NY_T 4492-2025 番茄品种鉴定SSR分子标记法.pdf

2025 01 09 发布 2025 05 01 实施 番茄品种鉴定 SSR分子标记法 05 中华人民共和国农业行业标准 备案号 XXXX XXXX 65 020 01 CCS B 4492 2025 Identification of tomato Solanum Lycopersicum L varieties SSR marker method 中华人民共和国农业农村部 发布 NY T 目 次 前言 范围 规范性引用文件 术语和定义 缩略语 原理 主要仪器设备及试剂 溶液配制 引物相关信息 参照品种 操作程序 结果统计 结果判定 附录A 规范性 主要仪器设备及试剂 附录B 规范性 溶液配制 附录C 规范性 引物名单及序列 附录D 资料性 引物相关信息 附录E 资料性 参照品种相关信息 NY T 前 言 本文件按照G B T 标准化工作导则 第 部分 标准化文件的结构和起草规则 的规定起 草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由农业农村部种业管理司提出 本文件由全国植物新品种测试标准化技术委员会 S A C T C 归口 本文件起草单位 农业农村部科技发展中心 北京通州国际种业科技有限公司 北京市农林科学院蔬 菜研究所 本文件主要起草人 韩瑞玺 王均帅 马莹雪 靳凤 张建 邓超 王晨宇 霍秀爱 温常龙 冯艳芳 李嫒 嫒 王铭堂 李常保 唐浩 陈红 张秀杰 NY T 番茄品种鉴定 SSR分子标记法 范围 本文件规定了利用简单重复序列 S S R 标记进行番茄 SolanumLycopersicumL 品种鉴定的操作 程序 结果统计与结果判定 本文件适用于番茄品种S S R指纹数据采集 数据库构建和品种鉴定 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 其中 注日期的引用文件 仅该日期对应的版本适用于本文件 不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文 件 G B T 农作物种子检验规程 扦样 G B T 分析实验室用水规格和试验方法 N Y T 植物品种鉴定D N A分子标记法 总则 术语和定义 N Y T 规定的术语和定义适用于本文件 缩略语 下列缩略语适用于本文件 A P S 过硫酸铵 a m m o n i u m p e r s u l p h a t e b p 碱基对 b a s e p a i r C T A B 十六烷基三甲基溴化铵 c e t y l t r i m e t h y l a m m o n i u m b r o m i d e D N A 脱氧核糖核酸 d e o x y r i b o n u c l e i c a c i d d N T P s 脱氧核糖核苷三磷酸 d e o x y r i b o n u c l e o s i d e t r i p h o s p h a t e E D T A 乙二胺四乙酸 e t h y l e n e d i a m i n e t e t r a a c e t i c a c i d P A G E 聚丙烯酰胺凝胶电泳 p o l y a c r y l a m i d e g e l e l e c t r o p h o r e s i s P C R 聚合酶链式反应 p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n S S R 简单重复序列 s i m p l e s e q u e n c e r e p e a t Taq酶 耐热D N A聚合酶 Taq D N A p o l y m e r a s e T r i s 三羟甲基氨基甲烷 T r i s h y d r o x y m e t h y l m e t h y l a m i n o m e t h a n e T H A M T E 三羟甲基氨基甲烷乙二胺四乙酸 T r i s E D T A T B E 三羟甲基氨基甲烷硼酸盐乙二胺四乙酸 T r i s b o r a t e E D T A T E M E D 四甲基乙二胺 N N N N t e t r a m e t h y l e t h y l e n e d i a m i n e 原理 不同番茄品种基因组中S S R的重复次数存在差异 这种差异可通过P C R扩增及电泳方法进行检测 进而区分不同的番茄品种 主要仪器设备及试剂 主要仪器设备及试剂见附录A NY T 溶液配制 溶液配制方法见附录B 引物相关信息 引物名单及序列见附录C 引物相关信息见附录D 参照品种 参照品种相关信息见附录E 操作程序 样品准备 送检样品可为种子 幼苗 叶片等组织或器官 样品需扦样时 应符合G B T 的要求 每份样 品取不少于 个个体的叶片或其他等效物 混合分析 必要时进行个体检测 DNA提取 取幼苗或叶片 m g m g 置于 m L离心管 