文心兰组培苗繁育技术规程_罗远华.pdf

收稿日期 基金项目 福建省农业科学院对外合作项目 DWHZ 福建省农业科学院科技创新团队建设项目 CXTD 农业高质量发展 超越 协同创新工程项目 XTCXGC 作者简介 罗远华 男 硕士 助理研究员 主要从事花卉栽培与育种等研究工作 E mail luoyh com 通信作者 黄敏玲 研究员 主要从事花卉育种与生物技术等研究工作 E mail qq com DOI j cnki fbsic 文心兰组培苗繁育技术规程 罗远华 叶秀仙 钟淮钦 黄敏玲 福建省农业科学院作物研究所 福建福州 福建省农业科学院花卉研究中心 福建福州 福建省特色花卉工程技术研究中心 福建福州 摘 要 为了规范文心兰组培苗的生产 保证种苗质量 从组培苗繁育中的母株选择 外植体选取 外植体消毒 诱 导培养 增殖培养 分化培养 生根培养 炼苗 试管苗质量 组培苗移栽中的环境条件 洗苗与消毒 基质 移栽 栽 培管理 移栽苗质量等方面 总结出文心兰组培苗繁育技术规程 为文心兰组培苗标准化生产提供依据 关键词 文心兰 组培苗 繁育 技术规程 中图分类号 S 文献标识码 B 文心兰 Oncidiumhybridum 又名金蝶兰 舞 女兰或瘤瓣兰等 是指兰科文心兰属植物 主要分布 于美国 墨西哥 巴拉圭 秘鲁 巴西 牙买加 阿根廷 等中南美洲的热带和亚热带地区 文心兰植株轻 巧 花色丰富 花姿优美 部分品种具香味 适应性 广 花期长 观赏与经济价值高 在切花 盆花及景观 等方面应用广泛 与蝴蝶兰 石斛 大花蕙兰并列为 四大洋兰 是世界重要的商品花卉 近年来 文心兰在福建 广东 海南 云南 贵州 等地得到快速发展 栽培面积不断增加 但文心兰 优质种苗的生产严重滞后 采用传统的分株方式繁 殖种苗时不仅繁殖系数低 成本高 且种苗参差不 齐 产品质量不稳定等问题普遍存在 组培繁育技术 虽相对完善 但由于市场化品种的不断更新 种 苗工厂化 标准化生产程度较低 种苗供应不足等严 重影响了文心兰产业规模的提升 目前 还未见有 关文心兰组培苗繁育技术的国家标准和行业标准 为了规范文心兰组培苗繁育技术 确保种苗质量 提 高生产效率 在查阅相关文献的基础上 对多年来不 同类型品种的组培繁育技术研究 进行了总结 提 出了文心兰组培苗繁育技术规程 并应用于生产 对 提高优质种苗自给率 提升文心兰产业竞争力等具 有重要的现实意义 组培苗繁育 母株选择 符合需求 植株生长健壮 无病虫害 无表型病 毒特征 具有品种典型性状 切取外植体前植株提 前 d停止浇水 外植体选取 植株进入盛花期时 宜选用 cm长的幼嫩 花梗 或叶片未展开的嫩芽作为外植体 外植体消毒 幼嫩花梗取材后 在超净工作台上先用 V V 酒精浸湿的脱脂棉擦拭表面后置入无菌水 中清洗 次 取出后剥除幼嫩花梗的苞片 然后 置入 HgCl 水溶液中振荡消毒 min 取 出用无菌水冲洗 次 最后用无菌吸水纸吸干表 面水分备用 嫩芽取材后 先用手术刀剥除外部较大 的鞘叶 自来水冲洗 min 接着在超净工作 台上用 的酒精振荡浸泡 s 用无菌水冲 洗 次后 置入加了 滴吐温 的 HgCl 水溶液中振荡消毒 min 无菌水冲洗 次 用手术刀再次剥除剩余的鞘叶后 再次置入 加了 滴吐温 的 HgCl 水溶液中振 荡消毒 min 无菌水冲洗 次后 用无菌吸 第 期 总第 期 中国林副特产No TotalNo 年 月ForestBy ProductandSpecialityinChinaDec 