NY_T 4494-2025 莴苣品种鉴定SSR分子标记法.pdf

2025 01 09 发布 2025 05 01 实施 莴苣品种鉴定 SSR分子标记法 05 中华人民共和国农业行业标准 备案号 XXXX XXXX 65 020 01 CCS B 4494 2025 Identification of lettuce Lactuca sativa L varieties SSR marker method 中华人民共和国农业农村部 发布 NY T 目 次 前言 范围 规范性引用文件 术语和定义 缩略语 原理 主要仪器设备及试剂 溶液配制 引物相关信息 参照品种 操作程序 结果统计 结果判定 附录A 规范性 主要仪器设备及试剂 附录B 规范性 溶液配制 附录C 规范性 引物名单及序列 附录D 资料性 引物相关信息 附录E 资料性 参照品种相关信息 NY T 前 言 本文件按照GB T 标准化工作导则 第 部分 标准化文件的结构和起草规则 的规定起 草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由农业农村部种业管理司提出 本文件由全国植物新品种测试标准化技术委员会 SAC TC 归口 本文件起草单位 农业农村部科技发展中心 华南农业大学 上海市农业科学院 北京市农林科学院 本文件主要起草人 邓超 凌晨 徐振江 赵洪 李波 颜军 庞雪兵 王晨宇 马莹雪 张靖立 冯艳芳 唐 浩 陈红 张秀杰 NY T 莴苣品种鉴定 SSR分子标记法 范围 本文件规定了利用简单重复序列 SSR 标记进行莴苣 LactucasativaL 品种鉴定的操作程序 结 果统计与结果判定 本文件适用于莴苣品种SSR指纹数据采集 数据库构建和品种鉴定 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 其中 注日期的引用文件 仅该日期对应的版本适用于本文件 不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文 件 GB T 农作物种子检验规程 扦样 GB T 分析实验室用水规格和试验方法 NY T 植物品种鉴定 DNA分子标记法 总则 术语和定义 NY T 规定的术语和定义适用于本文件 缩略语 下列缩略语适用于本文件 APS 过硫酸铵 ammoniumpersulphate bp 碱基对 basepair CTAB 十六烷基三甲基溴化铵 cetyltrimethylammoniumbromide DNA 脱氧核糖核酸 deoxyribonucleicacid dNTPs 脱氧核糖核苷三磷酸 deoxy ribonucleosidetriphosphate EDTA 乙二胺四乙酸 ethylenediaminetetraaceticacid PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 polyacrylamidegelelectrophoresis PCR 聚合酶链式反应 polymerasechainreaction SSR 简单重复序列 simplesequencerepeat Taq酶 耐热DNA聚合酶 Taq DNApolymerase Tris 三羟甲基氨基甲烷 Tris hydroxymethyl methylaminomethaneTHAM TE 三羟甲基氨基甲烷乙二胺四乙酸 Tris EDTA TBE 三羟甲基氨基甲烷硼酸盐乙二胺四乙酸 Tris borate EDTA TEMED 四甲基乙二胺 N N N N tetramethylethylenediamine 原理 不同莴苣品种基因组中SSR的重复次数存在差异 这种差异可通过PCR扩增及电泳方法进行检测 进而区分不同的莴苣品种 主要仪器设备及试剂 主要仪器设备及试剂见附录A NY T 溶液配制 溶液配制方法见附录B 引物相关信息 引物名单及序列见附录C 引物相关信息见附录D 参照品种 参照品种相关信息见附录E 操作程序 样品准备 送检样品可为种子 幼苗 叶片等组织或器官 样品需扦样时 应符合GB T 的要求 每份样 