草莓二斑叶螨的防治药剂筛选及其田间抗药性初探.pdf

nullnull23年 第 9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 二斑叶螨 Tetranychus urticae Koch 可为害果 树 蔬菜 花卉等共计800种以上植物 1 化学防治 是主要的防治方法之一 但因该螨具有体型小 发育 历期短 繁殖力强等特点 易产生抗药性 目前已对 近百种杀虫活性成分产生了不同程度的抗性 2 研 究表明 阿维菌素靶标基因 GluCls 的 G314D 和 G326E 突变 联苯肼酯靶标基因 Cytb 的 G126S 和 A269V突变 乙螨唑靶标基因CHS1的I1017F突变 哒螨灵靶标基因 PSST 同源复合物 NADH 的 H92R 突变 丁氟螨酯靶标基因SDHB的R119C和I260V 突变 均与二斑叶螨对相应药剂的抗性相关 2 3 二 斑叶螨抗性基因数量明显高于其他昆虫 这也是二斑 叶螨抗药性广泛 治理困难的原因之一 3 2021年 笔 者在北京市昌平区草莓大棚开展试验 明确不同类型 药剂在二斑叶螨初发期施用的防效 并于2022年采 集北京市不同草莓种植区的二斑叶螨田间种群 检测 其对5种常用杀螨剂的靶标基因突变频率 综合上述 两项研究的结果 可为科学制定防治策略 选择适宜 杀螨剂品种并延长其使用寿命提供参考 1 供试材料 供试药剂分别为 43 联苯肼酯悬浮剂 爱利思 达生物化学品有限公司 30 乙螨唑悬浮剂 上海 悦联生物科技有限公司 20 丁氟螨酯悬浮剂 江 苏省苏州富美实植物保护剂有限公司 240 g L 螺 螨酯悬浮剂 拜耳作物科学 中国 有限公司 施药 器械为MH D16 3型电动喷雾器 浙江濛花喷雾器 有限公司 2 试验内容 2null1 田间施药防螨试验 2021年10月在北京市昌平区百善镇狮子营村 草莓二斑叶螨的防治药剂筛选 及其田间抗药性初探 王帅宇 1 谷振东 2 王 胤 1 杨 文 1 贾峰勇 1 李 锦 2 董 杰 1 1 北京市植物保护站 北京 100029 2 北京市昌平区植保植检站 北京 昌平 102299 摘要 通过开展田间试验 调查比较了 4 种杀螨剂对草莓二斑叶螨的防效 并测定了采自北京市不同草莓种植区的 田间二斑叶螨种群对 5种常用杀螨剂的靶标基因突变频率 结果表明 在草莓二斑叶螨初发期喷施联苯肼酯的速效 性和持效性均较好 药后 1 7 d的防效均高于 80 喷施丁氟螨酯的速效性好 药后 1 d 防效即达 83 81 持效性偏 低 药后 7 d 防效降至 70 41 喷施乙螨唑或螺螨酯速效性偏低 药后 1 d 防效分别为 70 42 62 29 但防效随药 后时间延长而上升 药后 7d防效较药后 1 d高出约 8个百分点 采集的田间二斑叶螨种群多数对哒螨灵 H92R 和 联苯肼酯 G126S 靶标基因突变频率高于 55 部分对阿维菌素 G326E 突变频率达 100 部分对乙螨唑 I1017F 突变频率在 50 上下 对丁氟螨酯突变频率整体较低 在实际生产中 应综合考虑药剂防效和田间二斑叶螨种群靶 标基因突变频率 制定科学用药策略 关键词 草莓 二斑叶螨 杀螨剂 田间防效 靶标基因 突变频率 中图分类号 S436 639 S481 4 文献标识码 B 文章编号 1672 6820 2023 09 0081 03 投稿日期 2023 06 03 修回日期 2023 07 26 基金项目 现代农业产业体系北京市设施蔬菜创新团队 BAIC01 2023 17 作者简介 王帅宇 高级农艺师 主要从事农作物病虫监测与防控工作 E mail shuaiyu3 通讯作者 董杰 推广研究员 长期从事农作物病虫监测与防控工作 E mail dongjiefine 81 nullnull23年 第9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 草莓大棚开展施药试验 此时二斑叶螨处于初发期 该季草莓 品种为红颜 定植前进行了高温闷棚处 理 棚内管理措施一致 试验共设4个药剂处理 即 每667 m 2 分别施用43 联苯肼酯悬浮剂20 mL 制 剂用量 下同 30 乙螨唑悬浮剂10 mL 20 丁氟 螨酯悬浮剂30 mL 240 g L螺螨酯悬浮剂20 mL 另 设清水对照 各处理随机区组设计 3次重复 每个重 