botrytis cinerea 为靶标菌 通过平板对峙试验 葡萄叶片和果实上的离体抑菌试验 筛选获得 4 株生防菌 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 具有较好的拮抗作用 经形态学和分子生物学方法分别鉴定为地衣芽胞杆菌 Bacillus licheniformis 解淀粉芽胞杆菌 B amyloliquefaciens 枯草芽胞杆菌 B subtilis 和蜡样芽胞杆菌 B cereus 4 株生防菌所制成的生物菌肥 对葡萄灰霉病的田间防效可达到 66 50 85 68 具有开发应用潜力 关 键 词 葡萄灰霉病 生物防治 芽胞杆菌 防效评价 中图分类号 S476 文献标识码 A 文章编号 1005 9261 2022 02 0440 07 Screening of Biocontrol Bacillus spp and Its Suppression Efficacy on Grape Gray Mold FU Liyuan 1 2 3 CAI Ruijie FENG Zhimin 2 SONG Xinna 1 2 ZHU Yingbo 1 SHI Fengyu 1 3 LIU Jianbin 2 1 College of Agronomy and Biotechnology Hebei Normal University of Science and Technology Changli 066004 China 2 Institute of Plant Nutrition and Resources Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences Beijing 100097 China 3 Hebei Key Laboratory of Crop Stress Biology in Preparation Hebei Normal University of Science and Technology Qinhuangdao 066000 China Abstract Biocontrol strains were isolated from healthy grape rhizosphere soil collected from Xinjiang Shandong Hebei provinces Four antagonistic strains showed good biocontrol activities against Botrytis cinerea on grape leaves and fruit by the plate test Based on morphology and phylogenetic tree analysis the strains BF1 1 BF2 1 BF3 1 and BF4 1 were identified as Bacillus licheniformis Bacillus amyloliquefaciens Bacillus subtilis and Bacillus cereus respectively The control efficacies of fertilizer made from the four strains were between 66 50 85 68 in the field trial Key words grape gray mold biological control Bacillus spp control effect 葡萄是世界上广泛种植的水果之一 由灰葡萄孢 Botrytis cinerea 引起的灰霉病是葡萄主要病害 严重 影响葡萄果实的品质和产量 1 2 灰葡萄孢在自然条件下即可侵染葡萄植株 造成灰霉病的大量发生 一般 造成的经济损失在 5 20 严重时可达 80 以上 甚至毁棚 给种植户带来巨大经济损失 3 目前 我国对葡萄灰霉病的控制多以化学药剂防治为主 常用的化学药剂主要有丙烷脒 多菌灵 噻 菌灵和腐霉利等 均有较好的抑制效果 4 然而 化学药剂不当使用不仅会造成严重的环境污染 同时也 会增加病原菌的抗药性 导致防治效果降低 5 6 生物防治具有安全性高 无污染 不产生抗药性等优点 是目前最有应用前景的防治方法 多年来 关于利用生防菌控制灰霉病的研究已有较多报道 如 Eald 等 7 童蕴慧等 8 发现哈茨木霉 绿色木霉具有防治葡萄灰霉病的效果 9 荆卓琼 10 叶涛等 11 发现解淀粉芽胞 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞杆菌的筛选与防效评价 441 