百合不同品种间花粉萌发活力检测分析_于金平.pdf

收 稿日期 ：2017-05-10基金项目 ：北京市科技计划项目 （D161100001916003）；北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划资助项目 （IDHT20150503）；林果业生态环境功能提升协同创新中心资助项目 （PXM2017-014207-000043）第一作者 ：于金平 （1990-），女 ，硕士研究生 ，从事园林植物与观赏园艺研究 ，E-mail：2285956482qq.com通信作者 ：王文和 （1964-），男 ，博士 ，教授 ，从事园林植物与育种研究 ，E-mail：wwhals163.com百合是一种从古至今都受人喜爱的世界名花 。 世界上共发现百合属 （Lilium）植物大约 115 种 ，多数来自北半球的温带及高山地区 ，尤其是在亚洲东部地区 。中国拥有丰富的百合种质资源 ，共分布有 55 种 ，其中 35 种为百合不同品种间花粉萌发活力检测分析于金平 ，王媛媛 ，张 琪 ，王文和 ，冷平生 ，赵祥云（北京农学院 园林学院 /北京林果业生态环境功能提升协同创新中心 ，北京 102206）摘 要 ：以不同类型百合的花粉为研究对象 ，探讨不同品种百合花粉萌发的特点以及不同类型百合花粉的萌发是否具有一定的规律性 ，旨在为百合杂交育种中父本材料的选择以及授粉方法的改良提供依据 。 以百合 5 个类型共 43 个品种的花粉为材料 ，利用离体萌发法 ，探讨不同品种百合花粉萌发活力 ，筛选适用于大部分品种的最佳培养基 ，结果表明 ，在蔗糖 100g·L-1、硼酸 20mg·L-1、琼脂10g·L-1的固体培养基上可以较好地萌发 。 大多数百合品种都能在 12h 内达到最大萌发率 ，也有少数品种在 24h 还处于萌发状态 。百合会因自身遗传特性导致萌发率不同 ，其中 ，TR 类百合总体萌发活力最强 ，平均萌发率 80.98%；LA 类百合萌发率最低 ，平均为13.49%；OT 类 、A 类和 AT 类萌发率居中 ，分别为 49.06%，46.05%和 50.06%。 百合花粉管自身寿命也存在明显差异 ，在 43 个百合品种中 ，发现有 18 个品种在培养后期花粉萌发率明显下降 ，这主要是由于培养后期花粉管自身破裂所导致的 。 因此 ，在进行杂交育种的过程中 ，可根据育种目的有针对性地选择父本材料 ，其中 ，TR 类百合是非常好的父本材料 ；其他萌发率低于 50%的资源做父本时可加大授粉量 、采取二次授粉或切割花柱等方式提高授粉成功率 ；本试验中花粉不能萌发的资源建议不做父本应用 。关键词 ：百合 ；离体培养条件 ；最适培养基 ；花粉萌发率中图分类号 ：S682.2.9 文献标识码 ： A 文章编号 ：1000-1700（2018）01-0014-06Investigation Report on Pollen Viability Among Different Lily CultivarsYU Jin-ping, WANG Yuan-yuan, ZHANG Qi, WANG Wen-he,LENG Ping-sheng, ZHAO Xiang-yun(College of Landscape Architecture/Beijing Collaborative Innovation Center for Eco-environmental Improvement With Forestry and Fruit Trees,Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China)Abstract： We studied the characteristics and regularities of lily pollen germination of different lily cultivars, aiming at guidingthe choice of parents in cross breeding and the choice of pollination method. Five types, a total of 43 lily cultivars were used toexplore lily the pollen viability, by using the vitro pollen germination method to screen the best medium suitable for mostvarieties. The results showed that the combination of sugar (100 g·L-1), boric acid (20 mg·L-1) and AGAR (10 g·L-1) was thebest solid medium. Most lily cultivars could achieve maximum germination rate within 12 hours, however there were a fewvarieties still in a state of germination in 24 hours. The germination rate was different due to variety genetic characteristics. TRtype lily had the highest germinating vigor, with 80.98% germination rate on average. Germination rate of LA type was thelowest with an average of 13.49%, while those of OT, A and AT types were 49.06%, 46.05% and 50.06%, respectively. In 43lily cultivars, obvious differences in lily pollen tube's life was found, 18 varieties showed pollen germination rate decliningobviously at late culture stage mainly due to the pollen tube rupture. Thus, we should choose parent materials according tobreeding aim in the process of cross -breeding. With 80.98% germination rate, TR type is a very good parental material.Pollination rate could be increased through successive pollination for the types with lower than 50% germination rate or cuttingthe style of female parents. The types which cannot germinate properly are not recommended to be used as male parents.Key words： lily; in vitro culture condition; optimal medium; pollen germination rate沈阳农业大学学报 ，2018，49(1)：14-19Journal of Shenyang Agricultural University于金平 ，王媛媛 ，张 琪 ，等 .百合不同品种间花粉萌发活力检测分析 J.沈阳农业大学学报 ，2018，49（1）：14-19.http：/syny.cbpt.cnki.netDOI:10.3969/j.issn.1000-1700.2018.01.003于 金平等 ：百合不同品种间花粉萌发活力检测分析第 1 期 - -特有1。 当前百合育种多数以常规杂交育种为主 ，这样可以快速培育大量百合新品种 ，丰富百合市场资源 ，提供更多的切花百合 、庭院百合 、盆栽百合新品种 。 花粉活力的研究 ，可为杂交育种过程中选配优良授粉品种提供重要依据 ，花粉活力是杂交成功的必要前提2。 目前在百合花粉萌发活力方面的研究已有相关报道 。 张静等研究了 5 个不同类型品种百合的花粉形态差异及在不同温度下的花粉萌发情况 ， 结果发现不同品种的百合在不同温度下萌发活力存在明显差异3；杨风玲4以东方百合索蚌和西伯利亚花粉为材料 ，研究了蔗糖 、氯化钙和硼酸不同浓度组合对两种百合花粉萌发率的影响并筛选了最佳液体培养基 ；缑辉等5以 7 个品种的百合花粉为材料 ，筛选了最佳固体培养基 ，并探究了花粉的储藏活力 ，以期解决花期不遇无法授粉的状况 。 2014 年 ，张艺萍等6选取了 30 个百合品种及 2 个野生品种的花粉 ，采用染色法和花粉离体萌发法 ，探讨了不同百合品种新鲜花粉生活力 、萌发率的差异 。 北京农学院近 10 年来主要通过杂交育种开展庭院百合的新品种培育工作 ，从国内外收集和引进了许多可在北京北部山区露地越冬的百合资源 ，并对这些资源的生物学特性进行全面评价和对其作为育种核心种质资源加以深度利用 ， 其中探讨各品种花粉萌发情况是研究内容之一 。 