三个野生郁金香的繁殖方法

北方园艺（）： ·园林花卉 ·第一作者简介 ：邢桂梅 （），女 ，博士 ，副研究员 ，研究方向 为 观 赏 植 物 遗 传 育 种 。： 责任作者 ：屈连伟 （），男 ，博士 ，研究员 ，现主要从事观赏园艺植物新品种选育及高效栽培技术示范与推广等工作 。：基金项目 ：辽宁省自然科学基金资助项目 （）；沈阳市产业发展应用基础研究计划资助项目 （）。收稿日期 ：三个野生郁金香的繁殖方法邢 桂 梅 ，刘 振 雷 ，张 艳 秋 ，崔 玥 晗 ，屈 连 伟（辽宁省农业科学院 花卉研究所 ，辽宁 沈阳）摘要 ：以老鸦瓣 、阿尔泰郁金香和准噶尔郁金香的种子 、鳞茎 、叶片及花茎为试材 ，研究我国野生郁金香的繁殖方法 ，以期为我国野生郁金香的利用提供参考依据 。结果表明 ：种子繁殖是我国野生郁金香的主要繁殖方式 ，低温能够促进老鸦瓣 、阿尔泰郁金香和准噶尔郁金香种子的萌发 ，在培养皿试验中 ，萌发率分别达到、和；种郁金香的种子播种在草炭土细沙 （）的基质中萌发率最高 ，分别为、和；老鸦瓣的鳞茎是进行组织培养较为理想的外植体 ，接种在 · · ·培养基上时 ，诱导与分化率最高 ，分别为和；而阿尔泰郁金香和准噶尔郁金香的离体再生均很困难 。关键词 ：老鸦瓣 ；阿尔泰郁金香 ；准噶尔郁金香 ；繁殖方法中图分类号 ： 文献标识码 ： 文章编号 ：（）郁金香 （）为世界范围内最重要的观赏花卉之一 ，原产伊朗 、土耳其和我国新疆等地。我国具有丰富的野生郁金香资源 ，目前报道的有种 ，占世界总资源的以上 。野生郁金香抗逆性强 ，是重要的绿化和育种材料，但由于国内对野生郁金香资源的繁殖特性和繁殖方法研究较少 ，限制了其开发和利用 。球根花卉的繁殖方法主要包括种子繁殖 、分球繁殖和组织培养繁殖等 。该试验利用野生郁金香种子 、鳞茎 、花茎和叶片为试材 ，对郁金香的繁殖特性进行研究 ，旨在探讨我国野生郁金香适宜的繁殖条件和繁殖方法 ，为我国野生郁金香资源的开发和利用提供参考依据 。 材料与方法 试验材料供试老鸦瓣 （ ）、阿尔泰郁金香（ ）和 准 噶 尔 郁 金 香 （）的种子 、鳞茎 、叶片和花茎 ，由辽宁省农业科学院国家郁金香种质资源库提供 。种野生郁金香鳞茎于年月分别采自辽宁的大连 、新疆的乌鲁木齐 、裕民等地 。 试验方法 不同温度种子萌发试验选用种胚发育一致 、饱满的种子 ，播在铺有双层滤纸的培养皿中 ，每皿粒左右 。置于、不同温度条件下 ，浇透水并保持滤纸湿润 ，设次重复 ，后统计种子萌发数 ，计算萌发率 。种子萌 发 率 （）萌 发 种 子 数 播 种 种 子数×。 不同基质种子萌发试验将种郁金香种子播种于盛有种不同基质的筐中 ：园土 、草炭土和草炭土细沙 （）。播种后浇透水 ，置于冷库中储藏 ，第年月移入温室中 。后计算出苗率 ，出苗率 （）出苗数 播种种子数×。 组织培养试验以种野生郁金香的叶片 、花茎和鳞茎为外植体 ，流水冲洗，在超净工作台上用的酒精处理，再用升汞灭菌，无菌水冲洗次 ，最后用滤纸吸干表面水分 。叶片切成×小块 ，花茎切成长小段 ，鳞茎切为×小块 ，接种到含有不同激素的培养基上 。光照强度为 ，光照时间每天，设次重复 。愈伤组织诱导率 （）诱导愈伤组织外植体数 接种外植体数×，愈伤组织分化率 （）分化成苗愈伤组织数 形成愈伤组织数×。 