品取不少于 个个体的叶片或其他等效物 混合分析 必要时进行个体检测 DNA提取 取幼苗或叶片 mg mg 置于 mL离心管 加液氮充分研磨 每管加入 L经 预 热的CTAB提取液 充分混合 水浴 min min 其间多次轻缓颠倒混匀 每管加入与CTAB 提取液等体积的三氯甲烷和异戊醇混合液 轻缓混匀后静置 min 在 r min离心 min 吸取 上清液转移至新的离心管中 加入等体积预冷的异丙醇 轻轻颠倒混匀 放置 min r min离心 min 弃上清液 用体积分数为 的乙醇溶液洗涤 遍 晾干 加入 L双蒸 水或TE缓冲液充分溶解 检测DNA浓度后 备用 注 以上为推荐的DNA提取方法 DNA质量能够满足PCR扩增要求的其他DNA提取方法均适用 DNA溶液的紫 外吸光度OD 与OD 的比值宜介于 注 三氯甲烷和异戊醇混合液中三氯甲烷与异戊醇的体积比为 PCR扩增 反应体系 PCR扩增反应体系的总体积和各组分的终浓度参照表 配制 可以依据试验条件调整 表 中的缓 冲液若含有氯化镁 MgCl 不再加MgCl 溶液 加等体积双蒸水替代 利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE 检测时选择普通引物 利用荧光毛细管电泳检测时选择荧光标记引物 荧光标记位于上游引物 端 推荐的荧光标记见附录D 表 PCR扩增反应体系 反应组分原浓度终浓度推荐加样体积 L 缓冲液 含MgCl dNTPs mmol L mmol L Taq酶 U L U L 上游引物 mol L mmol L 下游引物 mol L mmol L DNA ng L ng L 双蒸水 总体积 反应程序 推荐反应程序为 预变性 min 变性 s 退火 s 延伸 min 共 个循环 NY T 延伸 min 产物 保存 反应程序中各反应参数可根据PCR扩增仪型号 酶 引物等不同而做 适当的调整 PCR产物检测 变性PAGE 制胶 用洗涤剂将玻璃板清洗干净 再用双蒸水 无水乙醇分别擦洗 遍 玻璃板干燥后 将 mL亲和 硅烷工作液均匀涂在长玻璃板上 将 mL剥离硅烷工作液均匀涂在带凹槽的短玻璃板上 操作过程 中防止 块玻璃板互相污染 玻璃板彻底干燥后 将 mm厚的塑料隔条整齐放在长玻璃板两侧 盖上 凹槽短玻璃板 用夹子固定 用水平仪检查玻璃胶室是否水平 配制 PAGE胶 取 mL质量分数 为 的PAGE胶溶液 加入 mL蒸馏水 L四甲基乙二胺 TEMED 和 L质量分数为 的 过硫酸铵 APS 迅速混匀 将胶灌入玻璃胶室 灌胶过程中防止出现气泡 待胶室灌满后 在凹槽处将 mm厚鲨鱼齿梳子平齐端向里轻轻插入胶液约 mm 室温聚合 h以上 胶聚合后 清理胶板表面 溢出的胶液 轻轻拔出梳子 用水清洗干净备用 注 为保证检测结果的准确性 建议玻璃板的规格为 cm cm 变性 在 LPCR产物中加入 L 加样缓冲液 混匀 在PCR仪上运行 变性 min 取出立即 置于冰上 冷却 min以上备用 电泳 将胶板安装于电泳槽上 在电泳正极槽 下槽 加入 mL的 TBE缓冲液 负极槽 上槽 加入 mL经的 TBE缓冲液 使其超过凝胶顶部约 cm W恒功率预电泳 min min 用移液 器吹吸加样槽 清除气泡和杂质 将样品梳 鲨鱼齿朝下 插入凝胶 mm mm 每一个加样孔点入 L L样品 除送检样品外 还应同时加入参照品种扩增产物 W恒功率电泳 电泳时间参考二 甲苯青指示带移动的位置和扩增产物预期片段大小范围 见附录D 加以确定 二甲苯青指示带在 PAGE胶电泳的移动位置与 bp扩增产物泳动的位置大致相当 扩增产物片段大小在 bp bp bp bp范围的 电泳参考时间分别为 h h h h 电泳结束后关闭电源 取下玻璃板并轻轻撬开 通常凝胶附着在长玻璃板上 染色 将附着凝胶的长玻璃板胶面向上浸入固定液中 轻轻晃动 min后取出 在双蒸水中快速漂洗 时间 不超过 s 将胶板放入染色液中 轻轻晃动 min后取出 在双蒸水中快速漂洗 时间不超过 s 将胶板 放入显影液中 轻摇晃动待条带清晰后取出 再迅速放入固定液中定影 min取出 在双蒸水中漂洗 min 取出胶板 晾干 放在胶片观察灯上观察 记录结果 