兰州百合脱毒组培苗炼苗技术规程_厚毅清.pdf

寒旱农业科学 2025 4 1 84 86 Journal of Cold Arid Agricultural Sciences 兰州百合 Lilium davidii var unicolor 是一种 独特的中国本土甜百合品种 因其显著的营养和药 用价值而闻名 兰州百合以大型白色鳞茎和甜美 的口感为特征 在甘肃省种植已超过400年 1 3 兰州百合不仅是美味佳肴 同时也是一种具有健脾 养胃和抗衰老等功效的药用植物 截至目前 甘肃 省种植面积约1 58万hm 2 总产量11 16万t 产值 10 06亿元 兰州百合作为原国家质量监督检验检 疫总局认可的地理标志保护产品 是甘肃省重要的 经济作物 也是当地农民致富的支柱产业 4 近年来 随着市场需求的增加 兰州百合种 植面积不断扩大 加之长期无性繁殖 百合植株体 内病毒积累 导致品种退化 品质逐年下降 5 6 植物组织培养脱病毒技术是以组织培养技术为媒 介 通过一系列技术手段去除植物体内病毒病原 从而培育并繁殖出无毒植株 脱去病毒的植株具 有抗病能力强 繁殖效率高 作物产量和品质显 著提高等特点 目前已经成为百合种苗商品化生 产的主要技术 7 8 然而 将脱毒组培苗驯化成商 品栽培苗 即炼苗 提高驯化成活率 是该技术 成熟应用的核心部分 9 我们以多年的试验研究 及兰州百合组培脱毒苗生产经验 提出并制定兰 州百合组培脱毒苗的炼苗技术规程 确保兰州百 合脱毒种苗的可持续生产 为兰州百合产业的前 摘要 兰州百合是中国名特优新农产品之一 为促进兰州百合产业中优质脱毒种苗的高质量标准化生产 根据国家及行业标准 结合多年试验和生产经验 从适用范围 苗体选择 炼苗方法与培养条件 后期管理等 方面总结制定了兰州百合组培脱毒苗炼苗技术规程 本规程的制定可提高兰州百合组培脱毒苗移栽的成活率 以期为规模化生产提供有力的技术支持 关键词 兰州百合 脱毒苗 炼苗 组织培养 移栽 技术规程 中图分类号 S644 1 文献标志码 B 文章编号 2097 2172 2025 01 0084 03 doi 10 3969 j issn 2097 2172 2025 01 014 Technical Regulation for the Seedling Hardening in Virus free Tissue Culture Seedlings of Lanzhou Lily HOU Yiqing WANG Liguang ZHANG Minmin LIU Yaoquan PEI Huaidi InstituteofBiotechnology GansuAcademyofAgriculturalSciences LanzhouGansu730070 China Abstract Lanzhou lily is one of the national famous special and new agricultural products Based on national and industry standards and combined with years of testing and production experience the technical regulation for the hardening of Lanzhou lily tissue culture virus free seedlings were summarized and formulated from the aspects of application scope selection of tissue culture virus free seedlings hardening methods and culture conditions and post management The formulation of this regulation could improve the survival rate of transplanted Lanzhou lily tissue culture virus free seedlings which would provide strong technical support for the large scale production of high quality virus free seedlings in the Lanzhou lily industry Key words