加液氮充分研磨 每管加入 L经 预 热的C T A B提取液 充分混合 水浴 m i n m i n 其间多次轻缓颠倒混匀 每管加入与C T A B 提取液等体积的三氯甲烷和异戊醇混合液 轻缓混匀后静置 m i n r m i n离心 m i n 吸取上清 液转移至新的离心管中 加入等体积预冷的异丙醇 轻轻颠倒混匀 放置 m i n r m i n离 心 m i n 弃上清液 用体积分数为 的乙醇溶液洗涤 遍 晾干 加入 L双蒸水或T E缓冲液 充分溶解 检测D N A浓度后 备用 注 以上为推荐的D N A提取方法 D N A质量能够满足P C R扩增要求的其他D N A提取方法均适用 D N A溶液的紫 外吸光度O D 与O D 的比值宜介于 注 三氯甲烷和异戊醇混合液中三氯甲烷与异戊醇的体积比为 PCR扩增 反应体系 P C R扩增反应体系的总体积和各组分的终浓度参照表 配制 可以依据试验条件调整 表 中的缓 冲液若含有氯化镁 M g C l 不再加M g C l 溶液 加等体积双蒸水替代 利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 P A G E 检测时选择普通引物 利用荧光毛细管电泳检测时选择荧光标记引物 荧光标记位于上游引物 端 推荐的荧光标记见附录D 表 PCR扩增反应体系 反应组分原浓度终浓度推荐反应体积 L 缓冲液 含M g C l d N T P s m m o l L m m o l L Taq酶 U L U L 上游引物 m o l L mm o l L 下游引物 m o l L mm o l L D N A n g L n g L 双蒸水 总体积 反应程序 推荐反应程序为 预变性 m i n 变性 s 退火 s 延伸 s 共 个循环 NY T 延伸 m i n 产物 保存 反应程序中各反应参数可根据P C R扩增仪型号 酶 引物等不同而做适当的 调整 PCR产物检测 变性PAGE 制胶 用洗涤剂将玻璃板清洗干净 再用双蒸水 无水乙醇分别擦洗 遍 玻璃板干燥后 将 m L亲和 硅烷工作液均匀涂在长玻璃板上 将 m L剥离硅烷工作液均匀涂在带凹槽的短玻璃板上 操作过程 中防止 块玻璃板互相污染 玻璃板彻底干燥后 将 m m厚的塑料隔条整齐放在长玻璃板两侧 盖上 凹槽短玻璃板 用夹子固定 用水平仪检查玻璃胶室是否水平 取 m L质量分数为 的P A G E胶溶 液 加入 L四甲基乙二胺 T E M E D 和 L质量分数为 的过硫酸铵 A P S 迅速混匀 将胶灌 入玻璃胶室 灌胶过程中防止出现气泡 待胶室灌满后 在凹槽处将 m m厚鲨鱼齿梳子平齐端向里轻 轻插入胶液约 m m 室温聚合 h以上 胶聚合后 清理胶板表面溢出的胶液 轻轻拔出梳子 用水清洗 干净备用 注 为保证检测结果的准确性 建议玻璃板的规格为 c m c m 变性 在 L P C R产物中加入 L 加样缓冲液 混匀 在P C R仪上运行 变性 m i n 取出立即 置于冰上 冷却 m i n以上备用 电泳 将胶板安装于电泳槽上 在电泳正极槽 下槽 加入 m L的 T B E缓冲液 负极槽 上槽 加入 m L经 预热的 T B E缓冲液 使其超过凝胶顶部约 c m V恒压预电泳 m i n m i n 用移液器吹吸加样槽 清除气泡和杂质 将样品梳 鲨鱼齿朝下 插入凝胶 m m m m 每一个加样孔 点入 L L样品 除送检样品外 还应同时加入参照品种扩增产物 V恒压电泳 电泳时间参 考二甲苯青指示带移动的位置和扩增产物预期片段大小范围 见附录D 加以确定 二甲苯青指示带在质 量分数为 P A G E胶电泳的移动位置与 b p扩增产物泳动的位置大致相当 扩增产物片段大小在 b p b p b p b p范围的 电泳参考时间分别为 h h h h 电泳结束后关闭电源 取下玻璃板并轻轻撬开 通常凝胶附着在长玻璃板上 染色 将附着凝胶的长玻璃板胶面向上浸入固定液中 轻轻晃动 m i n后取出 在双蒸水中快速漂洗 时间 不超过 s 将胶板放入染色液中 轻轻晃动 m i n后取出 在双蒸水中快速漂洗 时间不超过 s 将胶 板放入显影液中 轻摇晃动待条带清晰后取出 再迅速放入固定液中定影 m i n取出 在双蒸水中漂洗 m i n 取出胶板 晾干 放在胶片观察灯上观察 记录结果 拍照保存 注 固定液 染色液 双蒸水和显影液的用量 可依据胶板数量和大小调整 以淹没胶面为准 荧光毛细管电泳 P C R产物样品准备 按照预先确定的引物分组 分别取等体积的同一组中不同荧光引物的扩增产物 混匀稀释 从混合液 中吸取 L 加入D N A分析仪专用 孔板中 板中各孔分别加入 L分子量内标和 L去离子 甲酰胺 在P C R仪上 变性 m i n 取出后立即置于冰上 冷却 m i n以上 瞬时离心 s后备用 注 引物分组和稀释倍数通过荧光毛细管电泳预实验确定 等位变异检测 打开D N A分析仪 检查仪器工作状态和试剂状态 将装有样品的 孔上样板放置于样品架基座 上 打开数据收集软件 按照仪器使用手册 编辑样品表 执行运行程序 D N A分析仪将自动运行 并保存 电泳原始数据 