杆菌对番茄灰霉病有很好的抑制作用 但以葡萄灰霉病为靶标的生防芽胞杆菌的筛选与研究相对较少 本研究以灰葡萄孢菌为靶标病原菌 从健康葡萄根际土壤进行分离 筛选生防菌 通过对峙法筛选出对灰葡萄孢菌有抑制作用的生防芽胞杆菌 并制成生物菌肥 通过田间试验评价其对葡萄灰霉病的防治效果 以期为葡萄灰霉病的生物防治提供理论 依据和应用技术 1 材料与方法 1 1 供试材料 土壤样品采集自我国新疆 山东以及河北等葡萄主产区的葡萄根际土壤 0 20 cm 及健康新鲜的葡 萄叶片备用 供试牛肉膏蛋白胨固体培养基 用于芽胞杆菌分离和培养 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化钠 5 g 琼脂 20 g 去离子水定容至 1000 mL 牛肉膏蛋白胨液体培养基 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化钠 5 g 去离子水定容至 1000 mL 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 用于葡萄灰霉病原菌培养 马铃薯 200 g 琼脂 20 g 去离子水定容至 1000 mL 供试灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea 由北京市农林科学院植物营养与资源环境研究所微生物科学实验室分 离保存 对照药剂腐霉利购自四川润尔科技有限公司 用于葡萄灰霉病发病期的防治 1 2 拮抗菌株分离与培养 称取供试土样 5 g 加入装有 45 mL 无菌水的 100 mL 三角瓶中 置于摇床上振荡 30 min 200 r min 28 充分混匀后 80 水浴 15 min 无菌条件下吸取 1 mL 接入装有 9 mL 无菌水的试管中 依次梯度 稀释至 10 8 分别吸取 10 6 10 7 和 10 8 的悬浮液 100 L 在牛肉膏蛋白胨培养基平板中涂布 并置于 28 恒温培养 24 h 将新培养的平板单菌落分别接种到装有 50 mL 牛肉膏蛋白胨培养液的 150 mL 三角瓶中 28 200 r min 振荡培养 24 h 即得待测菌液 1 3 拮抗菌株筛选 平板对峙法 将直径为 1 5 cm 灰葡萄孢菌的菌饼 接至 PDA 培养基平板中心 在距菌饼 2 5 cm 处的 左右两边各放置 1 个无菌牛津杯 分别向其中加入 100 L 待测菌液 对照组加等量无菌菌液 28 恒温 培养 5 7 d 每个处理 3 个重复 待对照菌落长满平板时 测量抑菌带宽度及病原菌菌落直径 抑制率 对照菌落直径 处理菌落直径 对照菌落直径 菌饼直径 100 1 4 生物菌肥的制备 分别挑取培养 24 h 的目标生防芽胞杆菌菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 接种至无菌的 50 mL 牛肉膏蛋白胨液体培养基中 28 200 r min 振荡培养 24 h 向培养好的发酵液加入 12 g 轻质碳酸钙搅 拌均匀 置于干燥箱中 37 烘干至含水量为 20 左右即得芽胞杆菌菌粉 将菌粉与有机水溶肥 微基生 物技术 深圳 有限公司提供 按质量比为 100 0 3 的比例混合制得生物菌肥 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 生物菌肥的微生物数量分别为 3 5 0 10 10 3 0 10 10 6 5 10 10 和 7 0 10 10 CFU mL 1 5 拮抗菌株在离体叶片及果实上的抑制作用 将采摘的新鲜葡萄叶片或葡萄果实用无菌水冲洗 常温无菌条件下风干 随机分组 每组 10 片或 10 颗 用无菌手术刀在叶片主脉或葡萄果实两侧切出两个长 2 cm 的伤口 然后将各组叶片或葡萄果实浸入 灰葡萄孢菌菌悬液 10 6 CFU mL 中 5 s 后取出 自然晾干 再将葡萄叶片或葡萄果实分别浸于生物菌肥 600 倍稀释液中 15 s 后取出晾干 以浸泡无菌牛肉膏蛋白胨培养基和无菌水作为对照组 将不同处理的叶 片或果实在室温条件 25 下置于培养皿 d 9 mm 的滤纸上 并滴加 2 mL 已灭菌的去离子水 7 15 d 后观察结果 葡萄灰霉病分级标准为 0 级 全叶或者果无病 1 级 25 以下叶或者果腐烂 2 级 25 50 叶或者果腐烂 3 级 50 75 叶或者果腐烂 4 级 75 以上叶或者果腐烂 按照公式计算病情 指数和生防效果 病情指数 各级病叶或者果数 相应级数值 调查叶或者果数 4 100 生 442 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 防效果 对照病情指数 处理病情指数 对照病情指数 100 