蝴蝶兰_火凤凰_组织培养关键技术研究.pdf

2022年13期 智慧农业导刊 JournalofSmartAgriculture 试验 研究 蝴蝶兰 火凤凰 组织培养关键技术研究 曾燕红1 玉新爱2 苏荣军1 1 广西玉林农业学校 广西玉林 537000 2 玉林市农业科学院 广西玉林 537000 蝴蝶兰属兰科蝴蝶兰属 花体轻盈美丽 花形奇 特 花色艳丽 花期长 被称为 洋兰皇后 图 1 由于 其观赏和经济价值高 深受国内外花卉市场的青睐 蝴 蝶兰属单茎气生兰 极少数侧枝 所以 在大规模生产 中 采用分株繁殖是非常困难的 此外 由于大部分的 种子尚未完全成熟 而且种子中没有胚乳 因此发芽速 度较慢 难以通过播种技术进行有性生殖 组织培养技 术具有快速的生长速度和较高的繁殖能力 具有年生 产能力高的优点 是目前工厂式育苗的主要技术途径 目前 国内外关于蝴蝶兰的组培技术已较为成熟 但由 于品种之间的诱导率差异大 增 殖 系 数 低 植物生长调 节剂的种类和浓度比例不确定等原因 其技术水平也 有差异 所以 开发适合于特殊品种的组培快繁技术系 统具有十分重要的现实意义 因此 本文选择了蝴蝶兰 火凤凰 的茎秆作为实验材料 通过对蝴蝶兰 火凤 凰 的 不定芽诱导 增 殖和生根等各个阶段的影响进行 了研究 确定了 火凤凰 组培快繁的最佳培养条件 使 其快速繁殖技术系统得到优化 为其工业化 规模化生 产提供技术支撑 1 1 材料和方法 1 1 试验材料 加入不同比例的植物生长调节剂 用 8 00g L的琼 脂对所有的载体进行了固化 并且在25g L的蔗糖和 5 6 的 pH值下进行了固化 加入0 50g L的活性碳 AC 以防爆炸褐化 然后在121 下进行30min的杀 菌 如图2所示 1 2 材料选择和灭菌 开花期间 从花卉市场购买蝴蝶兰 火凤凰 应 选 择生长旺盛 无病虫害 无变异的母株为外植体 在收集 前对外植体进行预处理 在收获前5 7d向母株喷洒菌 剂 能有效地预防和降低内源污染 增加诱变成功率 外植体的最佳选择是蝴蝶兰第一芽开花的带腋芽花梗 将其切成5cm左右的小段 小镊子去除腋芽外部苞 片 放入烧杯中 如图3所示 在烧杯中滴入几滴洗涤剂 用自来水冲洗6 8h 再用无菌水冲洗 然后在无菌工作台上消毒表面 表面 用75 酒精消毒30s 用 无菌水冲洗3次 然后用0 1 HgCl2溶液浸泡花梗10min 继续摇动 用无菌水清洗 摘 要 以蝴蝶兰带有腋芽的花梗作为外植体 研究多种培养基和不同植物生长调节剂的配比对蝴蝶兰 火凤凰 不定芽 诱发 增殖和生根各阶段的影响 在诱导蝴蝶兰不定芽过程中 以MS 花宝1号 花宝2号 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA 培养基为最好 不定芽增殖最优的培养基为MS 花宝1号 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 而生根蝴蝶兰中 1 2MS 培养 基的生根率总体优于 MS 培养基 且诱导蝴蝶兰生根的最适培养基配方为1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 关键词 蝴蝶兰 组织培养 关键技术 中图分类号 S274 2 文献标志码 A 文章编号 2096 9902 2022 13 0025 03 Abstract ThepedicelswithaxillarybudsofPhalaenopsiswereusedasexplantstostudytheeffectsofdifferentmedia andplantgrowthregulatorsontheinduction proliferationandrootingofadventitiousbudsofPhalaenopsis Huofeng Inthe inductionofadventitiousbudsofPhalaenopsis thebestmediumwasMS Huabao1 Huabao2 3 00mg L6 BA 0 05mg L NAA andthebestmediumforadventitiousbudproliferationwasMS Huabao1 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA A mongtherootingPhalaenopsis therootingrateof1MSmediumwasbetterthanthatofMSmedium