数据分析 NY T 数据读取 每个S S R位点的等位变异参照扩增片段大小命名 见附录D 对于变性P A G E 将送检样品在某一 位点扩增片段的迁移位置与对应的参照品种进行比较 确定送检样品在该位点的等位变异 对于荧光毛 细管电泳 通过参照品种消除不同批次间或者不同型号D N A分析仪间可能存在的系统误差 使用片段分 析软件读取送检样品在该位点的等位变异 纯合位点的等位变异数据记为X X 杂合位点的等位变异数据记录为X Y 其中X Y分别为该位点 上的 个等位变异 小片段数据在前 大片段数据在后 缺失位点的等位变异数据记录为 示例 样品在某个位点上仅出现 个等位变异 为 b p 则该位点的等位变异数据记录为 示例 样品在某个位点上有 个等位变异 分别为 b p b p 则该位点的等位变异数据记录为 数据比对 将送检样品每个位点的等位变异数据逐一比对 按照位点相同 差异 数据缺失 无法判定等情形 记 录每个位点的结果 结果统计 统计比对结果为位点差异的情况 计算差异位点数 结果判定 判定规则 当品种间差异位点数 判定为 不同 当品种间差异位点数 判定为 疑同 当品种间差异位点 数 但存在位点数据缺失或无法判定情形时 不做判定 结果表述 送检样品与对照样品 或数据库中品种 采用检测平 台 检测位点数为 差异位点数为 判定为 当存在位点数据缺失或无 法判定情形时 应表述具体情况 示例 送检样品A与对照样品B采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测平台 检测位点数为 差异位点数为 判定为 疑同 示例 送检样品A与对照样品B采用荧光毛细管电泳检测平台 检测位点数为 差异位点数为 送检样品在 S S R 位点数据缺失 NY T 附 录 A 规范性 主要仪器设备及试剂 A 主要仪器设备 A P C R扩增仪 A 高压电泳仪 最高电压不低于 V 具有恒电压 恒电流和恒功率功能 A 垂直电泳槽及配套的制胶附件 A 离心机 A 水平摇床 A 胶片观察灯 A 电子天平 感量为 g和 g A 微量移液器 规格分别为 L L L L L 连续可调 A 磁力搅拌器 A 核酸浓度测定仪或超微量紫外分光光度计 A 微波炉 A 高压灭菌锅 A 酸度计 A 水浴锅 A 低温冰箱 A 制冰机 A 凝胶成像系统或紫外透射仪 A D N A分析仪 基于毛细管电泳 有片段分析功能和数据分析软件 最低区分力 b p A 其他相关仪器和设备 A 主要试剂 除非另有说明 在分析中均使用分析纯试剂 A 十六烷基三甲基溴化铵 C T A B C H C H N B r C A S号 A 三氯甲烷 C H C l C A S号 A 异戊醇 C H O C A S号 A 异丙醇 C H C H O H C A S号 A 乙二胺四乙酸二钠 E D T A N a C H N N a O C A S号 A 三羟甲基氨基甲烷 T r i s C H N O C A S号 A 浓盐酸 H C l C A S号 A 氢氧化钠 N a O H C A S号 A P C R缓冲液 含M g m m o l L A 种脱氧核糖核苷酸 d A T P d T T P d G T P d C T P A 氯化钠 N a C l C A S号 A TaqD N A聚合酶 Taq酶 C A S号 NY T A D N A M a r k e r D N A片段分布范围在 b p b p A 甲酰胺 C H N O C A S号 A 溴酚蓝 C H B r O S C A S号 A 二甲苯青 C H N N a O S C A S号 A 甲叉双丙烯酰胺 H C C H C O N H C H C A S号 A 丙烯酰胺 C H N O C A S号 A 硼酸 H B O C A S号 A 尿素 C H N O C A S号 A 亲和硅烷 A 剥离硅烷 A 无水乙醇 C H O C A S号 A 四甲基乙二胺 T E M E D C H N C A S号 A 过硫酸铵 A P S N H S O C A S号 A 冰醋酸 C H C O O H C A S号 A 硝酸银 A g N O C A S号 A 甲醛 H C H O C A S号 A D N A分析仪用丙烯酰胺胶液 A D N A分析仪用分子量内标 A D N A分析仪用电泳缓冲液 A D N A分析仪用光谱校准基质 NY T 附 录 B 规范性 溶液配制 试剂配制用水需符合G B T 的要求 B DNA提取溶液的配制 B mol LEDTA溶液 称取 g N a E D T A H O 溶于 m L水中 充分搅拌溶解 加N a O H调p H至 加水定 容至 m L 高压灭菌 m i n B mol LHCl溶液 量取 m L浓盐酸 质量分数为 加水定容至 m L B mol LNaOH溶液 称取 g N a O H 溶于 m L水中 充分搅拌溶解 加水定容至 m L B mol LTris HCl溶液 称取 g T r i s碱 溶于 m L水中 充分搅拌溶解 加H C l调p H至 加水定容至 m L 高压灭菌 m i n B CTAB提取液 