1 6 生物菌肥对葡萄灰霉病田间防治效果 田间试验在河北省衡水市饶阳县屯里乡屯里村 五公镇许张保村和北广村的葡萄塑料大棚 长 1 5 m 宽 11 5 m 进行 葡萄种植株距为 1 2 m 行距为 2 5 m 葡萄树为成龄期第 2 年 试验共设 7 个处理 每 个处理 3 个重复 每个重复 1 垄 每垄 10 株葡萄树 将 1 4 方法制备的生物菌肥 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分别各稀释 600 倍 对照药剂腐霉利 山东裕丰源农业科技有限公司 稀释 600 倍 空白对照 CK 及有机水溶肥对照 所有处理进行 2 次药剂喷施 喷施时间选择在上午 9 00 11 00 7 d 后相同方法进 行第 2 次喷施 药剂施用量均按照每棵葡萄 2 5 g 药剂的用量进行 2 5 g 棵 试验前调查每行叶片总数 第二次施药后分别于 7 15 d 调查叶片发病情况 病情指数和防治效果同上 1 7 葡萄灰霉病拮抗菌株的鉴定 1 7 1 拮抗菌培养性状观察 将生防效果较好的 4 株菌株用划线法分别在牛肉膏蛋白胨培养基上 28 培 养 12 h 后观察菌落颜色及形态 经革兰氏染色后 在高倍显微镜 德国徕卡 DM2500 下观察菌落形态 并拍照记录 1 7 2 拮抗菌的分子鉴定 将待鉴定菌株分别进行 DNA 的提取 选取适合的引物 27F 5 AGAGTTTGATC CTGGCTCAG 3 和 1492R 5 TACGACTTAACCCCAATCGC 3 进行 PCR 扩增 反应体系为 25 L Taq MIX 12 5 L 引物 27F 和 1492R 各 0 5 L DNA 1 L 去离子水补足至 20 L 反应程序为 95 预变性 10 min 93 变性 60 s 50 退火 60 s 72 延伸 90 s 25 个循环 72 延伸 90 s 将 PCR 产 物送至北京三博远志技术有限公司所进行测序 待得到测序序列后 在 NCBI 进行 BLAST 比对 获得同 源序列 然后确定菌株分类地位 12 1 8 数据统计与分析 统计分析采用 SPSS 软件 IBM SPSS Statistics 24 USA 进行数据的分析处理 系统发育树采用 MEGA7 Mega Limited Auckland New Zealand 2 结果与分析 2 1 目标拮抗菌筛选 从不同地区土样中分离获得 29 株细菌菌株 通过平板对峙试验筛选获得 14 株具有拮抗性能 其中病 原生长半径小于 1 50 cm 以下 对照病原半径 4 23 cm 且抑制率大于 60 的菌剂共用有 7 株 分别为 BF 2 4 BF3 1 BF4 1 BF3 7 BF2 1 BF3 2 及 BF3 4 表 1 2 2 拮抗菌在离体叶片上的抑制作用 从图 1 和表 2 可知 在 14 株供试拮抗菌株中 有 7 株具有明显叶面防治效果 其中 BF1 1 BF3 1 BF3 2 BF4 1 BF2 1 对灰葡萄孢的抑制作用较好 抑制率可达 50 以上 2 3 拮抗菌在离体果实上的抑制作用 从图 2 和表 3 中可知 有 7 株菌具有明显的病害防治效果 其中 BF3 1 BF4 1 BF2 1 和 BF1 1 可有 效降低葡萄灰霉病的发生 抑制率达 70 以上 2 4 生物菌肥对葡萄灰霉病防治效果 由表 4 可知 BF3 1 和 BF4 1 菌肥处理对葡萄灰霉病的田间防治效果分别达 85 68 和 82 07 显著 高于水溶肥 54 35 和腐霉利 67 30 处理 2 5 拮抗菌株的鉴定 2 5 1 形态学观察 菌株 BF1 1 菌落呈白色 表面粗糙皱褶 边缘不规则 直径约为 3 mm 产芽胞 芽 胞排列呈杆状 两端呈圆形 单生 革兰氏阳性 初步确定为芽胞杆菌属 菌株 BF2 1 菌落呈淡黄色 表 面粗糙不透明 边缘不规则 产芽胞 芽胞两端钝圆 长短不一 革兰氏阳性 初步确定为芽 胞杆菌属 菌株 BF3 1 菌落呈白色 表面粗糙不透明 常形成褶皱 伴有多处隆起 单个细胞 0 7 0 8 m 2 3 m 着色均匀 鞭毛周生 能运动 无隔膜 革兰氏阳性菌 产芽胞 芽胞 0 6 0 9 m 1 0 1 5 m 位于菌体中央或稍偏 芽胞形成后菌体不膨大 初步确定为芽胞杆菌属 菌株 BF4 1 菌落似蜡烛 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞杆菌的筛选与防效评价 443 表1 芽胞杆菌在平板上对灰葡萄孢抑制率 Table 1 The inhibitory rate of Bacillus spp against B cinerea on the plate 处理 Treatments 病原生长半径 Pathogen growth