andtheoptimummedi umforinducingrootingofPhalaenopsiswas1ap2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA Keywords Phalaenopsis tissueculture keytechnology 基金项目 2020年广西农业科技自筹项目 Z202069 作者简介 曾燕红 1989 女 硕士研究生 农艺师 讲师 研究方向为植物组织培养 果蔬花卉生产技术 中 职涉农教育 DOI 10 20028 j zhnydk 2022 13 009 25 2022年13期试验 研究 智慧农业导刊 JournalofSmartAgriculture 4 5次 用消毒过的滤纸将物料表面的湿气吹干 然后 进行接种 无菌材料是蝴蝶兰组织培养的一个重要条件 和保障 而灭菌是一种行之有效的方法 采用表面消毒 方法 将表面的细菌杀死 使其在最大程度上维持其活 性 所以 在蝴蝶兰的组织培养中 杀菌是一个非常关键 的环节 注 消毒时间取决于外植体的种类或成熟度 图1 蝴蝶兰 图2 蝴蝶兰组织培养 一 图3 蝴蝶兰组织培养 二 1 3 方法 首先是对疫苗室和操作台进行清洁和消毒 然后是 酒精灯 消毒器 接种刀 镊子等接种器具的准备 随后 完成接种 将蝴蝶兰的花梗两端切去 将带腋芽的花梗节切成 1 2cm的小段 根据生长极性插入培养基中 每个处理 接种30个外植体 重复3次 注意严格规范无菌操作 尽 可能减少因操作不当而引起的污染 严格消毒器具 减少 与病毒的交叉感染 切取外植体时要用锐利的刀具和快 速的切割 同时要避免互相挤压 以免损伤材料 所有的 外植体取刀时 刀口的尺寸和切点都要合理 正确 例如 切花梗的下端为45 切口 上端为平面 为 了确保所需 的养分和光照 外 植 体 应 在 培养皿中均匀地分布 以MS 花宝1号 花宝2号为基质 添加不同比例 的6 BA和NAA 各培养基上分别接种带有腋芽的蝴蝶 兰花梗小段 每处理均为20个花梗段 重复3次 30d 后统计各处理诱导率 采用MS 花宝1号作为基质 添加了6 BA NAA 等不同比例的植物生长调节剂 将初代培养30d左右 的蝴蝶兰不定芽转入增殖培养基中 每次处理20个不 定芽 重复3次 培养30d左右时 统计新的不定芽的 发生情况 计算增殖系数 以1 2MS MS为基质 添加不同比例的植物生长 调节剂IBA和NAA 选择发育均匀的蝴蝶兰 将其接种 于不同的发芽基中进行生根实验 每次处理20株 3次 重复 约45d后统计各处理出根情况 适宜的温度为25 28 环境湿度为60 80 在 黑暗中培育7 9d 防止褐变 光照强度为2000 2500Lx 光照时间为每天11 13h 2结果与分析 2 1 不同基本培养基对腋芽萌发诱导的影响 将消毒后的 火凤凰 花 梗 接 种 到 不定芽诱导培养 基上 14d左右开始萌发不定芽 添加不同的植物生长 调节剂配比 虽然对 火凤凰 花 梗 诱导率不同 但添加 一定浓度的6 BA和NAA都有利于 火凤凰 不定芽的 诱导 在9组处理中 处理5的诱导率最高 达到 86 7 即最佳的不定芽诱导培养基为MS 花宝1号 花宝2号 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA培养基 诱导率 萌发的外植体数 接种的总外植体数 100 2 2 不同培养基对不定芽增殖的影响 将不定芽从花梗中分离出来 在15d后 不定芽基 部开始生长出原球茎 25d左右逐渐长出叶片 当植物 生长调节剂NAA浓度相同时 蝴蝶兰 火凤凰 的 不定 芽增殖系数随着6 BA的浓度升高而升高 但增殖系数 大时 叶片颜色淡 生长玻璃化 脆嫩 综合增殖系数和 幼苗长势 增殖培养基最优的组合是处理6 MS 花宝1 号 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 增殖系数达到 3 9 26 2022年13期 智慧农业导刊 JournalofSmartAgriculture 试验 研究 增殖系数 增殖不定芽总数 增殖不定芽外植体数 2 3 不同生根培养基对幼苗生根的影响 在引种蝴蝶兰的基本培养基中 1 2MS培养基的 生根率均高于 MS 而1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA的9号培养基 其生根率达86 7 结果表明 最适 