称取 g C T A B g N a C l置于 m L烧杯中 量取 m L m o l L T r i s H C l溶液和 m L m o l L E D T A溶液倒入烧杯中 加 m L水 充分搅拌溶解 加水定容至 m L 高压灭菌 m i n B TE缓冲液 量取 m L m o l L T r i s H C l溶液和 m L m o l L E D T A溶液 加水定容至 m L 高压 灭菌 m i n 保存 B PCR扩增试剂的配制 B dNTP溶液 分别配制d A T P d T T P d C T P d G T P终浓度为 m m o l L的储存液 各取 L混合 加 L T E缓冲液定容 配制成每种脱氧核糖核苷酸终浓度为 m m o l L的工作液 高压灭菌 m i n 保存 B SSR引物溶液 开盖前瞬时离心 s 按照说明书加T E缓冲液分别配制正向引物和反向引物终浓度为 m o l L 的储存液 取 L储存液 加 L T E缓冲液配制成终浓度 m o l L的工作液 B 变性PAGE试剂的配制 B 质量分数为 的丙烯酰胺溶液 称取 g丙烯酰胺和 g甲叉双丙烯酰胺 溶于 m L水中 充分搅拌溶解 加水定容至 m L 置于棕色瓶中 储存 B 质量分数为 的变性PAGE胶溶液 称取 g尿素置于 m L烧杯中 加入 m L T B E缓冲液和 m L质量分数为 的丙烯酰胺溶液 定容至 m L NY T B 亲和硅烷缓冲液 分别量取 m L无水乙醇和 L冰醋酸 加水定容至 m L B 亲和硅烷工作液 分别量取 m L亲和硅烷缓冲液和 L亲和硅烷原液 混匀 B 剥离硅烷工作液 分别量取 m L二甲基二氯硅烷和 m L三氯甲烷 混匀 B 质量分数为 的APS溶液 称取 g A P S 溶于 m L水中 混匀 于 保存 不超过 d B TBE缓冲液 称取T r i s g 硼酸 g 溶于 m L水中 加入 m L E D T A溶液 m o l L p H 定 容至 m L B TBE缓冲液 量取 m L T B E缓冲液 加水定容至 m L 混匀 B 加样缓冲液 分别称取 g溴酚蓝和 g二甲苯青 加入 m L去离子甲酰胺和 m L E D T A溶液 m o l L p H 搅拌溶解 B 银染溶液的配制 B 固定液 量取 m L冰醋酸 加水定容至 m L B 染色液 称取 g硝酸银 加水定容至 m L B 显影液 称取 g氢氧化钠 溶于 m L水中 用前加 m L甲醛 NY T 附 录 C 规范性 引物名单及序列 引物名单及序列见表C 表C 引物名单及序列 引物编号引物名称染色体上游引物序列 下游引物序列 P S S R C A C C C C C A C A C T T T T A T T T T C G T A A G G T A C C C C A A T A G A A A C G T T T T A A A P S O L S S R T C G T G G G A A T T T G T T A A C C C T C T T C A T C G T C C T C C T C C T G P S S R G C A A T T T C A G T T C T T C A A A G G C A A G C C T C C A G A A A T A C C A T T G T T C C A T G P S O L S S R C G C C T A T C G A T A C C A C C A C T A T T G A T C C G T T T G G T T C T G C P S O L S S R T T C T T C C C T T C C A T C A G T T C T T T T G C T G C T A T A C T G C T G A C A P S O L S S R A G G G C A A C A A A T C C C T C T T T G G A G A C G A G G C T G C T T A C A C P S S R A A A C T T A G G C A C C T T C T C C A A A T T G T G G T T T G A T A T T G T T G T T G T T G G C A P S O L S S R G C A C T A A G T G T T T A T T A A G C T C A T G C A T A C A T A T C A C T T T C C T C A T A C T T T G P S O L S S R A C A T G A G C C C A A T G A A C C T C A A C C A T T C C G C A C G T A C A T A P S S R T T G A T A A C A C A T G T C A C A T G A T T G G C T T G A T G A T G T A C T T G T G A T T G C G A P S O L S S R T G T G A A T A C