拍照保存 注 固定液 染色液 双蒸水和显影液的用量 可依据胶板数量和大小调整 以淹没胶面为准 荧光毛细管电泳 PCR产物样品准备 按照预先确定的引物分组 分别取等体积的同一组中不同荧光引物的扩增产物 混匀稀释 从混合液 中吸取 L 加入DNA分析仪专用 孔板中 板中各孔分别加入 L分子量内标和 L去离子 甲酰胺 在PCR仪上 变性 min 取出后立即置于冰上 冷却 min以上 瞬时离心 s后备用 注 引物分组和稀释倍数通过荧光毛细管电泳预实验确定 等位变异检测 打开DNA分析仪 检查仪器工作状态和试剂状态 将装有样品的 孔上样板放置于样品架基座 上 打开数据收集软件 按照仪器使用手册 编辑样品表 执行运行程序 DNA分析仪将自动运行 并保存 电泳原始数据 NY T 数据分析 数据读取 每个SSR位点的等位变异参照扩增片段大小命名 见附录D 对于变性PAGE 将送检样品在某一 位点扩增片段的迁移位置与对应的参照品种进行比较 确定送检样品在该位点的等位变异 对于荧光毛 细管电泳 通过参照品种消除不同批次间或者不同型号DNA分析仪间可能存在的系统误差 使用片段分 析软件读取送检样品在该位点的等位变异 纯合位点的等位变异数据记为X X 杂合位点的等位变异数据记录为X Y 其中X Y分别为该位点 上的 个等位变异 小片段数据在前 大片段数据在后 缺失位点的等位变异数据记录为 示例 样品在某个位点上仅出现 个等位变异 为 bp 则该位点的等位变异数据记录为 示例 样品在某个位点上有 个等位变异 分别为 bp bp 则该位点的等位变异数据记录为 数据比对 将送检样品每个位点的等位变异数据逐一比对 按照位点相同 差异 数据缺失 无法判定等情形 记 录每个位点的结果 结果统计 统计比对结果为位点差异的情况 计算差异位点数 结果判定 判定规则 当品种间差异位点数 判定为 不同 当品种间差异位点数 判定为 疑同 当品种间差异位 点数 但存在位点数据缺失或无法判定情形时 不做判定 结果表述 送检样品与对照样品 或数据库中品种 采用检测平 台 检测位点数为 差异位点数为 判定为 当存在位点数据缺失或无 法判定情形时 应表述具体情况 示例 送检样品A与对照样品B采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测平台 检测位点数为 差异位点数为 判定为 疑同 示例 送检样品A与对照样品B采用荧光毛细管电泳检测平台 检测位点数为 差异位点数为 送检样品在 WSULs 位点数据缺失 NY T 附 录 A 规范性 主要仪器设备及试剂 A 主要仪器设备 A PCR扩增仪 A 高压电泳仪 最高电压不低于 V 具有恒电压 恒电流和恒功率功能 A 垂直电泳槽及配套的制胶附件 A 离心机 A 水平摇床 A 胶片观察灯 A 电子天平 感量为 g和 g A 微量移液器 规格分别为 L L L L L 连续可调 A 磁力搅拌器 A 核酸浓度测定仪或超微量紫外分光光度计 A 微波炉 A 高压灭菌锅 A 酸度计 A 水浴锅 A 低温冰箱 A 制冰机 A 凝胶成像系统或紫外透射仪 A DNA分析仪 基于毛细管电泳 有片段分析功能和数据分析软件 最低区分力 bp A 其他相关仪器和设备 A 主要试剂 除非另有说明 在分析中均使用分析纯试剂 A 十六烷基三甲基溴化铵 CTAB C H CH NBr CAS号 A 三氯甲烷 CHCl CAS号 A 异戊醇 C H O CAS号 A 异丙醇 CH CHOH CAS号 A 乙二胺四乙酸二钠 EDTA Na C H N Na O CAS号 A 三羟甲基氨基甲烷 Tris C H NO CAS号 A 浓盐酸 HCl CAS号 A 氢氧化钠 NaOH CAS号 A PCR缓冲液 含Mg mmol L A 种脱氧核糖核苷酸 dATP dTTP dGTP dCTP A 氯化钠 NaCl CAS号 NY T A TaqDNA聚合酶 Taq酶 CAS号 A DNAMarker DNA片段分布范围在 bp bp A 甲酰胺 CH NO CAS号 A 溴酚蓝 C H Br O S CAS号 A 二甲苯青 C H N NaO S CAS号 A 甲叉双丙烯酰胺 H