利用木霉菌对蝴蝶兰白绢病生物防治的初探.pdf

DOI 10 19904 14 1160 s 2024 16 005 利用木霉菌对蝴蝶兰白绢病生物防治的初探 陈俊生 汤 楷 刘燕榕 李 敏 杜晓霞 陈湧彬 汕头市农业科学研究所 广东 汕头 515021 摘 要 蝴蝶兰作为一种重要的观赏植物 在全球花卉市场中占据重要地位 然而 白绢病对蝴蝶兰的健康生长构成 了严重威胁 基于此 探索利用木霉菌对白绢病致病菌的抑制作用 采用牙签接种法研究木霉菌在蝴蝶兰标 准栽培过程中对白绢病的防治效果 试验结果表明 木霉菌制剂能够有效抑制白绢病致病菌生长 对白绢病 具有良好的防治效果 为蝴蝶兰产业发展提供了一种新的 环保的生物防治方案 关键词 木霉菌 蝴蝶兰 白绢病 生物防治 抗病性 文章编号 1005 2690 2024 16 0015 03 中国图书分类号 S682 31 S476 文献标志码 B 作者简介 陈俊生 1976 男 汉族 广东揭东人 本科 农艺师 研究方向为花卉选育种 栽培技术研究与示范推广 蝴蝶兰 Phalaenopsis 是一种兰科 Orchida ceae 属的多年生草本植物 产地主要分布在亚洲热 带地区 如我国台湾 海南等地 以及东南亚一些国 家 蝴蝶兰因其花朵形态酷似飞翔中的蝴蝶而得名 花形典雅 极具观赏价值 故被誉为 洋兰王后 或 兰花之后 在全球广受欢迎 1 然而 白绢病 Fusarium 对蝴蝶兰的健康生长构成了严重威胁 严重时甚至导致整株死亡 影响蝴蝶兰的产业化发 展 传统的化学农药防治方法不仅对环境造成污染 还可能导致病原菌产生抗药性 2 因此 寻找一种环 保且高效的生物防治方法成为当务之急 木霉菌 Trichoderma 是一类广泛分布于土壤和其他有机基 质中的真菌 因其对环境友好 无残留 不易产生抗 药性的特点 常被开发作为生物防治剂 生物肥料和 土壤改良剂 3 4 本研究旨在探索利用木霉菌提高蝴 蝶兰对白绢病的抗性 为蝴蝶兰产业提供新的病害生 物防治方案 1 材料与方法 1 1 材料 试验于 2022 年在汕头市农业科学研究所白沙基 地 2 号大棚进行 供试材料为大花型蝴蝶兰 汕农盛 世 选取表面生长量基本一致 生长健壮的 3 5 寸 1 寸 3 33 cm 成熟大苗进行试验 试验试剂为哈茨 木霉微生物菌剂 1kg可湿性粉剂 2亿个活菌 g 满穗 240g L噻呋酰胺 1 2 方法 1 2 1 试验处理 供试病原 供试标靶菌为汕头市农业科学研究所 白沙基地 2 号大棚采集的白绢病患病植株 提取菌 核 在 PDA 培养基中进行分离 纯化培养 经柯赫氏 法则验证具有致病能力 选取健康 粗细一致的蝴蝶 兰根 用无菌水洗净 消毒 剪为 2 cm 长的根段 放入白绢病菌落中培养备用 处理方法 试验选取健康且长势一致的 3 5 寸成 熟蝴蝶兰苗 以人工接种的方式处理健康植株 在每 株苗的单轴茎根部接种 2 条长满白绢病菌丝的蝴蝶兰 根 24 h 后 2022 年 6 月 23 日 实施药剂处理 设 置 4 个处理 分别为对照组 CK 清水 处理 1 满穗 240 g L 噻呋酰胺 2 000 倍喷雾 以叶面滴水 为准 处理 2 木霉菌剂 200 倍灌根 处理 3 接种 白绢病菌丝前 7 d 2022 年 6 月 15 日 进行木霉菌 剂 200 倍灌根 随机区组排列 每个处理 24 株 设 3 次重复 每个重复 8 株 兰苗选用国产水苔作为栽 培基质 试验期间严格按照 蝴蝶兰栽培技术规程 GB T28683 2012 标准进行栽培管理 1 2 2 指标测定 栽培试验期间每隔 7 d 对试验苗进行调查记录 病害分级标准主要依据整株植物的表现来判定 具体 的分级如下 0 级 整株无症状 1 级 植物基部近 地面处出现水渍状不规则褐色小斑点 3 级 植物基 部和栽培基质表面有少量白色棉絮状菌丝 5 级 菌 丝在植物基部扩散 并有少量白菜籽状菌核 7 级 植物基部及栽培基质有大量褐色菌核 植物基部腐烂 严重 9 级 植株萎蔫死亡 5 根据调查结果 按照 式 1 3 计算白绢病发病率 病情指数和防治 效果 