A A T T T G C A C C C G G G T T A C T A A T G C A C A A G C G A P S O L S S R T G T G T T G C G T C A T T A C C A C T A A A C C C C A A C C A C C A A T A C T T T C C P S S R A A T T T C C C C A A T C A A A T A A T C T T C A A T T T G G C A G C T T A C G A C T G G A T A A T C T A A P S O L S S R G T T A G T G G C T T A C G T A T C G T A A T C G G T T A C A A C T T A C A A G A G C T G C A G P S O L S S R G C T A A C T T G A A A T A T T G C G T G T G A T G C G G T G G A A T A A G T G G T A G A G C P S S R T T T C G C C A A C T C T A T G A G C T A A A T C T T C T C A C T C A T T T T G T T A G T G A C A A P S O L S S R G A G C G A G C A G A A A G G T G A A T G A G C C T G A A A A C A T A G A A G T P S O L S S R G T T C C C G C T T G A G A A A C A A C C C A A T G C T G G G A C A G A A G A T P S O L S S R G A G T A T G G C A T C A T C A T A G C A C C C G A T T A A T T T T A T A A C C A A A T T G P S S R T G A A A A T A T C T T T A A A G T T C G T G T G C A C C T G C C C C A G G T G A T T C A P S S R A A A G A G A C T T A C T T G G A A A C A G C A G T G G A A T T G A A G A C A A G T T T T A G C C C P S O L S S R G A G G A C G A C A A C A A C A A C G A G A C A T G C C A C T T A G A T C C A C A A P S O L S S R G G T C T T T A A C A A G T T G T T G T A T G C T C A A G C A A A T T G C A A G G T T G G P S O L S S R A C T G C A T T T C A G G T A C A T A C T C T C A T A A A C T C G T A G A C C A T A C C C T C NY T 附 录 D 资料性 引物相关信息 引物相关信息见表D 表D 引物相关信息 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 b p主要等位变异 b p参照品种 P S S R T A M R A 飞天 寿研黄樱 苏粉 号 浙杂 P S O L S S R F A M 金陵佳玉 苏粉 号 P S S R F A M 飞天 寿研黄樱 P S O L S S R H E X 寿研橙樱 冠群五号 P S O L S S R T A M R A 浙杂 飞天 金陵佳玉 P S O L S S R R O X 皖红 杭杂 飞天 寿研黄樱 P S S R F A M 陆兴 乾德番砧 苏粉 号 乾德番砧 P S O L S S R H E X 寿研黄樱 寿研橙樱 安第斯 乾德粉如意 小汤姆 浙杂 P S O L S S R F A M 冠群五号 寿研橙樱 金陵佳玉 爱吉佳丽 P S S R R O X 寿研黄樱 浙杂 P S O L S S R T A M R A 小汤姆 寿研黄樱 乾德M 苏粉 号 宁番 号 金星 浙杂 寿研 号 NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 b p主要等位变异 b p参照品种 P S O L S S R F A M 寿研 冠群五号 乾德红如意 金粉 P T 寿研黄樱 P S S R F A M 皖红 寿研黄樱 苏粉 号 寿研 号 P S O L S S R F A M 冠群五号 寿研橙樱 中樱 号 P S O L S S R T A M R A 爱吉茱丽 寿研矮生红樱 金陵佳玉 寿研 P S S R H E X 宝禄 寿研黄樱 寿研 号 京鲁 号 金陵佳玉 飞天 