复小区面积均为15 m 2 10月15日使用电动喷雾器 对草莓叶片正面和背面均匀喷施药液至不流滴 分别于施药前和药后1 3 7 d进行调查 采用 5点取样法 每点选3株草莓 调查每株顶端3 4 片 叶上的活螨数 参考 GB T 17980 17 2000 4 计算活 螨减退率和防治效果 活螨减退率 施药前螨数 施药后螨数 施药前螨数 100 防治效果 1 对照区施药前活螨数 处理 区药后活螨数 对照区施药后活螨数 处理区药前 活虫数 100 使用SPSS 26 0软件处理调查数据 采用邓肯氏 新复极差法 DMRT 分析处理间防效差异的显著性 2null2 田间种群与药剂相关靶标基因突变频率调查 2022年4月在北京不同草莓种植区随机采集二 斑叶螨 经室内形态鉴定 将二斑叶螨雌虫置于 80 保存 采用组织 细胞基因组DNA快速提取试剂盒 北京博迈德基因技术有限公司 对保存样本进行 DNA提取 参考Shen等的引物序列设计和PCR扩 增方法 3 对与阿维菌素 哒螨灵 联苯肼酯 乙螨唑 丁氟螨酯相关的靶标基因片段进行PCR扩增 产物 送北京博迈德基因技术有限公司测序 采用Chromas 软件和 Bioedit 软件分析抗药性分子测定结果 用 Excel记录统计每个样本的基因型及突变频率 3 结果与分析 3null1 不同药剂对二斑叶螨的防治效果 经田间调查发现 供试杀螨剂 43 联苯肼酯悬 浮剂 30 乙螨唑悬浮剂 20 丁氟螨酯悬浮剂和 240 g L 螺螨酯悬浮剂对草莓上二斑叶螨均有一定 的控制效果 表1 整体防效从高到低排序为联苯 肼酯 丁氟螨酯 乙螨唑 螺螨酯 施用联苯肼酯后 1 3 7 d 防效分别为 84 55 87 59 80 09 在各 处理同期防效中均为最高 表现出较好的速效性和 持效性 施用丁氟螨酯后第1天 第3天的防效分别 为83 81 84 83 与联苯肼酯同期防效接近 高于 其他2种药剂 但到药后第7天防效下降明显 仅为 供试药剂 制剂用量 mL 667m 2 药前活螨 数 头 药后 1 d 药后 3 d 药后 7 d 活螨数 头 防效 活螨数 头 防效 活螨数 头 防效 43 联苯肼酯 SC 20 224 49 84 55 a 58 87 59 a 121 80 09 a 30 乙螨唑 SC 10 222 93 70 42 b 104 77 54 ab 129 78 58 a 20 丁氟螨酯 SC 30 218 50 83 81 a 69 84 83 a 175 70 41 b 240 g L螺螨酯 SC 20 191 102 62 29 c 122 69 38 c 155 70 09 b 清水对照 209 296 436 567 表1 不同杀螨剂对草莓二斑叶螨的田间防效 1 1 2021年10月 二斑叶螨初发期 在北京市昌平区百善镇狮子营村草莓大棚开展施药试验 同列数据后不同小写字母表示差异显著 p 0 05 采集地点 阿维菌素 哒螨灵 联苯肼酯 乙螨唑 丁氟螨酯 G314D G326E H92R A269V G126S I1017F I260V R119C 昌平区百善镇 43 4 100 100 0 63 0 34 1 38 0 0 昌平区小汤山镇 38 5 40 6 95 2 14 2 80 8 52 1 2 2 28 5 大兴区庞各庄镇 16 9 100 85 2 5 4 4 3 5 5 0 4 6 延庆区旧县镇 56 9 12 6 65 0 23 7 55 2 55 4 61 2 3 2 通州区潞城镇 82 7 9 2 88 5 4 5 70 2 49 8 63 2 29 8 表2 2022年北京市不同草莓种植区二斑叶螨种群对5种杀螨剂的靶标基因突变频率 82 nullnull23年 第 9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 70 41 显著低于联苯肼酯和乙螨唑的同期防效 说明该药速效性较好但持效性较差 施用乙螨唑后 1 7 d防效由70 42 逐渐升至78 58 施用螺螨酯 后 1 7 d 防效由 62 29 逐渐升至 70 09 这两种 药剂速效性较差 但具有一定的持效性 尤其是乙螨 唑 药后7 d防效已与联苯肼酯无显著差异 并显著 高于其他2种药剂 另外 据药后的持续观察 4 种 药剂在试验剂量下对草莓叶片 花和果实均未产生 药害和不良影响 药剂处理对草莓安全 