本研究的材料采集于连续 3 年露地种植在北京市延庆区风沙源育苗中心的 43 个百合品种新鲜花粉 ，在离体培养条件下 ，探讨不同类型百合花粉萌发的差异性 ，以期获得更为广泛的试验数据 ，为充分利用这些百合资源和通过百合杂交培育庭院百合新品种提供指导和奠定基础 。1 材料与方法1.1 材料供试百合 （Lilium）在北京市延庆区风沙源育苗中心露地种植 3 年 ，且生长良好 ，2017 年 7 月初正常开花 。供试花粉于百合盛开当天 9:0011:00 采集 ，将采集的新鲜花粉放置于装有硅胶的干燥皿中干燥 24h。 其中包括LA(longiflorum/Asiatic hybrids)类型 4 个品种 （CM、Kingdom、Bright Diamond 和 Golden Stone）、TR(Trumpet hy-brids)类型 8 个品种 （Orania、African Queen、Yellow Planet、Pink Perfection、Golden Splendor、White Planet、RegaleAlbum 和 Orange Planet）、OT (Oriental/Trumpet hybrids) 类型 4 个品种 （Visaversa、Friso、Mister Right 和 BeijingMoon）、A(Asiatic hybrids)类型 15 个品种 （Yellow Power、Navona、Whistler、Forever Susan、Pronotto、Peach Dwarf、Buff Pixie、Forever Marjon、Forever Marjolein、Orange County、Cherubino、Abbeville Pride、Orange Electric、SweetLord 和 Pieton）、AT (Asiatic/Trumpet hybrids) 类型 12 个品种 （Pearl Melanie、Tiger Babies、Red Flavour、PinkFlavour、Salmon Flavour、Pearl Loraine、Sweet Surrender、Wine Flavour、Pear Carolina、Pearl Jennifer、Pear Justien 和Chocolate Canary），共 43 个百合品种 。1.2 方法1.2.1 最佳培养基筛选 影响花粉萌发活性的主要因素是蔗糖 、硼酸的浓度 。 因此为了满足大多数品种花粉最适的萌发条件 ，以蔗糖 、硼酸两因素为准 ，设计9 个各成分浓度不同的培养基 （表 1），在 5 个百合类型中分别选择 1 个品种做供试培养基筛选试验 ：5 个百合品种分别为 Orange Electric （A）、Golden Stone（LA）、Pear Carolina（AT）、Mister Right（OT）和 PinkPerfection（TR）。 将 5 种百合花粉分别均匀撒落于 9 种培养基上 ，于室温 （25左右 ）培养 3h，在显微镜下观察花粉萌发情况 ，并统计花粉萌发率 （每个处理下观察 3 个花粉分布均匀且数量在 50 粒以上的视野 ，每个处理重复 3 次 ）。 花粉萌发标准为花粉管长度大于等于花粉粒直径 （赤道轴长度 ），萌发率计算公式为 ：萌发率 （%）=（已萌发花粉数量 /花粉总数量 ）×100。1.2.2 花粉萌发活力研究 选择最适于 5 个百合品种花粉萌发的培养基 ， 将所有百合品种花粉都于此类型培养基中培养 ，并观察统计培养 3，6，12，24h 各品种百合花粉萌发率 。 每个处理都设置 3 次重复 ，并统计计算花粉萌发率 。表 1 不同类型培养基Table 1 Different types of culture medium培养基Medium123456789蔗糖 /g·L-1Saccharose505050100100100150150150硼酸 /mg·L-1Boric acid102030102030102030生化琼脂 /g·L-1Agarose10101010101010101015第 49 卷沈阳农业大学学报- -1.2.3 不同类型百合间花粉萌发率的比较 将各类型内花粉不萌发品种去除 ，用 SPSS17.0 软件对各类型百合进行 Docan 差异显著性分析 。 采用独立样本的 T 检验进行均值比较 ，并按照 Ducan 法 =0.05 水平标注显著性7。2 结果与分析2.1 最适培养基的筛选由图 1 可知 ， 供试 5 个品种百合的花粉对 9 种培养基的适应性各不相同 ，但并无明显的规律性 。 