不同杀菌剂对小白菜软腐病菌室内活性的影响及田间防效试验.pdf

中国果菜 China Fruit bactericides EC 50 value controleffect 栽培生理 CultivationPhysiology 小白菜 学名不结球白菜 Brassica campestris ssp Chinensis Makina 又名青菜 鸡毛菜 油菜等 是我国重 要的栽培蔬菜 具有生长周期短 种类多样 适应性广 可周年栽培供给和经济效益高等特点 在蔬菜保障供应 中起到了重要作用 是人们喜爱的绿叶蔬菜之一 1 软腐 病是小白菜生产中发生的一种重要病害 在我国大部分 产区广泛发生 该病在小白菜全生育期均可造成危害 高温高湿环境利于病菌侵染 发病初期叶基部出现水渍 状斑点 后期小白菜茎基部腐烂 严重时导致整株腐烂 死亡 造成减产甚至绝产 2 小白菜生长喜冷凉气候条 件 在夏季高温栽培时往往出现生长缓慢 抗性降低的 情况 3 此时软腐病最容易爆发 防治难度最大 使用化学杀菌剂是防治小白菜软腐病最直接有效 的方法 长期以来由于软腐病的防治用药种类不合理 防治药剂单一等问题 选择高效低毒的杀菌剂对于小白 菜软腐病的防治尤为重要 传统上常用的防治药剂为农 用链霉素及铜制剂 然而由于农用链霉素及铜制剂长期 大量使用 造成病原菌易产生抗药性 且链霉素能够在 人体内富集 2016年后已禁止在农作物上使用 4 总之不 同药剂对于软腐病的防治机制和效果不同 目前对小白 菜软腐病药剂防效研究有限 且多聚焦于传统抗生素和 铜制剂 针对新型杀菌剂的防效研究较少 毒力效果与 田间防效研究也亟需加强 本研究选择常用的6种高效 低毒杀菌剂 测定了不同浓度杀菌剂对小白菜软腐病菌 室内抑制效果 并开展田间药效试验 比较了各药剂间 的防效 以期筛选出适用于软腐病防治的药剂 1 材料与方法 1 1 试验材料及供试药剂 软腐病病原菌 Pectobacterium carotovorum subsp carotovorum 宁波市农业科学研究院蔬菜所分离鉴定 20 春雷霉素水分散剂 四川海润作物科学技术有限公 司 20 噻森铜悬浮剂 浙江东风化工有限公司 3 中生 菌素可湿性粉剂 深圳诺普信农化股份有限公司 30 噻 唑锌悬浮剂 浙江新农化工股份有限公司 50 氯溴异氰 尿酸可溶粉剂 南京南农农药科技发展有限公司 80 乙 蒜素乳油 开封大地农化生物科技有限公司 1 2 菌悬液配制及不同杀菌剂室内毒力测定 用牛津杯法测定不同杀菌剂对小白菜软腐病菌的 影响 将 80 保存的软腐病菌在NA平板上划线活化 置于28 培养箱中培养48 h 在平板上挑取单菌落接 种在NB培养基中 28 180 r min振荡培养12 h 配制 成软腐病菌菌悬液 后将菌悬液均匀涂布在NA平板上 制成含菌平板 用镊子将已灭菌的牛津杯 外径8 mm 均匀地放在含菌平板上 每皿放置7只牛津杯 将6种杀 菌剂分别用无菌水配制成不同质量浓度的液剂 分别吸 取各浓度杀菌剂200 L加入牛津杯内 以加入清水的 处理为对照 每个处理重复3次 置于28 的恒温培养 箱中 48 h后测量抑菌圈直径 并按照公式 1 计算每种 药剂的抑菌率 抑菌率 处理组抑菌圈直径 空白组抑菌圈直径 处理组抑菌圈直径 100 1 将抑菌率转化为抑菌率概率值 5 以药剂浓度的对 数值为横坐标 以抑菌率概率值为纵坐标 计算每个药 剂的毒力回归方程y a bx 计算供试药剂对供试菌株的 毒力回归方程 y a bx 相关系数 r 及有效抑制中浓度 EC 50 值 以EC 50 值衡量不同杀菌剂对软腐病菌的毒力 1 3 不同杀菌剂对田间小白菜软腐病发生情况影响 及防效 试验地点位于浙江省宁波市鄞州区高新农业技术 试验园区 参试小白菜品种为 甬青8号 为宁波丰登种 业科技有限公司生产 试验按照 农药田间药效试验准 则 GB T 17980 114 2004 执行 略有修改 选取常年 连作小白菜 软腐病近几年发病严重的塑料薄膜大棚 将小白菜栽培于大棚内 畦宽 连沟 1 2 m 沟渠畅通 小 区面积10 m 2 生产示范面积共333 m 2 土壤肥力中等 pH 7 1 每个处理设定3个小区 以喷施清水作为对照 不同 杀菌剂的用量以各商品包装标注的处理用量为准 详见 表1 分别在移栽后的第7天及第14天进行施药处理 连续施药2次 试验期间不施用其他杀菌剂 