发病率 发病株数 调查株数 100 1 病情指数 病级数 该级病株数 最高 病级数 调查总株数 100 2 防治效果 对照病情指数 处理病情指数 对 照病情指数 100 3 试验研究 EXPERIMENTALSTUDY 15 2024年第16期 1 2 3 数据分析 数据采用DPS9 01软件进行分析 2 结果与分析 2 1 木霉菌剂对白绢病发病率的影响 如图 1 所示 对照组 CK 在没有采取任何防治措 施的情况下 接种 7 d 发病率已达到 95 8 第 3 次 调查时 接种后第 20 天 已全部发病 而处理 1 和 处理 2白绢病发病率在接种后 13d内基本维持在同一 个范围 25 30 变化不明显 但从第13天开始 处理 1 的发病率开始升高 到接种后第 20 天达到近 46 这表明发病初期木霉菌剂与化学药剂同时分别 施用具有相似的防治效果 但随着时间的推移 化学 药剂的药效逐步衰减 导致致病率迅速增加 而木霉 菌剂的效果则相对保持平稳 同时 处理 3 的 3 次调 查发现白绢病发病率一直都保持在 10 之内 其发 病率明显比对照组 CK 和处理 1 处理 2 低很多 到 第 20 天也仅为 8 33 可见先灌施木霉菌剂后接种 病原菌对白绢病的防控效果最好 2 2 木霉菌剂对白绢病相对防治效果的影响 如表 1 所示 施用木霉菌剂及噻呋酰胺后 蝴蝶 兰白绢病均可得到有效抑制 但不同处理的防治效果 存在明显差异 接种后 7 d 调查 各处理间病情指数 差异达极显著水平 处理 3 相对防治效果达到 98 84 优于处理 2 的 83 72 和处理 1 的 93 02 虽然处理 1 与处理 3 在相对防治效果上差异不显著 但从环保角度考虑 生物防治方法处理 3 在生态友好 性方面显著优于化学防治处理 1 接种第 13 天 处 理 1 和处理 3 的病情指数差异不显著 且相对防治效 果变化不大 依然维持在 90 以上 而处理 2 的病 情指数已达到 17 相对防治效果降至 75 71 接种 第 20 天 3 个处理的病情指数均有所升高 其中处 理 1 的病情指数增速最快 与处理 3 又体现出显著差 异 同时 3 个处理对白绢病的相对防治效果分别为 81 40 70 93 和 90 70 均有所下降 但处理 3 的相对防治效果依然维持在较高水平 处理 1 防治效 果下降最为明显 说明随着施用时间的增加 化学药 剂的防治效果会逐步降低 而木霉菌剂则会保持相对 较为平稳的水平 这可能因为木霉菌剂为活体菌剂 其自身可以定殖并大量繁殖 所以在较长时间内依旧 可以保持较高的防治效果 通过对比处理 3 与处 理 2 可发现处理 3 具有明显的防治优势 这可能是 因为哈茨木霉生长速度快 先灌施哈茨木霉可以使其 迅速占位并大量繁殖 当病原菌入侵时可抑制病原菌 生长 具有更加明显的竞争优势 起到更好的防治效 果 而如果先接种病原菌 则会使病原菌先行繁殖 木霉菌抵御病原菌的效果会有所减弱 6 3 讨论与结论 现有研究表明木霉在自然界中具有分布范围广 生存能力及适应性强的特点 根据不完全统计 木霉 9 个主要种中有 5 个种具有生防潜力 至少对 18 个 属 29 种植物病原真菌有拮抗作用 同时具有对环境 为害小 甚至可降解已有化学农药残留的作用 因此 其具有重要的社会经济意义 国内外对木霉生防菌剂 的开发 生防机制的研究正在如火如荼地进行 已应 用到各类枯萎病 纹枯病 辣椒疫病 棉花黄萎病 白绢病 立枯病等土传病害及叶斑病 灰霉病等叶部 图1 木霉菌剂和化学药剂在蝴蝶兰大苗期对白绢病发病率的影响 调查日期 CK 处理1 处理2 处理3 6月30日 7月6日 7月13日 120 100 80 60 40 20 0 发病率 95 8 95 8 100 25 29 17 45 83 29 17 25 20 8 4 17 4 17 8 33 16 病害的防治 7 9 目前 国内对利用木霉菌防治粮食 蔬菜 药用植物 果林的土传病害和一些叶部病害已 有大量研究 10 11 但利用木霉对花卉 树木病害的生 防研究则较少有报道 随着生态文明建设日益深入人 