数据分析种子萌发率 、外植体诱导率及分化率数据采用 软件进行统计分析 。 结果与分析 温度对种野生郁金香种子萌发的影响在不同温度条件下种野生郁金香种子萌发情况不同 （表），在低温条件下 ，种野生郁金香种子萌发情况最好 ，其中老鸦瓣的种子萌发率最高 ，达到，阿尔泰郁金香为，准噶尔郁金香的萌发率最低为。在和条件下 ，种野生郁金香的种子萌发率均较低 ，播种后的种子只有零星萌发 ，且表现无规律性 ，萌发率分别为、和，条件下萌发率分别为、和。表 不同温度对 种野生郁金香种子萌发的影响 温度种播种数 萌发数 萌发率 老鸦瓣 ± 阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ±老鸦瓣 ± 阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ±老鸦瓣 ± 阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ± 基质对种野生郁金香种子萌发的影响野生郁金香种子播种在种不同的基质中时 ，其萌发率表现出一定的差异 （表），种郁金香种子在草炭土细沙 （）的萌发效果较好 ，萌发 率 分 别 为 ：老 鸦 瓣、阿 尔 泰 郁 金 香、准噶尔郁金香。草 炭 土 中 播 种后 ，老鸦瓣和阿尔泰郁金香的萌发率显著降低 ，分别为和，准噶尔郁金香萌发率为，与草炭土细沙 （）的萌发效果无显著差异 ；而在园土中 ，准噶尔郁金香的萌发率显著高于老鸦瓣和阿尔泰郁金香的萌发率 ，萌发率分别为、和。 激素对老鸦瓣鳞茎愈伤组织诱导与分化的影响将老鸦瓣鳞茎切块接种于附加不同浓度、及，的种培养基上 ，由表可 知 ，在 ·· ·的培养基上 ，鳞茎愈伤组织诱导与分化情况最好 ，诱导率和分化率分别达到和。随着浓度的不断升高 ，外植体的诱导率与分化率不断降低 ，说明较高浓度的对老鸦瓣鳞茎诱导与分化不利 。在、及，的组合中 ，浓度为·时 ，诱导率和分化率最高为和，随着浓度的升高 ，诱导和 第 期北方园艺表 不同基质对 种野生郁金香种子萌发的影响 基质种播种数 萌发数 萌发率 老鸦瓣 ±园土 阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ±老鸦瓣 ±草炭土阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ±老鸦瓣 ±草炭 细沙 （） （）阿尔泰郁金香 ±准噶尔郁金香 ±表 激素对老鸦瓣鳞茎愈伤组织诱导及分化的影响 培养基号浓度（·） ，接种外植体数 形成愈伤的外植体数 诱导率 分化成苗的外植体数 分化率 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±分化率逐渐降低 。说明较低浓度的对老鸦瓣鳞茎诱导与分化有促进作用 ，而过高浓度的则会抑制鳞茎愈伤组织的诱导与分化 。 野生郁金香不同器官愈伤组织诱导与分化种野生郁金香各器官的再生能力差异较大 ，由表可知 ，老鸦瓣鳞茎的诱导率与分化率最高 ，接种愈伤组织分化出芽点 ，愈伤组织诱导率 为，后 分 化 成 苗 ，分 化 率 为。