水纸吸干表面水分后备用 诱导培养 在超净工作台上 将已消毒的外植体置于接种 盘上 用镊子和接种刀将幼嫩花梗切割成带 个 节的花梗切段 或包括生长点在内的 cm 长的嫩芽茎尖顶端组织 平放接种于事先准备好的 诱导培养基中 MS BA mg L NAA mg L 蔗糖 g L 琼脂 g L pH值 培养温度 光 照强度 lx 光照时间 h d 增殖培养 诱导培养 d后 成活外植体可诱导出单 芽 丛芽或类原球茎 将诱导出的材料从外植体上切 割下来进行继代增殖培养 单芽或丛芽进行丛芽增 殖培养 类原球茎进行类原球茎增殖培养 切除单芽或丛芽基部无分生能力的组织及已展 开的叶片后 竖向接种在增殖培养基中 MS 花 宝 号 g L BA mg L 椰汁 ml L 蔗糖 g L 琼脂 g L pH值 进行丛生芽增殖培养 选取健壮的 类原球茎接种在增殖培养基中 MS 花宝 号 g L BA mg L NAA mg L 椰汁 ml L 蔗糖 g L 琼脂 g L pH值 进行增殖培养 培 养温度 光照强度 lx 光照时 间 h d d继代 次 丛芽继代次数 不宜超过 次 类原球茎不宜超过 次 随着继 代增殖次数的增加 可根据长势将 BA浓度降低至 mg L NAA浓度降低至 mg L 分化培养 选取健壮的类原球茎接种在分化培养基中 MS 花宝 号 g L BA mg L 蔗糖 g L 琼脂 g L pH值 培养温度 光照强度 lx 光照时间 h d 分化培养 d后类 原球茎陆续发育成芽苗 分化不完全的类原球茎可 再次进行分化培养 生根培养 将叶片展开的丛芽苗或类原球茎分化出的芽苗 株高 cm 切割成单苗 按植株大小 壮弱分级 后 接种于生根培养基中 MS 花宝 号 g L NAA mg L 香蕉泥 g L 蔗糖 g L 活性炭 g L 琼脂 g L pH 值 培养温度为 光照强度 lx 光照时间 h d 根据品种株型与 培养容器规格确定适宜的接种数量 培养 d 后可获得具有根 茎 叶的完整植株 炼苗 当生根苗株高 cm 叶片 片 具 条根时 可移出培养室进行炼苗 炼苗室无阳光直 射 散射光光照强度 lx 温度 空气相对湿度 环境清洁 将培养 瓶一字排开放置于苗床或炼苗架上 炼苗 d 试管苗质量 品种纯正 生长健壮 叶片舒展 叶色浓绿 根系 粗壮 无污染 变异率 参考相关标准 文心 兰试管苗分级及标准参见表 表 文心兰试管苗分级及其标准 等级叶数 片叶长 cm根数 条根长 cm株高 cm 一级 二级 组培苗移栽 环境条件 移栽大棚要求光照均匀 空气流通 水源清洁 温度 空气相对湿度 光照强 度 lx 洗苗与消毒 将组培苗从培养容器中小心取出 用清水将粘 附在根系上的培养基清洗干净 并按植株大小进行 分级 整个过程应尽可能减少对植株的机械损伤 将分级好的组培苗放置在塑料筐内 置入 倍多菌灵或百菌清水溶液中消毒 min 取 出后放置在移栽大棚育苗床上晾 min后可 移栽 基质 水苔作为移栽基质 种植前先将水苔放入清水 中浸泡 h 捞出后用清水清洗 遍后充分挤出 水分 用力挤压水苔至不出水即可 移栽 用适量抖松的水苔包裹住组培苗的根部置入口 径 cm且底部带孔的白色育苗杯中 要求水苔的用 量要适中 组培苗生长点的位置要露出水苔面 水苔 面要低于杯沿 cm 移栽过程应尽可能减少 年罗远华等 文心兰组培苗繁育技术规程第 期 对植株的机械损伤 移栽后放入专用育苗托盘中 整齐摆放在育苗床上 栽培管理 水分管理 移栽后适当控水 保持水苔湿润 