在5 号培养基上 Golden Stone、Pear Carolina、Mister Right和 Pink Perfection 花粉萌发率最高 ， 分别为 8.82%、55.24%、78.26%和 94.44%，Orange Electric 在 5 号培养基上花粉萌发率达到 68.67%， 仅次于 1 号培养基上的 70.08%， 但为了保证大多数花粉都能有较好的萌发且萌发条件一致 ， 选择 5 号培养基作为测定花粉活力的培养基 ，即含蔗糖 100g·L-1、硼酸 20mg·L-1、琼脂 10g·L-1的固体培养基 。2.2 花粉活力的显著性分析由表 2 可知 ， 供试百合达到最大萌发力的时间不同 。 其中 ，LA 类百合 4 个品种中 CM 品种不萌发 ， Bright Diamond 在培养 3h 萌发率最高外 ，其余 2 个品种都在 12h 左右达到最大萌发率 ， 且该类所有品种萌发率都较低 ， 萌发率最高的品种 Golden Stone 萌发率只有29.73%（图 2A），具萌发力的品种平均萌发率只有 13.49%；TR 类百合 Orania 不萌发 ， White Planet 和 Pink Per-fection 两个品种在培养 3h 达到最大萌发率 ，该类其余 5 个品种都在培养 12h 达到最大萌发率 ，且萌发率较高 ，具有萌发力的所有品种的平均萌发率达到 80.98%， 其中 ， 品种 Orange Planet 的花粉萌发率达到最高 ，为98.07%（图 2B）；OT 类百合的 4 个品种中 Visaversa 花粉不萌发 ，Friso 萌发率极低 ， 仅为 2.56%（图 2C），MisterRight 和 Beijing Moon 萌发率较高 ， Beijing Moon 花粉萌发率可达到 86.25%（图 2D），3 个可萌发花粉的平均萌发率为 49.06%；A 类百合的 15 个品种中花粉萌发率差异较大 ， 其中 Yellow Power 不萌发 ，Navona 萌发率为培养基类型 Culture medium types花粉萌发率/%Pollengerminationrate图 1 不同培养基的花粉萌发率Figure 1 Pollen germination rate at differentculture medium typesA.Golden Stone； B.Orange Planet； C.Friso； D.Beijing Moon； E.Navona；F.Pear Carolina图 2 部分品种花粉萌发状况图Figure 2 The pollen germination condition of some lily cultivarsA B CD E F16于 金平等 ：百合不同品种间花粉萌发活力检测分析第 1 期 - -表 2 不同培养时间花粉萌发率的统计与分析Table 2 Statistics and analysis of pollen germination rate in different time序号No.12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940414243品种名NameCMKingdomBright DiamondGolden StoneOraniaAfrican QueenYellow PlanetPink PerfectionGolden SplendorWhite PlanetRegale AlbumOrange PlanetVisaversaFrisoMister RightBeijing MoonYellow PowerNavonaWhistlerForever SusanPronottoPeach DwarfBuff PixieForever MarjonForever MarjoleinOrange CountyCherubinoAbbeville PrideOrange ElectricSweet LordPietonPearl MelanieTiger BabiesRed FlavourPink FlavourSalmon FlavourPearl LoraineSweet SurrenderWine FlavourPear CarolinaPearl JenniferPear JustienChocolate