阿尔泰郁金香的叶片和鳞茎经过一段时间的培养均形成了少量愈伤组织 ，诱导率分别为和，愈伤组织疏松 ，大部分褐化死亡 ，最终只获得株再生苗 。准噶尔郁金香的鳞茎愈伤组 织 诱 导 率 和 分 化 率 最 低 仅 为和。试验中种野生郁金香的花茎经过一段时间的培养全部褐化死亡 ，均未能诱导出愈伤组织和再生苗 （图）。表 种野生郁金香不同器官愈伤组织诱导及分化 种接种外植体接种外植体数 形成愈伤的外植体数 诱导率 分化成苗的外植体数 分化率 叶片 ± ±老鸦瓣花茎 ± ±鳞茎 ± ±叶片 ± ±阿尔泰郁金香花茎 ± ±鳞茎 ± ±叶片 ± ±准噶尔郁金香花茎 ± ±鳞茎 ± ±北方园艺月 （下 ）注 ：老鸦瓣鳞茎外植体 ；老鸦瓣鳞茎愈伤组织诱导 ；老鸦瓣鳞茎愈伤组织分化成苗 ；老鸦瓣再生苗增殖 ；伊犁郁金香鳞片愈伤组织 ；伊犁郁金香鳞片分化成苗 ；伊犁郁金香叶片再生苗 ；天山郁金香鳞片愈伤组织 ；天山郁金香鳞片再生苗 。： ； ； ； ； ； ； ； ； 图 种野生郁金香外植体愈伤组织诱导与分化 讨论低温是野生郁金香种子萌发的首要条件 ，陈芳等研究认为 ，在条件下野生郁金香种子发芽率显著提高 。张爱勤等研究结果表明 ，在下可以解除种子休眠 ，而室温下储藏对打破野生郁金香种子休眠没有作用 。该试验中 ，种野生郁金香在条件下萌发率都较高 ，而和培养则萌发率很低 。国外学者对郁金香离体再生已有一些研究 ，等以郁金香种胚为外植体进行离体再生研究 ，愈伤组织诱导率达到了。等利用郁金香鳞茎为外植体在下培养周 ，成功诱导出不定芽 。等以郁金香幼胚为外植体 ，获得了再生苗 ，并利用再生苗成功诱导出小鳞茎 ，诱导率达以上 。该试验将种野生郁金香的鳞茎 、叶片和花茎接种于不同的培养基上 ，发现以老鸦瓣的鳞茎为外植体较容易获得愈伤组 织 和 再 生 苗 ，在 · · ·的培养基上培养时 ，诱导率和分化率最高 ，分别为和；准噶尔郁金香和伊犁郁金香得到少部 第 期北方园艺分愈伤组织 ，但成苗很困难 ，需要进一步试验以提高诱导和分化率 。花茎是进行郁金香离体再生的重要外植体 。朱丽芳等的试验结果表明 ，老鸦瓣的鳞茎作为外植体较容易形成愈伤组织 ，且再生频率较高 。杨永刚等发现使用郁金香栽培品种 “风流寡妇 ”的花茎作为外植体直接诱导小鱗茎的频率较其它组织器官高 。而该试验中 ，将种野生郁金香的花茎接种于培养基上 ，经过一段时间的培养全部褐化死亡 ，未能诱导出愈伤组织和再生苗 ，这个结果可能是由于采用了不同基因型的外植体 。植物的基因型对花茎愈伤组织诱导的影响较大。张洁茹等研究发现 ，同一花茎上 、中 、下不同部位的诱导效果差异明显 ，花茎上部和中部启动能力强 ，适宜做离体再生的外植体 。目前 ，郁金香商品球繁殖的主要方式是利用鳞茎的自然增殖 。郁金香母鳞茎种植后 ，随其自身的生长 ，每个鳞片腋处的鳞茎原始体便可发育成子鳞茎 ，母鳞茎开花后每年能分生出个小籽球 。在野生郁金香多年的栽培过程中发现野生郁金香每年都会进行鳞茎更新 ，但一般只形成个更新鳞茎 ，只有老鸦瓣偶尔有个小鳞茎产生 。所以野生郁金香不宜采用种球进行快速扩繁 。该试验结果表明 ，老鸦瓣的繁殖能力最强 ，在种子繁殖和组培繁殖的过程中繁殖率都很高 ，而阿尔泰郁金香和准噶尔郁金香则适宜利用种子进行繁殖 。