Lanzhou lily Virus free seedling Seedling hardening Tissue culture Transplanting Technical regulation 兰州百合脱毒组培苗炼苗技术规程 厚毅清 王立光 张敏敏 刘耀权 裴怀弟 甘肃省农业科学院生物技术研究所 甘肃 兰州 730070 收稿日期 2024 07 06 基金项目 国家现代农业产业技术体系项目 CARS 21 甘肃省重点研发计划项目 23YFNA0032 甘肃省现代农业 科技支撑体系区域创新项目 2022GAAS02 甘肃省省级人才重点项目 2024RCXM13 作者简介 厚毅清 1982 男 甘肃金昌人 助理研究员 主要从事组织培养技术及分子标记技术的研究与开发方面 的工作 Email lishuiqing376 通信作者 裴怀弟 1979 女 甘肃天水人 副研究员 主要从事作物种苗快繁与栽培技术研究方面的工作 Email phdfeixiang 端打下坚实基础 1 适用范围 本规程规定了兰州百合脱毒组培苗的炼苗方 式 组培脱毒苗选择 基质的配置 炼苗方法 培养条件 后期管理技术措施 本规程适用于甘肃省兰州市七里河区 榆中 县 定西市临洮县和临夏州永靖县 海拔1500 3500m的育苗温室内 其他产区可参考执行 其 中 育苗温室需符合GB T51424 2022规范 10 2 规范性引用文件 下列文件对于本规程的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于 本规程 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本规程 GB T51424 2022 农业温室结构设计标准 10 GB T 8321 10 2018 农药合理使用准则 十 11 NY T1276 2007 农药安全使用规范总则 12 NY T1107 2020 大量元素水溶肥料 13 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本规程 3 1 脱毒组培苗 是指以组织培养技术为媒介 通过一系列技 术手段去除百合苗体中的病毒病原 从而培育并 繁殖出的健康百合种苗 14 3 2 炼苗 因植物组织培养技术的特征 组培苗是在密闭 狭小可控的环境中生长 不能在室外的环境中存活 需通过调整培养环境等各种方法将其驯化 使其逐 渐适应室外环境并生长 该过程称作炼苗 15 16 3 3 脱毒组培苗根部器官定向培养 是指通过组织培养技术 将脱毒组培苗接种 于特定的培养基中 诱导其根部向特定的方向发 育生长 4 苗体选择 4 1 脱毒组培苗根部器官定向培养 将脱毒组培苗反复继代 接种于MS NAA0 2 mg L的培养基中进行根部器官膨大培养 培养温 度24 使苗体达到炼苗标准 4 2 炼苗苗体的选择 从根部膨大培养的脱毒组培苗中 选择苗体 长6 7cm 具有4 6条主根的健壮苗体进行炼 苗 未达到条件的苗体可接种于4 1中所述的培养 基及培养条件中 反复继代至炼苗标准 5 基质的配置 草炭土 珍珠岩 蛭石按体积比1 2 2混 合使用 基质可重复利用 多菌灵可湿性粉剂兑水 喷洒到基质中并搅拌均匀 多菌灵用量为50g m 3 搅拌均匀后的基质达到轻微潮湿即可装盆使用 多菌灵的使用应符合GB T8321 10 2018规定 基质伴药处理场所应符合NY T 1276 2007规 定 6 炼苗 6 1 脱毒组培苗驯化 将选择的脱毒组培苗带瓶放置于苗床上 放 置环境光照强度 12 000lx 温度为23 26 24h后 打开瓶盖继续在光照强度 5000lx 温 度23 26 湿度80 100 下放置1d 第3 天 调节放置环境光照强度 5000lx 温度23 26 湿度50 60 第4天 调节放置环境 光照强度 5000lx 温度23 26 湿度40 60 驯化第4天如遇叶片干卷 可临时平铺报纸 于瓶体上方 并将报纸浇湿 6 2 苗体处理 将驯化4d的脱毒组培苗从瓶体中取出 放置 于干净的盆中 加入清水 清洗掉苗体根部培养 基块 小心操作 以防损伤苗体根部 洗净去除 培养基后 苗体用清水冲洗2遍 待用 6 3 扦插 在基质上用干净的镊子做出2 3cm的孔洞 将驯化并清洗过的脱毒组培苗根部向下扦插于基 质上的孔洞中 用周围基质填充并压实孔洞 根 部距离基质表层4 6cm 扦插苗体间距3 4cm 扦插完成后浇透水 6 4 缓苗 将扦插于基质上的脱毒苗平铺于苗床上进行 缓苗处理 缓苗环境光照强度 5 