P S O L S S R T A M R A 乾德番砧 宝禄 中樱 号 乾德红如意 P S O L S S R F A M 金粉 寿研矮生红樱 金陵佳玉 苏粉 号 P S O L S S R T A M R A 浙杂 寿研 号 乾德番砧 绽红 P S S R H E X 宝禄 中樱 号 P S S R H E X 中樱 号 宝禄 P S O L S S R H E X 乾德番砧 寿研 号 冠群五号 P S O L S S R R O X 中樱 号 天正红珠 乾德M P S O L S S R T A M R A 京鲁 号 宝禄 注 附录D中采用的荧光标记仅为示例 采用其他荧光标记类型时 需要用参照品种校正数据 注 附录D中未包括的等位变异 应按本文件方法 确定其大小和相应参照品种 注 附录D中所列参照品种仅为示例 与参照品种具有相同等位变异的其他品种也可用作该等位变异的参照品种 NY T 附 录 E 资料性 参照品种相关信息 参照品种相关信息见表E 表E 参照品种相关信息 编号品种名称品种来源保藏编号编号品种名称品种来源保藏编号 浙杂 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 金星 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 飞天 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N P T 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 苏粉 号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 陆兴 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 金陵佳玉 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 爱吉佳丽 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 皖红 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 安第斯 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 中樱 号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 金粉 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 寿研矮生红樱 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 绽红 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 小汤姆 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 天正红珠 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 寿研黄樱 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 京鲁 号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 寿研橙樱 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 爱吉茱丽 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 冠群五号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 宁番 号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 宝禄 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 乾德粉如意 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 乾德番砧 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 乾德红如意 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 寿研 号 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 乾德M 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 寿研 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N 杭杂 农业农村部植物 新品种保藏中心X I N