C CHCONH CH CAS号 A 丙烯酰胺 C H NO CAS号 A 硼酸 H BO CAS号 A 尿素 CH N O CAS号 A 亲和硅烷 A 剥离硅烷 A 无水乙醇 C H O CAS号 A 四甲基乙二胺 TEMED C H N CAS号 A 过硫酸铵 APS NH S O CAS号 A 冰醋酸 CH COOH CAS号 A 硝酸银 AgNO CAS号 A 甲醛 HCHO CAS号 A DNA分析仪用丙烯酰胺胶液 A DNA分析仪用分子量内标 A DNA分析仪用电泳缓冲液 A DNA分析仪用光谱校准基质 NY T 附 录 B 规范性 溶液配制 试剂配制用水需符合GB T 的要求 B DNA提取溶液的配制 B mol LEDTA溶液 称取 gNa EDTA H O 溶于 mL水中 充分搅拌溶解 加NaOH调pH至 加水定 容至 mL 高压灭菌 min B mol LHCl溶液 量取 mL浓盐酸 质量分数为 加水定容至 mL B mol LNaOH溶液 称取 gNaOH 溶于 mL水中 充分搅拌溶解 加水定容至 mL B mol LTris HCl溶液 称取 gTris碱 溶于 mL水中 充分搅拌溶解 加HCl调pH至 加水定容至 mL 高压灭菌 min B CTAB提取液 称取 gCTAB gNaCl置于 mL烧杯中 量取 mL mol LTris HCl溶液和 mL mol LEDTA溶液倒入烧杯中 加 mL水 充分搅拌溶解 加水定容至 mL 高压灭菌 min B TE缓冲液 量取 mL mol LTris HCl溶液和 mL mol LEDTA溶液 加水定容至 mL 高压 灭菌 min 保存 B PCR扩增试剂的配制 B dNTP溶液 分别配制dATP dTTP dCTP dGTP终浓度为 mmol L的储存液 各取 L混合 加 L TE缓冲液定容 配制成每种脱氧核糖核苷酸终浓度为 mmol L的工作液 高压灭菌 min 保存 B SSR引物溶液 开盖前瞬时离心 s 按照说明书加TE缓冲液分别配制正向引物和反向引物终浓度为 mol L 的储存液 取 L储存液 加 LTE缓冲液配制成终浓度 mol L的工作液 B 变性PAGE试剂的配制 B 质量分数为 PAGE胶溶液 称取 g丙烯酰胺和 g甲叉双丙烯酰胺 溶于 mL水中 充分搅拌溶解 加水定容至 mL 置于棕色瓶中 储存 B 亲和硅烷缓冲液 分别量取 mL无水乙醇和 L冰醋酸 混匀 NY T B 亲和硅烷工作液 分别量取 mL亲和硅烷缓冲液和 L亲和硅烷原液 混匀 B 剥离硅烷工作液 分别量取 mL氯仿溶液和 mL二甲基二氯硅烷溶液 混匀 B 质量分数为 的APS溶液 称取 g过硫酸铵 溶于 mL去离子水中 混匀 于 保存 不超过 d B TBE缓冲液 称取Tris g 硼酸 g 溶于 mL水中 加入 mLEDTA溶液 mol L pH 定 容至 mL B TBE缓冲液 量取 mL TBE缓冲液 加水定容至 mL 混匀 B 加样缓冲液 分别称取 g溴酚蓝和 g二甲苯青 加入 mL去离子甲酰胺和 mLEDTA溶液 mol L pH 搅拌溶解 B 银染溶液的配制 B 固定液 量取 mL冰醋酸 加水定容至 mL B 染色液 称取 g硝酸银 加水定容至 mL B 显影液 称取 g氢氧化钠 溶于 mL水中 用前加 mL甲醛 NY T 附 录 C 规范性 引物名单及序列 引物名单及序列见表C 表C 引物名单及序列 引物 编号引物名称 参考 文献 所在 染色体上游引物序列 下游引物序列 WJ WSULs Chr GGACTTCACTAGTCGACGACATCGCTTGTCTTTCCAACCCAAAAG WJ WSULs Chr ACCGCTCTCACTCTGAGCACACCAGTTTGTGCTAGCGTTTCACCA WJ LSE Chr CTAGTTCTTCTGCTGCTAGGGATAGGATCGGATCGGATTG WJ KSL Chr GGTCTCTTTCCTCTGCCCTGTCGCGTTCTGAAGTAGCCAT WJ LSE Chr CCTCCATAACCAAAACCTCAACTTCTTTCGACATGCTTCT WJ SSR