3null2 靶标基因突变频率 根据分子检测结果统计 北京市二斑叶螨种群 靶标基因突变频率 发现突变频率最高的对应药剂 为哒螨灵 采自 5 个区域种群的 H92R 位点突变频 率在 60 以上 其中 1 个种群突变频率达 100 其他也多在 90 上下 对于阿维菌素 有 2 个种群 G326E 突变频率达 100 G314D 突变频率也较高 对于联苯肼酯 有 4 个种群 G126S 突变频率高于 55 A269V 突变频率较低 对于乙螨唑 I1017F 突 变频率为 5 5 55 4 除大兴区庞各庄镇和昌平 区百善镇群体外 其他采集地群体突变频率在 50 上下 对于丁氟螨酯 I260V 突变频率为 0 63 2 R119C 突变频率为 0 29 8 突变频率整体较低 表 2 null 小结与讨论 在草莓上二斑叶螨初发期 以推荐剂量喷施 43 联苯肼酯悬浮剂对二斑叶螨速效性好 防效在 80 以上 可维持7 d 20 丁氟螨酯悬浮剂速效性 好 但持效性略差 药后 7 d 防效下降较明显 30 乙螨唑悬浮剂和 240 g L 螺螨酯悬浮剂起效相对较 慢 但具有一定的持效性 药后7 d的防效也可达到 70 以上 调查发现 对于传统杀螨剂哒螨灵和新型 杀螨剂联苯肼酯 采样区域的二斑叶螨相关靶标基 因突变频率高于 55 鉴于联苯肼酯在本试验中的 田间防效仍较好 建议仅在二斑叶螨初发期与其他 作用机制的药剂混用 1 2 次 避免过多使用 百善 镇和庞各庄镇种群对阿维菌素抗性较高 小汤山镇 旧县镇 潞城镇种群对乙螨唑抗性较高 不建议当地 使用相关药剂防治二斑叶螨 哒螨灵和阿维菌素是北京市防治草莓二斑叶螨 的常用药剂 但近年发现其控螨效果已不理想 研究 发现与哒螨灵抗性相关的H92R突变频率随哒螨灵 在二斑叶螨防控中的广泛使用而逐步上升 且对相 同作用机制的其他药剂也产生了抗性 3 与阿维菌 素抗性相关的 G314D 突变频率与二斑叶螨对阿维 菌素的抗性水平呈正相关 而G326E 位点对阿维菌 素抗性发展的贡献则较为复杂 3 5 联苯肼酯 G126S 和 A269V 的突变频率也随用药频次增加而呈现上 升趋势 3 国内乙螨唑 I1017F 突变频率较低 但本 次调查发现有 3 个二斑叶螨种群突变频率在 50 上下 这可能与乙螨唑在当地使用频率偏高有关 丁 氟螨酯突变频率整体较低 这可能与其用于草莓二 斑叶螨防控年份较短且使用频次较低有关 杀螨剂对二斑叶螨的防效与作用机制 防控时 期 抗药性等相关 在实际生产中应根据田间防效和 抗药性监测结果 及时调整用药方案 一方面应持续 关注草莓全生育期包括育苗期的用药情况 防治效 果 靶标基因突变频率变化 多重抗药性及交互抗 性 制定科学用药策略 另一方面应继续优化作物净 苗入棚 棚室及土壤消毒 物理阻隔 释放天敌 选用 生物药剂等绿色防控措施 实现对草莓二斑叶螨高 效 绿色和可持续的控制 参考文献 1 宫亚军 石宝才 王泽华 等 新型杀螨剂联苯肼酯对二 斑叶螨的毒力测定及田间防效 J 农药 2013 52 3 225 227 2 Adesanya A W Lavine M D Moural T W et al Mechanisms and management of acaricide resistance for Tetranychus urticae in agroecosystems J Journal of Pest Science 2021 94 3 639 663 3 Shen X J Zhang Y J Wang S Y et al A high through put KASP assay provides insights into the evolution of multiple resistant mutations in populations of the two spotted spider mite Tetranychus urticae across China J Pest Manag Sci 2023 79 5 1702 1712 4 国家质量技术监督局 GB T 17980 17 2000 农药田间 药效试验准则 一 杀螨剂防治豆类 蔬菜叶螨 S 北 京 中国标准出版社 5 徐丹丹 王少丽 何艳艳 等 我国二斑叶螨抗药性现状 及靶标基因突变频率检测 J 中国瓜菜 2019 32 8 155 156 83