radius cm 抑制率 Inhibitory rate BF1 1 1 80 0 30 bc 57 4 BF2 1 1 48 0 03 abc 65 1 BF2 2 1 80 0 60 bc 57 4 BF2 3 1 70 0 35 bc 59 8 BF2 4 1 40 0 20 ab 66 9 BF2 5 2 30 0 30 c 45 6 BF3 1 0 80 0 26 a 81 1 BF3 2 1 03 0 25 ab 75 6 BF3 4 1 40 0 26 ab 66 9 BF3 6 2 34 0 44 c 44 6 BF3 7 1 35 0 15 ab 68 1 BF3 9 3 80 0 20 d 10 2 BF4 1 1 40 0 10 ab 66 9 BF4 2 1 80 0 30 bc 57 4 注 数据以平均值 标准差表示 数据后不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 BF1 1 BF2 1 BF3 1 BF4 1 BF3 2 BF2 5 BF3 7 CK 图1 拮抗菌株对灰葡萄孢菌离体叶片的抑菌活性 Fig 1 Aantagonistic effect of biocontrol strains against B cinerea on leaves 表2 生防菌株对灰葡萄孢抑制效果 Table 2 Inhibition of biocontrol strains on B cinerea 处理 Treatments 病情指数 Disease index 生防效果 Biocontrol efficacy CK 35 0 21 21 d BF3 7 22 5 10 60 c 36 BF2 5 19 0 8 48 bc 46 BF1 1 16 5 9 19 abc 53 BF3 2 14 5 7 77 abc 59 BF2 1 12 5 6 36 abc 64 BF4 1 8 0 4 24 ab 77 BF3 1 3 5 2 12 a 90 注 数据以平均值 标准差表示 数据后不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 444 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 CK BF2 1 BF1 1 BF4 1 BF3 7 BF3 1 BF3 2 BF2 5 图2 拮抗菌株对灰葡萄孢菌离体果实的抑菌活性 Fig 2 Antagonistic effect of biocontrol strains against B cinerea on fruit 表3 不同菌株对灰葡萄孢果实抑菌率 Table 3 Bacterial inhibition rate of different strains on fruit of B cinerea 处理 Treatments 病情指数 Disease index 生防效果 Biocontrol efficacy CK 27 5 10 61 e BF3 7 19 0 8 49 d 31 BF3 2 15 5 6 36 cd 44 BF2 5 11 5 4 95 bcd 58 BF1 1 8 0 2 83 abc 71 BF2 1 5 0 4 25 ab 82 BF4 1 4 0 1 41 ab 85 BF3 1 1 5 2 12 a 95 注 数据以平均值 标准差表示 数据后不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 表4 不同处理对葡萄灰霉病的防治效果 Table 4 Biocontrol effects of different treatments on B cinerea 处理 Treatments 稀释倍数 Dilution time 病情指数 Disease index 生防效果 Control effect CK 156 0 60 81 c 水溶肥 600 141 5 48 79 bc 54 35 BF2 1 600 102 5 4 95 bc 66 50 BF1 1 600 100 5 7 78 b 66 72 腐霉利 60 98 0 35 36 b 67 30 BF4 1 600 43 5 12 02 a 82 07 BF3 1 60 41 5 24 75 a 85 68 注 数据以平均值 标准差表示 数据后不同小写字母表示差异显著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 样颜色 近似圆形 质地软 无色素 菌落直径 5 7 mm 产芽胞 芽胞呈杆状 芽胞中生或近中生 孢 囊无明显膨大 革兰氏阳性 