参考文献 ： ， ： ： ， 陈俊愉 通过远缘杂交选育中华郁金香新品种群 农业科技与信息 ，（）：屈连伟 ，雷家军 ，苏君伟 ，等 郁金香人工杂交技术研究 农业科技与信息 ，（）：屈连伟 ，雷家军 ，张艳秋 ，等 中国郁金香科研现状与存在的问题及发展策略 北方园艺 ，（）：陈芳 ，刘彤 ，周玲玲 新疆野生郁金香生物学特性及种子发芽特性的研究 石河子大学学报 （自然科学版 ），（）：张爱勤 ，景辉 ，殷禅明 ，等 郁金香种子休眠特性及发芽条件的研究 草业科学 ，（）： ， ， ， ，： ， ，（）： ， ： ： ， ， ， ， （）： ，：朱丽芳 ，徐超 ，朱再标 ，等和 对老鸦瓣不定芽诱导和丛生芽增殖的影响 中国中药杂志 ，（）： 杨永刚 ，代汉萍 ，胡新颖 ，等郁金香器官离体培养再生小鱗茎的研究 园艺学报 ，（）：宋阳 ，雷家军 ，胡新颖萱草花茎离体培养研究北方园艺 ，（）：张洁茹 ，刘晓嘉 ，陈丽飞 ，等萱草优良单株花茎离体快繁东北林业大学报，（）： ， ， ， ， （ ， ， ）：， ， ， ，北方园艺月 （下 ）北方园艺（）： ·园林花卉 ·第一作者简介 ：徐逸卿 （），男 ，江苏南京人 ，博士研究生 ，讲师 ，研究方向为计算机应用与生物信息学 。：基金项目 ：国家重点基础研究发展计划资助项目（）；国家重点研发计划资助项目（）。收稿日期 ：基于比较基因组学的簸箕柳模体预测徐 逸 卿，毕 长 伟，张 福 全，杜 思 源，蒋 安 纳，业宁（南京林业大学 信息科学技术学院，江苏 南京；东南大学 计算机科学与工程学院，江苏 南京）摘要 ：以已完成全基因组测序及组装的模式生物拟南芥和具有很高研究价值的园艺植物柳树 （）的全基因组测序为数据源 ，采用基于位置的基因序列匹配方法 ，研究了新测序物种簸箕柳 （ ）的模体序列 ，以期为进一步了解柳树乃至林木的基因调控网络提供参考依据 。结果表明 ：此次预测的结果与手工验证的部分簸箕柳的模体一致 ，该研究发布的基于簸箕柳全基因组的模体预测结果对于杨柳科植物的研究具有重要的意义 。关键词 ：簸箕柳 ；模体 ；比较基因组学中图分类号 ： 文献标识码 ： 文章编号 ：（）与地球表面生态圈庞大的种群数量相比 ，只有相对较少的林木物种被测序 ，特别是园艺植物的测序 ，这种发展的不均衡促使了近几年相关物种全基因组测序及其相关研究的高速发展 。但由于园艺植物乃至林木物种生命世代较长 ，例如林木模式生物杨树最少需要年方能成熟 ，一定程度上阻碍了林木基因组学的研究，而且 ，林木个体体积庞大 ，给试验和操作也带来了一系列的困难 。簸箕柳 （ ）因具有相对较短的世代周期 、植株尺寸较小 、环境适应性强 、维护成本低廉 、适合进行种内和种间杂交 、果实种量高等特点被认为是一种非常高效适宜的园艺植物基因组学研究对象 。更重要的是 ，作为模式植物杨树 （）的近缘物种 ，柳树与杨树具有很高的遗传学相似性，可见 ，簸箕柳是一种理想的园艺植物遗传学研究材料 。年 ，南京林业大学的团队对簸箕柳进行了全基因组测序，共测得短序列 个 ，组装为 个拼 接 ，其 中 ：包 含 个 、 个 、 个和 个 。最新版本的测序结果是基于（ ）的微卫星测序结果 ，标记了共计 个（ ，单核苷酸多态 ）。然而 ，簸箕柳基因的深层次注释仍亟待研究以构建柳树的基因代谢网络 ，需要建立簸箕柳 ， （） ， · ·· ， ， ， ， ：；