除草剂和杀 虫剂 只进行常规管理和基本的农事操作 在第2次施药 后第2天调查不同处理间软腐病发病情况 每个小区统 计50株 对小白菜软腐病进行病害分级 并根据公式 2 3 4 分别计算软腐病发病率 病情指数及防治效果 病害等级分级标准 0级 无症状 1级 始见病斑 1 2片叶发病 3级 1 3以下腐烂 5级 1 3 1 2腐烂 7 级 1 2至全株腐烂 栽培生理 高天一 等 不同杀菌null对小白菜软腐病菌室内null性及田间防效试验 59 药剂名称 质量浓度 g mL 1 抑菌率 药剂名称 质量浓度 g mL 1 抑菌率 T2 10000 78 T5 100000 82 5000 76 50000 71 2000 72 20000 56 1000 69 10000 41 500 64 5000 34 T3 135000 64 T6 10000 60 67500 60 5000 53 33750 58 2000 38 27000 56 1000 27 13500 53 500 20 T4 70000 68 T7 50000 72 28000 67 25000 68 14000 64 10000 63 10500 60 7500 56 7000 56 5000 53 中国果菜 发病率 病株数 调查总株数 null100 2 病情指数 各级病株数 该病级值 调查总株数 最高级值 null100 3 防治效果 对照区病情指数 处理区病情指数 对照区病情指数 null100 4 表 1 不同杀菌剂处理方式 Table 1 Treatments of different bactericides 注 EC为乳null SC为悬浮null SP为可溶粉null WP为可湿性粉 null WC为水分散null 1 4 数据处理 用DPS数据处理系统 v20 00a版 对数据进行统计 分析 多重比较分析采用LSD法分析 2 结果与分析 2 1 不同杀菌剂对小白菜软腐病菌的室内抑制作用 从表2可以看出 6种杀菌剂在NA培养基平板上 对软腐病菌均表现出一定的毒力 对病菌产生了不同程 度的抑制作用 各药剂的抑菌作用随着处理浓度的增加 而增加 其中抑菌率最高的为T5及T2 最大质量浓度下 抑菌率分别为82 和78 T6 T7 T3 T4最大质量浓度 下抑菌率分别为60 72 64 和68 2 2 不同杀菌剂对小白菜软腐病菌的室内生物活性 如表3所示 6种杀菌剂处理的质量浓度对数与对 应的抑菌率概率值呈正相关的线性关系 同时回归方程 的相关系数r均在0 90以上 表明试验设计中两个变量 的拟合度高 生物活性方程得出的各药剂的EC 50 值具有 较高的可靠性 EC 50 值由高至低顺序为T3 T4 T2 T5 T6 T7 其中T7的EC 50 值最低 为3 16 g mL 对 软腐病菌的毒力最强 而T3的EC 50 值为7 849 32 g mL 对软腐病菌的毒力最弱 T1处理无室内抑菌生物活性 表 2 不同杀菌剂对小白菜软腐病菌的室内平板抑菌率 Table 2 Indoor plate inhibition rates of different bactericides against P carotovorum of packchi cabbage 处理 杀菌剂名称 剂型 每667m 2 田间制剂用量 T1 CK 清水 T2 80 乙蒜素 EC 200mL T3 20 噻森铜 SC 300mL T4 30 噻唑锌 SC 150mL T5 50 氯溴异氰尿酸 SP 90g T6 3 中生菌素 WP 45g T7 20 春雷霉素 WC 30g 注 T1处理null室内抑菌毒力效果 栽培生理60 药剂处理 发病率 病情指数 防效 T3 62 00 14 00 abc 46 76 11 44 ab 14 18 6 45 bc T4 51 33 13 32 bcd 38 19 7 14 bc 29 19 7 63 ab T5 50 00 16 00 cd 35 90 11 77 c 34 16 14 45 a T6 47 67 16 17 d 34 57 10 11 c 36 03 15 75 a T7 44 67 6 43 d 32 29 2 54 c 38 62 14 13 a T2 64 67 15 01 ab 48 10 14 07 ab 12 17 9 