无荚膜 初步确定为芽胞杆菌属 2 5 2 分子鉴定 系统发育树分析表明 菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分别与地衣芽胞杆菌 Bacillus lincheniformis MF871790 1 解淀粉芽胞杆 Bacillus amyloliquefaciens MW433641 1 枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis MW751907 1 和蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus KC814716 1 处于同一分支 结合形态 学观察结果 菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分别鉴定为地衣芽胞杆菌 解淀粉芽胞杆 枯草芽胞杆 菌和蜡样芽胞杆菌 图 3 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞杆菌的筛选与防效评价 445 BF2 1 99 94 80 81 99 64 100 99 97 98 0 02 100 100 100 80 80 100 MW433641 1 Bacillus amyloliquefaciens SCR4 MT081100 1 Bacillus amyloliquefaciens QT 162 BF3 1 BF1 1 BF4 1 LC602938 1 Bacillus subtilis Mori7 16 23 MW751907 1 Bacillus subtilis TV 11D MF871790 1 Bacillus licheniformis G MG733547 1 Bacillus licheniformis APBSWPTB74 AB021192 1 Bacillus mycoides AB190217 1 Bacillus anthracis ATCC 14578 MK177527 1 Bacillus sp B12 KF982821 1 Bacillus cereus AGN7 KC814716 1 Bacillus cereus B18 1 MN330378 1 Bacillus cereus R5 5 AB101595 1 Sporolactobacillus inulinus D16276 1 Paenibacillus polymyxa IAM 13419 X80725 1 E coli ATCC 11775T 图3 生防菌株的系统发育树状图 Fig 3 Phylogenetic dendrogram of the biocontrol strains 3 讨论 本试验从不同地区土样中获得 29 株细菌菌株 分离 培养并通过平板对峙试验筛选获得 14 株具有拮 抗性能的菌株 将具有拮抗性能的细菌菌株进行离体叶片和离体果实抑制活性测定后发现 抑制率均在 50 以上的拮抗菌有 4 株分别是 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 经菌株形态学特征以及分子生物学鉴定 为地衣芽胞杆菌 解淀粉芽胞杆菌 枯草芽胞杆菌及蜡样芽胞杆菌 此外 枯草芽胞杆菌 BF3 1 蜡样芽 胞杆菌 BF4 1 在对峙培养试验中均显现出较强的抑制力 有研究指出蜡样芽胞杆菌生长繁殖能力强 分布范围广 可适应较高温度 烹饪时间短温度不够 时不能将其完全杀死 可能会引起食物中毒等危害 13 15 应用安全性有待于进一步评估 此外 解淀 粉芽胞杆菌 BF2 1 和地衣芽胞杆菌 BF1 1 虽不及枯草芽胞杆菌 BF3 1 和蜡样芽胞杆菌 BF4 1 的抑制能 力强 但仍表现出一定的拮抗效果 荆卓琼 10 及陈哲等 16 柴庆凯等 17 黄静等 18 罗琳等 19 利用 解淀粉芽胞杆菌分别防治番茄 黄瓜 草莓及葡萄等灰霉病 并取得较好的防治效果 也有研究表明 地衣芽胞杆菌的菌剂可抑制黄瓜土传病害的发生 20 22 在农业生产中 单凭拮抗菌株是无法满足生产 过程中的综合需求 23 24 故本试验尝试将拮抗菌株与含有微量元素的有机水溶肥配合使用 发现无机 营养元素成分的添加对于拮抗菌株的生防效果无明显的抑制作用 表明拮抗菌株与其他成分配合使用 是可行的 不仅能防治植物病害的发生 还可以叶面补充植物所需的营养 从而减少化肥使用 改善 作物的品质 增加作物的产量 但本试验中仅采用了拮抗菌株菌粉和含有微量元素的有机水溶肥复合 的一种比例 而产生防治效果不同可能与菌粉与水溶肥比例 以及水溶肥组成成分有关 因此相关工 作还需进一步研究探讨 参 考 文 献 1 Zhang H Y Godana