Canary类型TypeLALALALATRTRTRTRTRTRTRTROTOTOTOTAAAAAAAAAAAAAAAATATATATATATATATATATATAT30.00±0.001.25±1.106.78±1.40m8.80±0.560.00±0.0038.76±1.3839.02±0.8164.34±4.7975.03±3.3895.83±5.06a96.25±7.11a96.11±1.650.00±0.000.00±0.0058.38±3.64f81.41±2.390.00±0.000.99±0.035.15±0.66m5.72±1.2615.79±1.2623.28±1.5520.93±1.4735.09±2.1347.95±1.4746.66±1.1658.56±3.20f54.33±5.9757.49±1.0178.58±4.6555.59±2.640.00±0.000.00±0.0011.93±1.5523.37±1.1632.49±1.9344.08±1.16i46.17±2.6431.02±2.1358.23±1.08f55.53±3.7661.83±1.6069.56±3.7860.00±0.003.01±3.122.40±0.6612.26±2.670.00±0.0041.38±2.4942.34±1.7665.09±5.7392.48±1.0195.40±1.7391.96±1.5297.15±8.240.00±0.000.98±0.3150.66±3.0983.88±1.560.00±0.003.59±0.535.09±0.6014.65±1.67l28.32±1.06k27.60±1.7633.18±1.86jk40.73±1.4253.28±2.99g48.13±0.9958.04±2.4055.41±2.8972.80±3.9980.13±7.81cd80.25±7.92cd0.00±0.000.00±0.0014.96±2.5625.31±1.9435.21±1.36j43.85±1.2347.08±3.27hi35.78±1.1557.25±1.1058.63±1.76f69.74±1.2884.72±2.22120.00±0.003.97±1.33m2.87±0.6129.73±4.66k0.00±0.0044.33±3.82i55.00±1.78fg84.04±9.11bc93.34±6.87a95.40±5.6388.81±1.2098.07±3.13a0.00±0.001.86±0.1941.88±2.4586.25±3.12b0.00±0.003.81±0.41m5.02±1.0010.16±1.9424.13±1.7130.80±2.6517.98±0.9251.18±1.72gh38.90±1.4252.05±0.5258.08±4.7968.49±2.8378.88±1.27d71.60±3.4847.39±2.860.00±0.000.00±0.0015.06±1.9331.40±2.3427.15±0.7342.37±1.7645.84±1.2140.68±3.4020.74±2.2137.19±2.5878.69±4.66d84.20±5.92bc240.00±0.003.78±1.322.13±1.3729.08±4.290.00±0.0039.62±1.6833.21±2.4580.30±1.9593.29±1.2394.28±9.9784.84±8.3096.19±1.850.00±0.002.56±0.10m28.97±2.3686.01±2.920.00±0.001.09±0.145.13±0.349.35±0.9621.53±1.7131.79±1.17jk17.75±1.8749.08±1.8638.99±1.5456.11±1.57fg58.15±1.9769.43±4.96e78.39±4.5371.21±2.9546.63±2.490.00±0.000.00±0.0017.84±1.98i31.44±1.60jk21.84±1.8526.06±1.4343.46±3.3751.16±2.43gh18.66±2.6634.54±1.6368.90±1.6376.10±7.22培养时间 Lily pollen culture time/h注 ：有字母标记的值代表萌发率最大值且不同小写字母表示在 0.05 水平上差异显著 。 下同 。Note：The data followed by letters are the maximum germination rates, and the different letters indicate significant difference at 0.05 level. The same below.3.59%（图 2E），Whistler 萌发率为 5.15%，低于 10.00%，所有能萌发的品种平均萌发率为 46.06%；AT 类百合的12 个品种中 Pearl Melanie 和 Tiger Babies 不萌发 ，其他 10 个品种萌发率相对较高 ，平均萌发率为 50.66%，Pear17第 49 卷沈阳农业大学学报- -Carolina 花粉萌发率为 58.23%（图 2F）。 