Chr GTTGTCTCGTCTCGACCAAAGCGTTCTGAAGTAGCCATGG WJ WSULs Chr TTTCTCGCTTTCTCTCCTTTCCCAAATCTCCACCCCCAAATAGG WJ KSL Chr CGGGGAGCATTTAGTGTGTGAATTTGGGGTCCGATTTGAG WJ LSE Chr CCGAAAACAGCCTTGCATCTGTATTGTAGCTGACGGTGGC WJ LSSA Chr TTCATCTCTCTCCTCCTTCAGCATCCCCATTGTCCTCCC WJ Li Chr TTTACCTCCCACCACACACACCGGCGATTCCATTATTGAT WJ LSE Chr TTGATACCTCCGCCATCCTCAGCACAGAAAACACACACACA WJ KSL Chr CTTCACCTCCGGAATCCTGTGAGGCACGACTGCCATTTAG WJ KSL Chr CGCAGAAAAGGGATCAGACATCAGAGACACTGCAAAAGGGA WJ SH Chr GCAAGCTAAAGGGCTTTTTGTCAGCCTGGGAATATTTACTCTGA WJ WSULs Chr GAAGGTGGTGGGTTGCTGTCTGGGCAATTGCAGATTGAGA WJ SSR Chr CAGATCAAGCGGGTAACTAATATCAAGACCCTAAGCGAAC WJ LSSA Chr AGAACAACGGTAGCTTGTTAAATTGATCGTCGGTTAATCTTCGTCG WJ LSSA Chr TTGTACCCAGTTGTCCAAACAGCAGATTGTTGCAGATTTCTTCG WJ SML Chr GTGATTGCATGCCAAATGAATTAGTAGCCCGCATGCTTTT WJ SML Chr TTGAGGAGGGCATTTACGTCGAGGCGTATCTCCAAGGTGT WJ LSE Chr TGTCCACAGATCAGCGATGACTGGACAGTCGGGATCAGAA 注 表中 对引物主要参考文献 HongJH OliyaBK PatellaA RiarDS SimkoI WangS ZhangGW ZhouH NY T 附 录 D 资料性 引物相关信息 引物相关信息见表D 表D 引物相关信息 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ WSULs TAMRA 火棍笋 R 香优九号 N 红莴笋 S 红莴笋 KNV 耐寒二白皮 尖叶莴笋 青皮臭 L KAY WJ WSULs HEX KNV N 红福 火棍笋 红莴笋 耐寒二白皮 青皮臭 香优九号 N 紫叶莴笋 L 白皮笋 S KAY KNV WJ LSE TAMRA 耐寒二白皮 WJ LSE TAMRA 红莴笋 火棍笋 青皮臭 红福 紫叶莴笋 KAY KNV N KNV KNV NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ KSL FAM N N 红福 红莴笋 光叶莴苣 青皮臭 火棍笋 沪优仕 尖叶莴笋 L 酱笋 WJ LSE FAM N 白皮笋 L N 沪优仕 B 火棍笋 青皮臭 红莴笋 L R WJ SSR TAMRA N 红福 红莴笋 光叶莴苣 青皮臭 火棍笋 WJ SSR TAMRA N KAY L KNV WJ WSULs ROX KNV L 紫叶莴笋 R L 青皮臭 火棍笋 耐寒二白皮 香优九号 红福 N KNV NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ KSL ROX 火棍笋 L B 青皮臭 KNV 红福 R SY WJ LSE TAMRA KNV S KAY R L B 灰叶莴苣 青皮臭 火棍笋 WJ LSE TAMRA 红莴笋 KNV 红莴笋 沪优仕 KNV 红福 紫叶莴笋 KNV KNV 香优九号 香优九号 白皮香莴笋 白皮香莴笋 WJ LSSA FAM KNV KNV 圆叶白皮笋 布莱克柔丝 KNV N 四季白尖叶 N