状态 水苔将要干透时及时浇水 一般早上浇水 浇 水时要浇透 使整个水苔湿润 施肥管理 移栽 d后即可喷施叶面肥 下午喷施 叶面湿润不滴水为宜 植株勿带水过夜 移栽 d内 每 d喷施 倍水溶性平衡肥 N P K 次 移栽 d后每 d喷施 次 浓度提高至 倍 移栽 d后每 d喷施 次 浓度提高至 倍 此阶段可在杯 中补施缓释肥 N P K 次 每杯 约 g 主要病虫害防治 预防为主 防治结 合 每 d喷洒 次 倍多菌灵 百菌清或甲基托布津等广谱性杀菌剂预防病害的发 生 发现病株时要及时隔离 根据虫害的季节性发 生 要提前预防 各种农药要交替使用 文心兰小苗 主要病虫害防治参见表 表 文心兰小苗主要病虫害防治 病虫害名称发病或危害特征防治方法 根腐病引起根系腐烂 叶片生长不良 严重时引起假鳞茎腐烂 导致整株死亡 控制基质的湿度 发病时可用 苯菌灵可湿性粉剂或 敌磺钠可湿性粉剂 倍液灌根 软腐病 主要危害新芽 多从根茎处侵染 导致叶基腐烂 有臭 味 叶片及假鳞茎染病时 均出现水渍状病斑 褐色至黑 色 最后软化腐烂 预防为主 控制基质的湿度 高温高湿季节可用 农用链霉素 倍液 或新植霉素 倍液 或 甲基硫菌灵可湿性粉 剂 倍液喷洒预防 白绢病 造成根腐或叶片软腐 最初呈水渍状 后期在茎基部或 介质中出现白色放射状菌丝 严重时产生红褐色油菜子 般的菌核 预防为主 控制基质的湿度 高温高湿季节可用 甲基硫菌灵 可湿性粉剂 倍液 或 的三唑酮可湿性粉剂 倍液喷 洒基质和叶基预防 炭疽病叶尖初生淡黄绿色圆形小斑点 逐渐扩大为黑褐色病斑 病斑易破裂 形成枯死斑 严重时全株死亡 发病初期可用 代森锌可湿性粉剂 倍液喷洒预防 发病 时可用 多菌灵 福美双可湿性粉剂 倍液 或 福 美双可湿性粉剂 倍液喷洒防治 蜗牛 蛞蝓危害幼嫩组织 造成不规则伤痕或空洞 发现危害时可用 四聚乙醛可湿性粉剂 倍液喷洒防治 d喷洒 次 连续 次 斜纹夜蛾危害幼嫩组织 食量大 严重时植株失去光合能力 停止生长甚至死亡 发现幼虫或有啃食痕迹时 可用 辛硫磷乳油或 高效氯氰菊酯乳油 倍液喷洒防治 移栽苗质量 不同品种的组培苗移栽 d后可达移 栽苗标准 要求生长健壮 叶片舒展 叶色浓绿 根系 发达 变异率 参考相关标准 文心兰移栽 苗分级及标准参见表 表 文心兰移栽苗分级及其标准 等级分蘖数 株主蘖叶数 片叶长 cm株高 cm小株型中株型大株型小株型中株型大株型 一级 二级 参考文献 陈璋 蔡幼华 洋兰 M 福州 福建科学技术出版社 颜隽 唐岱 苏藤伟 等 文心兰种苗生产的研究进展 J 云南农业 罗远华 黄敏玲 吴建设 文心兰育种研究进展 J 江西农 业学报 谢光明 李秀梅 邓聪平 等 利用组培快繁技术大规模生 产文心兰种苗 J 中国热带农业 韩松 王安石 陈施明 等 文心兰切花无病毒种苗组培快 繁生产技术 J 农业研究与应用 罗远华 林兵 叶秀仙 等 高产优质文心兰新品种金辉的 选育 J 福建农业学报 叶秀仙 黄敏玲 罗远华 等 盆花文心兰丛生芽组培快繁 技术研究 J 福建农业学报 叶秀仙 黄敏玲 罗远华 等 应用正交设计优化文心兰丛 生芽增殖培养体系 J 福建农业学报 王雁 郑宝强 刘春梅 等 主要商品热带兰花种苗栽培技 术与质量等级 LY T S 北京 中国标准出版 社 杨蕾 甘春雁 韦妙琴 等 文心兰栽培管理技术研究进 展 J 绿色科技 罗远华 林兵 吴建设 等 文心兰新品系 金辉 切花设 施栽培技术 J 福建农业科技 年中 国 林 副 特 产第 期