OT 类 、A 类 、AT 类百合达到最大萌发率的时间各不相同 ，无明显的规律性 ，花粉能萌发的品种平均萌发率都在 50%左右 。 对所有百合花粉最大萌发率做差异显著性分析 （表 2），发现大多数品种之间花粉萌发率存在显著性差异 ，说明百合花粉的萌发活力与品种自身的遗传特性有关 。2.3 不同类型百合间花粉萌发率显著性分析由表 3 可知 ，LA 类百合与其他类型百合都存在显著性差异 ， 且萌发率最低 ；TR 类百合萌发率最高 ， 与 A类 、LA 类百合存在显著性差异 ，但与 OT、AT 类百合无显著差异 ；OT、AT 类百合花粉萌发率无显著差异 ，且萌发率都居中等水平 。 这反映了相同类型间百合品种相似的遗传背景也会影响百合花粉的萌发活力 。2.4 不同培养时间百合花粉萌发趋势分析百合品种不同 ，其花粉最佳萌发时间也不同 ，多数品种在 12h 内就能达到最大萌发率 ，但也有少数品种在到达 24h 后萌发率还在增加 ，例如 Friso、Orange County、Wine Flavour 和 Red Flavour。 此外 ，大多数品种达到最大萌发率之后 24h 内可处于稳定状态 ，但是还有部分品种会出现萌发率逐渐下降的现象 ，主要是因为这些品种花粉管出现破裂现象导致的 。表 3 不同类型花粉萌发率显著性分析Table 3 Comparison of different type lily pollengermination rate类型TypeLATROTAAT品种数量No. of cultivars3731410花粉最大萌发率Pollen germination rate12.19±15.20c80.98±22.08a49.06±46.92ab46.05±26.92b50.66±20.48ab图 3 不同时间点百合萌发趋势Figure 3 The trend of pollen germination rate indifferent time120100806040200花粉萌发率/%Pollengerminationrate处理时间 Handle time/h3 6 12 24White PlanetYellow PlanetMister RightForever SusanWine Flavour3 讨论研究各类百合花粉萌发活力 ，优先选择花粉活力强的品种做父本 ，才使培育百合新品种成为可能 ，也使杂交培育遗传群体更具有针对性和目的性 ；对于花粉萌发活力低的品种 ，尤其是三倍体材料 ，通过人工选择花粉和改变授粉方式方法等来提高培育同源或异源多倍体品种的成功率 。多数研究表明 ，相比液体培养基 ，在固体培养基上的花粉萌发效果会更好一些8-10，因此 ，此次萌发试验选择在固体培养基上进行 。 试验结果表明 ，适合所取材料花粉萌发的培养基是蔗糖 100g·L-1、硼酸 20mg·L-1、琼脂10g·L-1的固体培养基 。 蔗糖为花粉萌发提供能量并调节渗透压11，硼在花粉萌发过程中可防止酚类物质的积累 ，促进花粉管萌发4，硼酸可以促进蔗糖的吸收和代谢 ，与蔗糖结合提高花粉的萌发率12，因此在授粉工作中可根据需要给柱头涂抹适量浓度比例的蔗糖 /硼酸溶液以提高授粉成功率 。43 个百合品种中有 6 个品种花粉不具有萌发活力 ，推测这可能与品种染色体倍性有关 ，非整倍体或三倍体的百合品种具有高度不育性 ，例如据报道品种 Navona 就是一个雄性不育的三倍体品种13。 本次研究结果显示不同类型的百合品种因自身的遗传基因型不同 ，其花粉生活力存在显著差异 ；而且发现同一百合类型中的品种间可能由于具有相似的遗传背景 ，花粉生活力较相近 。 这一结果和趋势与前人的研究报道也相一致6,14-16。其中 ，在所研究的 5 个类型 43 个百合品种中 ，以 TR 类百合萌发率最高 ，平均萌发率可达到 80.98%，据英国皇家园艺学会国际百合登记和注册机构报道 ，历史上岷江百合 （L. regale）是 TR 类型百合品种的一个重要亲本17，因此该类型多数品种也具有同岷江百合一样的优良特性和育性 ；LA 类百合萌发率最低 ，平均萌发率只有 13.49%，推测其主要原因与染色体倍性有关 ，LA 杂种系的百合大多数为三倍体18，其在减数分裂的过程中产生配子体异常会导致高度的不育性 ，但也有研究表明三倍体百合可产生有萌发力的整倍体或非整倍体花粉粒 ，也可作为百合杂交育种的父本19，和本试验结果低的花粉萌发率相吻合 。 以三倍体百合为父本或母本产生的大量非整倍体杂交后代 ，是百合遗传育种珍贵的附加系种质资源20。 因此 ，在以该类型百合作为杂交育种父本材料的时候 ，可通过加大授粉量和二次授粉的方法提高授精成功率 。