000 lx 温度 23 26 空气湿度50 70 光照强度可用 黑色遮阴网控制 缓苗2d后可去除 7 后期管理 7 1 光照 保持培养环境光照强度 12000lx 厚毅清 等 兰州百合脱毒组培苗炼苗技术规程1期 85 7 2 温度 保持培养环境温度25 28 夜间温度 15 7 3 湿度 保持空气湿度40 70 基质湿度18 30 7 4 病虫害防治 待萎蔫的百合叶片变挺拔后 及时处理发现 的病虫害 百合病害主要有灰霉病和疫病 灰霉 病可感染叶片和茎 发病初期可用50 多菌灵可 湿性粉剂500 800倍液喷施防治 每14d喷施1 次 连喷1 2次 也可用1000亿株 g的枯草芽 孢杆菌1000倍液喷施 每7d喷1次 连喷2 3 次 同时控制温棚内的湿度 疫病可造成根茎部 花器枯萎腐败或全株枯萎死亡 发病初期可用 75 百菌清可湿性粉剂600倍液 或25 甲霜灵 可湿性粉剂1500倍液喷雾防治 每10d喷1次 连喷2 3次 同时控制温室和基质的湿度 20 后期应及时将患病植株拔除销毁 常见的百合虫害有蚜虫和粉虱 主要危害百 合叶片和茎 粉虱可使用黄色 绿色粘板按说明 书诱杀 盛发期可用70 艾美乐水分散粒15000 倍液喷杀 蚜虫可用高氯啶虫脒微乳剂 高效氯 氰菊酯2 啶虫脒3 20mL兑水20L 喷雾 防杀 1d喷1次 连喷2d 其余病虫害可依据NY T1276 2007 GB T 8321 10 2018 适当使用低毒农药进行防治 7 5 营养补充 脱毒苗炼化在基质上存活后 可在浇水时适 量施用稀释的液体肥料 以促进苗体生长和生根 稀释的液体肥料应符合NY T1107 2020规定 成分含量N P 2 O 5 K 2 O 50 Fe B为0 2 0 3 每次施用量为0 42kg hm 2 叶面喷洒至基质浇湿 8 注意事项 提高百合脱毒组培苗炼苗成活率有三个关键 技术环节 一是选择根部健壮的苗体进行炼苗 二是组培苗瓶盖揭开后 环境湿度 70 三是经 过驯化 清洗的脱毒组培苗扦插在基质上进行缓 苗 培养环境的光照强度 5000lx 湿度 50 该缓苗过程可用打湿的报纸或遮阴网进行时宜调 节 参考文献 1 裴怀弟 李 琦 李淑洁 等 兰州百合试管小鳞茎 膨大及碳水化合物变化规律研究 J 甘肃农业科技 2021 52 12 5 10 2 厚毅清 罗俊杰 欧巧明 等 卷丹及主要食用百合 EST SSR鉴别体系的构建 J 中草药 2020 51 16 4308 4315 3 李玉帆 明 军 杨新艳 等 15个百合品种和品种 的食用性比较研究 J 园艺学报 2013 40 S 2693 2694 4 宋小霞 兰州百合产业发展路径研究与思考 J 甘肃 农业 2019 10 49 50 5 柳玉晶 百合植物组织培养脱毒技术研究进展 J 现 代园艺 2023 46 13 12 14 6 尹 燕 杨道兰 梁玉文 等 光暗条件下蔗糖和大 量元素对兰州百合鳞茎生长的影响 J 寒旱农业科学 2023 2 3 254 259 7 樊亚敏 周云帆 浅谈组培苗的脱毒及应用 J 现代 园艺 2023 46 5 82 84 8 高文敬 董景湘 刘灵娣 中药材组培脱毒技术研究 进展 J 河北农业科学 2023 27 2 83 86 90 9 王 昊 哈 蓉 杨 波 等 酿酒葡萄组培苗驯化 炼苗关键因子研究 J 农业科学研究 2023 44 3 38 43 10 中华人民共和国住房和城乡建设部 中华人民共和 国国家市场监督管理总局 农业温室结构设计标准 GB T 51424 2022 S 北京 中国计划出版社 2022 11 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国 国家标准化管理委员会 农药合理使用准则 十 GB T 8321 10 2018 S 北京 中国标准出版社 2018 12 中华人民共和国农业农村部 农药安全使用规范总 则 NY T 1276 2007 S 北京 中国标准出版社 2007 13 中华人民共和国农业农村部 大量元素水溶肥料 NY T 1107 2020 S 北京 中国农业出版社 2020 14 董 薇 余永亮 杨红旗 等 豫菊花2号 脱毒培 养及脱毒苗分级 J 分子植物育种 2024 22 13 4333 4340 15 葛玉君 巩 娜 杨建峰 等 棉花组培苗高效移 栽驯化技术的研究 J 中国农学通报 2024 40 7 14 19 16 张雪冰 王 鸿 张 帆 等 山桃生根成苗关键 技术研究 J 寒旱农业科学 2023 2 3 270 274 4卷86