46 c T1 76 00 17 32 a 54 10 9 77 a 表 3 不同杀菌剂对小白菜软腐病菌的室内生物活性测定 Table 3 The indoor biological activity of different bactericides against P carotovorum of pakchoi cabbage 2 3 不同杀菌剂对小白菜软腐病的田间防效 不同杀菌剂对小白菜软腐病田间防效的影响如表 4所示 根据每种药剂商品包装上的最适宜用量进行田 间施用 6种供试药剂均有一定的防治效果 且不同杀 菌剂之间的发病率 病情指数及防效间存在差异 防效 由强至弱为T7 T6 T5 T4 T3 T2 T7处理的发病 率及病情指数均为最低 分别为 44 67 和 32 29 防效 最高 为38 62 与T1处理相比 T2与T3的发病率及 病情指数无显著性差异 T7 T6 T5 T4之间防效无显著 性差异 但与T3 T2之间有显著差异 所有处理均未发 现药害情况 表 4 不同杀菌剂处理的田间小白菜软腐病发病率 病情指数及防效 Table 4 Incidence disease index and control efficiency of soft rot of pakchoi cabbage of different bactericides 注 同列不同小写字母表示差异显著 P 0 05 3 结论与讨论 不同的药剂防治病菌的机制不同 目前常用防治细 菌性病害的药剂主要包括铜制剂 抗生素类药剂及其他 类型药剂等 6 本研究选用了不同类型的杀菌剂进行防 效试验 其中春雷霉素和中生菌素属于抗生素类药剂 噻 森铜属于铜制剂 乙蒜素属于植物性诱抗剂 氯溴异氰尿 酸属于氧化型消毒剂 田间试验结果表明 乙蒜素及噻 森铜处理后软腐病发病率及病情指数与CK处理无显著 性差异 且这两种药剂的防效差异不显著 而春雷霉素 中生菌素 氯溴异氰尿酸处理后的发病率及病情指数与 CK处理均有显著性差异 表明抗生素类药剂及氧化型 消毒剂防效最佳 推测防治软腐病最佳的方式是通过抑 菌作用杀灭细菌 噻菌铜和噻唑锌均具有噻唑基团 能够通过植物内 吸和金属离子杀菌的方式进行病害防治 7 8 但针对这两 种杀菌剂对软腐病的毒力测定及防效比较还未有研究 本研究发现 在室内生物活性测定及田间防效试验中 30 噻唑锌SC的EC 50 值 田间软腐病发病率及病情指 数均低于20 噻森铜SC 防效高于20 噻森铜SC 但无 显著性差异 前人研究表明由于铜化合物杀菌剂在田间 长期使用 能够使病原菌出现耐铜现象 9 推测本研究所 用软腐病菌对铜离子有一定的耐受能力 而对锌离子的 耐受能力较弱 因此铜制剂在田间小白菜软腐病的防治 中可能会存在防效不佳的情况 可用噻唑锌替代噻森铜 进行防治 30 噻唑锌SC的EC 50 值高于20 春雷霉素 WC 3 中生菌素WP和50 氯溴异氰尿酸SP 但田间 防效并无显著性差异 推测噻唑锌虽然毒性弱 但噻唑 基团的通过植物内吸作用一定程度上增强了田间植株 对软腐病菌的防护作用 乙蒜素是一种植物仿生农药 是大蒜素提取物 在许 多病原菌防治中能起到很好的防效 包括马铃薯晚疫病 大豆细菌性斑点病 猕猴桃细菌性溃疡病等 10 13 本研究 中发现 80 乙蒜素EC的EC 50 值为55 76 g mL 对软 腐病菌具有毒性作用 且毒力高于30 噻唑锌SC EC 50 值为1 495 17 g mL 但对田间软腐病的防效最差 韩 凤英等 14 研究发现大白菜软腐病的田间防治过程中 氨 基 乙蒜素微乳剂防效最差 本文研究与前人报道一致 推测原因可能为乙蒜素属于在蔬菜和土壤中易消解的 农药 防效期短 15 软腐病菌在土壤中存活时间较长 具 有持续侵染植株的能力 乙蒜素虽然具有一定的抑菌能 力 但田间施用后分解过快 防治期较短 筛选适宜防治软腐病的高效低毒药剂 对软腐病的 绿色防控具有重要意义 目前已有研究进行了白菜软腐 药剂处理 回归方程 相关系数r EC 50 g mL 1 T2 y 0 3599x 4 3715 0 9873 55 76 T3 y 0 2767x 3 9323 0 9932 7849 32 T4 y 0 3074x 4 0241 0 9166 1495 17 T5 y 1 0366x 3 8091 0 9954 14 09 T6 y 0 