宜的培养基是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 3 结论与讨论 蝴蝶兰的组织培养是影响组织培养成败的重要因 素 不同品种的蝴蝶兰 不同的栽培材料 不同的生长时 期 不同的栽培材料对培养基的需求也不同 因此 对蝴 蝶兰的培养基进行筛选 既是蝴蝶兰组织培养的基础 又是其重要的一步 在诱导蝴蝶兰 火凤凰 花梗腋芽萌发的实验中 添 加一定浓度的6 BA和NAA都有利于 火凤凰 不定芽 的诱导 这和高壮壮等 2 的试验结果一致 本试验中最佳 的不定芽诱导培养基为MS 花宝1号 花宝2号 3 00mg L 6 BA 0 05mg LNAA培养基 细胞分裂素对蝴蝶兰不定芽增殖的试验中 6 BA 对增殖效果的影响强于 NAA 且浓度5 00mg L6 BA 比浓度3 00mg L6 BA的增殖效果要更优 当6 BA浓度为5 00mg L 时 NAA 浓度为1 0mg L时的 增殖系数比0 50mg L 增殖效果更高 但幼苗长势受到 影响 所以MS作为不定芽增殖的基本培养基 在不 同 植物生长调节剂浓度配比下 5 00mg L6 BA 0 50mg L NAA最适合不定芽增殖生长 这个试验结果与陈春 等 3 6 的试验结论相似 表明蝴蝶兰增殖时要同时增殖 系数和幼苗生长状态 而在诱导蝴蝶兰生根的基础培养基中 1 2MS 培 养基的生根率总体优于MS 培养基 其中生根率最高的 是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA的9号培养 基 其生根率为86 7 由此可知 诱导蝴蝶兰生根的最 适培养基配方为1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA 参考文献 1 张果 赵玉安 刘晓鹏 等 国内蝴蝶兰育种技术的研究进展 J 贵州农业科学 2020 48 9 86 92 2 高壮壮 娄倩 刘雅莉 蝴蝶兰 大辣椒 组培快繁技术体系优化 的研究 J 西北林学院学报 2020 35 4 95 100 211 3 陈春 蝴蝶兰 红箭 组织培养快繁技术 J 福建林业科技 2021 48 2 63 67 4 杨录军 王俊 杨书才 等 蝴蝶兰新品种 郑农火凤凰 的组培 快繁技术研究 J 陕西农业科学 2015 61 11 52 54 5 赖思婷 丰锋 陈桦洁 等 6 BA对火凤凰蝴蝶兰成花诱导的影 响 J 广东农业科学 2021 48 5 50 56 6 杨佳丽 田时豪 朱彤 等 影响蝴蝶兰组织培养的主要因素及 控制研究 J 农村科学实验 2020 5 62 65 大智慧农业相关系列技术研究 其二 推进以农业信息化 为基础的智能农业装备的设计制造 提升农机设备的信 息化和智能化水平 适应智慧农业发展需求 提升我国智 慧农业装备的供给能力和国际竞争力 其三 建设完善智 慧农业作业系统 其四 加大智慧农业作业技术研究力度 与无人农场建设 其五 建立并完善智慧农业信息技术标 准 注重复合型人才培养 总之 农业信息化是智慧农业的一个发展阶段 是 信息技术在现代农业领域的应用 是智慧农业发展的核 心要求 二者是你中有我 我中有你的相互促进关系 大 力推进农业信息化建设是走智慧农业之路 提升我国综 合国力的必然选择 参考文献 1 赵春江 智慧农业的发展现状与未来展望 J 华南农业大学学 报 2021 42 6 1 7 2 孔繁涛 朱孟帅 孙坦 现代信息技术在农业领域的应用分析与 建议 互联网企业进军农业引发的思考 J 智慧农业 2019 1 4 31 41 3 戴峥 张晶晶 杜茜亚 等 新形势下的农业信息化发展思考 J 现代化农业 2021 10 56 58 4 罗治情 官波 陈娉婷 等 大数据背景下农业农村信息化建设 研究 EB OL 2021 12 30 https S 20211229 1333 014 html 5 赵春江 智慧农业发展现状及战略目标研究 J 智慧农业 2019 1 1 1 7 6 孙九林 李灯华 许世卫 等 农业大数据与信息化基础设施发 展战略研究 J 中国工程科学 2021 23 4 10 19 7 谢苏兵 崔勇彪 区块链背景下的洞庭湖区农业信息化研究 J 农业科技与装备 2021 6 107 108 8 孔繁涛 发展中的农业信息学 J 广东农业科学 2012 39 15 219 223 9 中国政府网 国务院关于加快推进农业机械化和农机装备产业 转型升级的指导意见 EB OL 2018 12 29 2019 12 26 http 上接24页 27