18于 金平等 ：百合不同品种间花粉萌发活力检测分析第 1 期 - -每种植物花粉只有在适宜的温度和时间内才能进行更好的萌发和生长 。 本研究表明 ，不同品种的百合花粉达到最大萌发率的时间不同 （即花粉萌发速率不同 ），且维持自身花粉管活力的能力也不同 。 其中 ，有 18 个百合品种观察后期明显地出现了花粉萌发率下降的现象 ，说明培养时间过长花粉管会逐渐破裂 。 花粉管破裂与自身遗传特性有关 ，也与培养基成分有关 。 因此 ，针对萌发过程中花粉管易破裂的百合品种做杂交父本材料的时候 ，可通过切割母本花柱的方法来提高授粉受精的成功率 。选择合适的培养基 ，通过离体花粉萌发试验来探讨和模拟花粉在柱头和花柱内生长动态 ，対百合杂交育种中父本的选择 ，以及为了克服授粉受精不良而相应地采取加大授粉量 、二次授粉 、切割花柱等授粉方法均具有重要的指导意义 。参考文献 ：1 WU Z Y,RAVEN P H,HONG D Y.Flora of China:Vol.24M.China:Missouri Botanical Garden Press,2013：135.2 胡珂雪 ,张晓曼 ,郑云风 .四季报春花粉萌发特性研究 J.西北林学院学报 ,2017,32(2):170-173.3 张 静 ,左 丹 ,唐道城 .百合花粉的形态特征观察及温度对其萌发率的影响 J.江苏农业科学 ,2014,42(1):148-150.4 杨风玲 .东方百合花粉萌发最佳培养基筛选 J.北方园艺 ,2011,21:113-114.5 缑 辉 ,潘云兵 ,杨 彪 ,等 .百合花粉萌发最佳培养基筛选及其活力测定 J.现代园林 ,2015,12(4):299-303.6 张艺萍 ,瞿素萍 ,吴丽芳 ,等 .30 个百合品种和两个野生百合的花粉生活力及其贮藏条件研究 J.西南农业学报 ,2014,27(6):2548-2553.7 王晓静 ,刘 红 ,于金平 ,等 .北京延庆百合品种适应性调查 J.北方园艺 ,2017（5）:77-81.8 赵洪波 ,房伟民 ,陈发棣 .梅花花粉离体萌发和花粉管生长研究 J.广西植物 ,2007,27(3):393-396.9 李志能 ,刘国锋 ,罗春丽 ,等 .悬铃木花粉生活力及贮藏力的研究 J.武汉植物学研究 ,2006,24(1):54-57.10 杜纪红 ,叶正文 ,苏明申 ,等 .桃花粉离体萌发和花粉管生长特性研究 J.西北植物学报 ,2011,31(1):0064-0071.11 杨梦飞 ,李怡鹏 ,楼宇涛 ,等 .培养液组分及培养时间对睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响 J.浙江农业科学 ,2016,57(10):1689-1691.12 齐国辉 ,张景兰 ,郭 军 ,等 .不同核桃品种花粉生活力的比较研究 J.河北林果研究 ,2007(1)：54-56.13 李克虎 ,周桂雪 ,任贵玲 ,等 .百合品种染色体倍性观察 J.园艺学报 ,2011,38(5)：970-976.14 朱雪晨 ,王改萍 ,彭方仁 ,等 .不同美国山核桃品种花粉萌发与活力研究 J.南京林业大学学报 ,2015,39(4)：1-6.15 黄永芳 ,吴雪辉 ,何美儿 ,等 .3 种油菜植物花粉贮藏及生活力的研究 J.福建林学院学报 ,2011,31(1):56-59.16 胡适宜 .被子植物胚胎学 M.北京 ：高等教育出版社 ,1982.17 DUNCAN D.The International Lily Register Checklist (2007) Fifth SupplementEB/OL.https:/www.rhs.org.uk/plants/plantsman-ship/plant-registration/Lily-cultivar-registration/Lily-Supplement.pdf.p318 ZHOU S,RAMANNA M S,VISSER R,et al.Genome composition of triploid lily cultivars derived from sexual polyploidization ofLongiflorum×Asiatic hybrids (Lilium)J.Euphytica,2008,160:207-215.19 房 磊 ,姜 珊 ,席梦利 ,等 .麝香百合及东方百合品种核型分析 J.南京林业大学学报 ,2013,37(1):67-70.20 王 红 ,高婷婷 ,辛昊阳 ,等 .异源三倍体百合为母本的杂交后代 GISH 分析 J.园艺学报 ,2016(9):1834-1838.责任编辑 马迎杰 19