8729x 4 4171 0 9971 4 65 T7 y 0 5068x 4 7469 0 9742 3 16 栽培生理 高天一 等 不同杀菌null对小白菜软腐病菌室内null性及田间防效试验 61 上接第57页 14 DICKMA N N DONALD I Photosynthesis water relations and growth of two hybrid Populus genotypes during a severe drought J Revue Canadienne De Recherche Foresti 1992 22 8 1094 1106 15 陈新红 刘凯 徐国伟 等 结实期氮素营养和土壤水分对 水稻光合特性 产量及品质的影响 J 上海交通大学学报 农业科学版 2004 1 48 53 16 聂伟燕 水分胁迫下线辣椒生长发育及生理响应 D 西安 西北农林科技大学 2014 16 19 17 蒋艺 邱正坤 颜爽爽 等 不同逆境胁迫处理对茄子品质 指标的影响 J 北方园艺 2023 11 15 21 18 李鑫 敖志超 周洁 等 粉葛生理特性对干旱胁迫的响应 J 分子植物育种 2023 21 15 5110 5121 19 刘朝霞 土壤干旱胁迫对番茄根系生长 气孔特性及保护 酶活性的影响 D 南京 南京信息工程大学 2016 36 38 20 张淋淋 孙海 于红霞 等 水分胁迫对西洋参叶片生理生 化指标的影响 J 吉林农业大学学报 2024 4 403 408 中国果菜 病的室内毒力测定 但并未进一步进行相关田间防效试 验 16 本研究通过室内毒力测定及田间防效试验 对 6 种杀菌剂的 EC 50 值 田间病情指数 防效指标进行了 综合分析 发现 20 春雷霉素 WC 3 中生菌素 WP 50 氯溴异氰尿酸 SP 及 30 噻唑锌 SC 对防治软腐 病的防治效果较好 可作为防治小白菜软腐病的优选 杀菌剂 参考文献 1 张庆 郭焕茹 范雪莲 等 夏季青梗菜品种比较试验 J 中 国农业信息 2016 24 123 124 2 马俊秀 闫更轩 陈盛宇 等 蔬菜软腐病生物防治策略研 究进展 J 湖北农业科学 2022 61 13 51 57 3 邹鑫 李新奇 沈雪林 等 苏州地区夏季小白菜优质安全 快速高效栽培技术 J 现代农业科技 2019 22 46 51 4 徐习习 生态环境中农用链霉素残留的光电化学传感分析 D 镇江 江苏大学 2018 3 8 5 徐太东 梁巧兰 吴琼 等 甜瓜叶斑病病原鉴定及室内药 剂筛选 J 中国农学通报 2019 35 20 104 111 6 陈苗苗 陈列忠 植物细菌性病害及其防治措施 J 浙江农 业科学 2022 63 8 1798 1804 1808 7 韩凤英 杨慧 秦永梅 等 20 噻唑锌悬浮剂对白菜软腐 病的田间防效 J 农药 2016 55 8 602 603 8 代艳娜 刘青海 潘虎 等 大白菜软腐病登记农药及防治 效果分析 J 农业与技术 2020 40 9 15 19 9 吴亚男 高必达 杨玉文 等 植物相关细菌铜抗性研究进 展 J 湖北农业科学 2012 51 11 2169 2171 10 张美权 乙蒜素对马铃薯晚疫病的抑制作用研究 D 重 庆 重庆大学 2021 55 59 11 张京 孟维实 孙瑛健 等 大豆细菌性斑点病防治药剂筛 选 J 农药 2021 60 9 687 690 12 胡容平 石军 林立金 等 猕猴桃溃疡病高效防治药剂的 筛选及田间应用评价 J 中国农学通报 2020 36 6 112 116 13 苏晓州 常翠莲 高承宇 等 乙蒜素对苹果树腐烂病的防 治效果与其作用机理 J 植物保护学报 2024 51 4 863 874 14 韩凤英 杨慧 杨向黎 等 4种杀菌剂对白菜软腐病的田 间防效 J 安徽农业科学 2018 46 20 125 126 140 15 佘佳荣 杨仁斌 付强 等 乙蒜素乳油在黄瓜和土壤中的 残留消解动态 J 环境科学与管理 2009 34 8 25 28 37 16 姚玉荣 霍建飞 贲海燕 等 7种杀菌剂对大白菜软腐病 菌的室内毒力测定 J 天津农业科学 2022 28 S1 53 56 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 栽培生理 62