心 以及花卉 经济林木对于提升当地农户生活水平 的作用逐渐增强 如蝴蝶兰 石斛兰等花卉以及核 桃 茶树等经济林的大面积种植 集约化的生产为病 害的发生和流行提供了有利条件 一些植物病害的发 生日趋严重 开展上述植物病害生防研究工作已迫在 眉睫 本试验结果表明 在配备水帘 风机 遮阳等 栽培设施大棚条件下 同时分别施用木霉菌剂及化学 农药 短期内木霉菌剂对蝴蝶兰白绢病的防治效果不 如化学农药的防治效果 但提前 7 d 对蝴蝶兰进行灌 根处理 使其在接种白绢病菌丝前在栽培基质中定 植 其防治效果则优于化学农药 20 d 内相对防效可 达到 90 70 体现了农作物 预防为主 综合防治 治早 治小 治了 的防治原则 为木霉菌在花卉 真菌性病害生防研究提供了新的策略 由于条件所限 本试验只探索了即时施用和提前 7 d 施用木霉菌剂的相对防治效果 未来可进一步拓 展研究深度 为对其具体作用机制 促生作用及在基 质中的存活时间等问题进行深入研究 12 以优化木霉 菌的使用剂量和方法 提高其在蝴蝶兰病害防治中的 效果 此外 本试验仅针对蝴蝶兰白绢病进行了试 验 未来可以扩大研究范围 探讨木霉菌对其他花 卉 其他病原体的防治效果 参考文献 1 李聚奎 试论蝴蝶兰的特征特性及栽培管理技术 J 现代 园艺 2016 21 30 32 2 李良 申功进 邵志和 哈茨木霉对茉莉白绢病生物防治的 研究 J 浙江大学学报 农业与生命科学版 1983 3 25 29 3 尤佳琪 吴明德 李国庆 木霉在植物病害生物防治中的应 用及作用机制 J 中国生物防治学报 2019 35 6 966 976 4 赛牙热木 哈力甫 邓勋 宋小双 等 木霉菌生物防治及促 进植物生长机制研究进展 J 吉林农业大学学报 2020 42 3 237 247 5 魏林 梁志怀 吕刚 等 哈茨木霉T2 16菌剂对建兰防病及 促生长效果的研究 J 中国园艺文摘 2017 33 2 45 48 6 靳亚忠 熊亚男 齐娟 等 黄瓜嫁接苗与接种哈茨木霉菌 黄瓜直根苗对根腐病防效及根系生理响应 J 干旱地区 农业研究 2022 40 4 10 22 7 赵兴丽 陶刚 娄璇 等 钩状木霉在辣椒根际定殖动态及 其对辣椒疫病的生物防治 J 中国农业科技导报 2020 22 5 106 114 8 马光恕 梁枭 李梅 等 木霉菌对黄瓜生理特性及立枯病 防治效果的影响 J 中国生物防治学报 2021 37 2 277 285 9 刘雪莹 抗生素杀菌剂与木霉菌联合应用对黄瓜棒孢叶斑 病的防治效果 D 秦安 山东农业大学 2022 10 陈捷 窦恺 高永东 等 木霉菌在玉米病害生物防治中的 作用机制及应用 英文 J 菌物学报 2014 33 6 1154 1167 11 丁万隆 程惠珍 陈君 应用木霉制剂防治几种药用植物 病害的研究 J 中国中药杂志 2003 1 28 31 12 孙虎 杨丽荣 全鑫 等 木霉生防机制及应用的研究进展 J 中国农学通报 2011 27 3 242 246 编辑 牛 佳 调查日期 2022年 6月30日 2022年 7月6日 2022年 7月13日 处理代号 CK 处理1 处理2 处理3 CK 处理1 处理2 处理3 CK 处理1 处理2 处理3 发病率 95 80 25 00 20 80 4 17 95 80 29 17 25 00 4 17 100 00 45 83 29 17 8 33 病情指数 43 1 3 aA 3 0 5 cC 7 1 5 bB 0 5 0 12 dD 70 17 aA 7 1 5 cC 17 8 bB 4 1 3 cC 86 2 98 aA 16 6 28 cC 25 11 6 bB 8 2 61 dD 相对防治效果 93 02 83 72 98 84 90 00 75 71 94 29 81 40 70 93 90 70 注 数字后不同字母表示Duncan s检测在0 05水平下 小写字母 和0 01水平下 大写字母 显著 表1 木霉菌剂和化学药剂在蝴蝶兰大苗期对白绢病的防治效果 试验研究 EXPERIMENTALSTUDY 17