E A Yuan S et al Biological control as an alternative to synthetic fungicides for the management of grey and blue mould diseases of table grapes a review J Critical Reviews in Microbiology 2020 46 4 450 462 446 中 国 生 物 防 治 学 报 第 38 卷 2 王忠跃 葡萄健康栽培与病虫害防控 J 果农之友 2020 8 51 3 邓庭和 新疆塔额盆地设施葡萄灰霉病发生规律及防控技术的研究 D 石河子 石河子大学 2015 4 沈建生 滕元文 王华新 等 施佳乐 扑海因 速克灵单用及混用防治葡萄灰霉病田间药效试验 J 中国南方果树 2005 34 6 66 67 5 韦发才 防治葡萄灰霉病药剂筛选试验 J 中国南方果树 2005 6 77 78 6 Zhang J Wang Y Du Z L et al Screening identification and antagonistic effect of antagonistic bacteria JTFM1001 against aflatoxin contamination in corn J Oil Crop Science 2021 6 1 1 7 7 Elad Y Trichoderma harzianum T39 Preparation for Biocontrol of Plant Diseases Control of Botrytis cinerea Sclerotinia sclerotiorum and Cladosporium fulvum J Biocontrol Science and Technology 2010 10 4 499 507 8 童蕴慧 郭桂萍 徐敬友 等 拮抗细菌对番茄植株抗灰霉病的诱导 J 中国生物防治 2004 20 3 187 189 9 杨春林 席亚东 谢华蓉 等 哈茨木霉 Th 30 几丁质酶的生产条件及对灰霉病菌的拮抗作用 J 植物保护学报 2009 36 4 295 300 10 荆卓琼 郭致杰 徐生军 等 解淀粉芽胞杆菌 HZ 6 3 的筛选鉴定及其防治番茄灰霉病效果的评价 J 草业学报 2020 29 2 31 41 11 叶涛 刘敏 任哲昕 等 番茄灰霉菌拮抗细菌的筛选鉴定及评价 J 浙江师范大学学报 自然科学版 2020 43 1 60 65 12 张飞官 高雅慧 任慧爽 等 桑疫病病原拮抗菌的分离 鉴定及发酵条件优化 J 微生物学报 2013 53 12 1285 1294 13 乔淼 陆桥君 一起生活饮用水污染蜡样芽胞杆菌的检测与分析 J 江苏预防医学 2019 30 6 679 680 14 Oda M Yokotani A Hayashi N et al Role of sphingomyelinase in the pathogenesis of Bacillus cereus infection J Biological and Pharmaceutical Bulletin 2020 43 2 250 253 15 梁斌 何月悦 一起蜡样芽胞杆菌引起食物中毒事件调查分析 J 社区医学杂志 2020 18 16 1122 1124 16 陈哲 黄静 赵佳 等 番茄灰霉病病原菌分离鉴定及拮抗菌筛选 J 生物技术通报 2017 33 8 81 87 17 柴庆凯 张斌 常若葵 等 解淀粉芽胞杆菌 LJ02 对黄瓜抗灰霉病菌的生防效果及其诱导抗性机理的初步研究 J 植物病理学报 2019 49 6 828 835 18 黄静 赵佳 陈哲 等 抗草莓灰霉病的芽胞杆菌 CM3 的分离与筛选 J 北方园艺 2016 11 113 116 19 罗琳 王其慧 赵海霞 等 葡萄灰霉病生防菌株的筛选及其拮抗机理初探 J 中国酿造 2017 36 4 93 98 20 王良 地衣芽胞杆菌的应用现状及展望 J 生物技术世界 2013 10 4 172 21 朱薇 桃褐腐病菌的生物学和地衣芽胞杆菌 W10 的防病机理研究 D 扬州 扬州大学 2019 22 陈刘军 俞仪阳 王超 等 蜡质芽胞杆菌 AR156 防治水稻纹枯病机理初探 J 中国生物防治学报 2014 30 1 107 112 23 王红丽 善文辉 胡海瑶 等 生防菌混合接种对葡萄灰霉病菌的防治效果 J 中国生物防治学报 2020 36 2 265 271 24 贺惠文 纪兆林 徐敬友 等 地衣芽胞杆菌 W10 与化学药剂复配对桃褐腐病菌抑制活性的增效作用 J 亚热带植物科学 2017 46 4 391 393 责任编辑 吕平香