KNV KNV KNV KAY 尖叶莴笋 红莴笋 紫叶笋 L 青皮臭 香优九号 火棍笋 白皮笋 WJ LSSA FAM 耐寒二白皮 S NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ Li FAM N 青皮臭 N B WJ LSE ROX 红莴笋 碧霄 R 沪优仕 紫叶莴笋 青皮臭 火棍笋 KNV 光叶莴苣 香优九号 SY KNV KAY B R LS KNV KNV 沪优仕 N N N WJ KSL FAM B N N 红福 沪优仕 S 青皮臭 火棍笋 WJ KSL HEX S 紫叶莴笋 WJ KSL HEX 青皮臭 KNV N WJ SH TAMRA 沪优仕 KNV 尖叶莴笋 L 沪优仕 火棍笋 N L KAY N 红莴笋 紫叶莴笋 青皮臭 NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ WSULs ROX 沪优仕 KAY KNV M 紫叶笋 沪优仕 火棍笋 白皮笋 尖叶莴笋 WJ SSR FAM N 尖叶莴笋 紫叶笋 S 红莴笋 N N 碧霄 WJ LSSA ROX KAY N N KAY 沪优仕 WJ LSSA ROX KNV 红福 青皮臭 沪优仕 KNV 紫叶莴笋 M N L S WJ LSSA HEX N KNV R S 青皮臭 N 尖叶莴笋 S 火棍笋 酱笋 白皮香莴笋 沪优仕 KNV 光叶莴苣 紫叶笋 KNV L L NY T 表D 续 引物编号引物名称荧光标记等位变异范围 bp主要等位变异 bp参照品种 WJ SML FAM KNV 青皮臭 N 灰叶莴苣 M 碧霄 沪优仕 红莴笋 N 火棍笋 WJ SML FAM 耐寒二白皮 红福 WJ SML FAM 沪优仕 红福 KNV 沪优仕 S 尖叶莴笋 R WJ LSE TAMRA 绿叶鲫瓜笋 KNV KNV 绿叶鲫瓜笋 紫叶莴笋 N N R S SY KNV KNV 注 附录D中采用的荧光标记仅为示例 采用其他荧光标记类型时 需要用参照品种校正数据 注 对于附录D中未包括的等位变异 应按本文件方法 确定其大小和相应参照品种 注 附录D中所列参照品种仅为示例 与参照品种具有相同等位变异的其他品种也可用作该等位变异的参照品种 注 品种右上角的编号 保藏编号为V F 保藏编号为V F NY T 附 录 E 资料性 参照品种相关信息 参照品种相关信息见表E 表E 参照品种相关信息 编号品种名称 代号品种来源保藏编号编号品种名称 代号品种来源保藏编号 LS NCGBXIN SY BAAFS KAY NCGBXIN SY BAAFS 耐寒二白皮NCGBXIN L BAAFS 碧霄NCGBXIN S BAAFS 布莱克柔丝NCGBXIN L BAAFS 四季白尖叶NCGBXIN L BAAFS 火棍笋IVFCAASV F N BAAFS 红莴笋IVFCAASV F M BAAFS 红莴笋IVFCAASV F N BAAFS 尖叶莴笋IVFCAASV F N BAAFS 青皮臭IVFCAASV F N BAAFS 绿叶鲫瓜笋IVFCAASV F L BAAFS 紫叶莴笋IVFCAASV F N BAAFS 紫叶笋IVFCAASV F M BAAFS 酱笋IVFCAASV F N BAAFS 白皮笋IVFCAASV F KNV SAGC 白皮香莴笋IVFCAASV F KNV SAGC 光叶莴苣IVFCAASV F KNV SAGC 灰叶莴苣IVFCAASV F KNV SAGC 圆叶白皮笋IVFCAASV F KNV SAGC 香优九号SSCNPVTMARA KNV SAGC 红福SSCNPVTMARA KNV SAGC 沪优仕SSCNPVTMARA KNV SAGC B BAAFS KNV SAGC R BAAFS KNV SAGC L BAAFS KNV SAGC R BAAFS KNV SAGC S BAAFS 注 NCGB为国家作物种质库 IVFCAAS为中国农业科学院蔬菜花卉研究所 SSCNPVTMARA为农业农村部植物新品种测 试 上海 分中心 BAAFS为北京市农林科学院 SAGC为上海市农业生物基因中心