酵母菌0939-5对葡萄灰霉病菌抑制作用研究.pdf

<p>2018年 第 4期 C H I N A P L A N T P R O T E C T I O N 2018, V o l 38 N o 4研 究 报 告 灰 霉 病 是 葡 萄 保 护 地 生 产 中 最 常 见 和 普 遍 发 生 的 病 害 ， 更 是 产 后 贮 藏 过 程 中 的 毁 灭 性 病 害 。 该 病 由 灰 葡 萄 孢 （ B o t r y t i s c i n e r e a ） 引 起 ， 常 造 成 葡 萄 腐 烂 ， 导 致 葡 萄 产 量 和 品 质 下 降 ， 每 年 因 灰 霉 病 造 成 的 葡 萄 产 后 损 失 在 20% 30% 1 ， 甚 至 绝 产 。 目 前 ， 对 葡 萄 灰 霉 病 的 防 治 主 要 采 用 化 学 药 剂 方 法 。 但 长 期 大 量 使 用 化 学 杀 菌 剂 ， 使 病 菌 抗 药 性 增 强 2 -3 、 并 产 生 环 境 污 染 及 果 实 农 药 残 留 等 问 题 4 。 因 此 ， 寻 求 安 全 、 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 抑 制 作 用 研 究 张 迪 ， 王 晓 东 * （ 石 河 子 大 学 绿 洲 农 作 物 病 害 防 控 重 点 实 验 室 ， 新 疆 石 河 子 8 32000） 摘 要 ： 采 用 双 皿 对 扣 法 和 平 板 隔 离 对 峙 法 研 究 了 酵 母 菌 0939- 5对 葡 萄 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 的 抑 制 作 用 ， 并 根 据 其 产 生 的 挥 发 性 物 质 ， 以 活 性 炭 处 理 检 验 其 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 丝 和 分 生 孢 子 的 抑 制 作 用 。 结 果 表 明 ， 酵 母 菌 0939- 5 产 生 的 挥 发 性 物 质 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 的 生 长 （ 抑 制 率 为 71 . 59% ） 及 其 分 生 孢 子 （ 抑 制 率 为 99. 33% ） 的 萌 发 具 有 显 著 的 抑 制 作 用 ； 添 加 活 性 炭 吸 附 后 ， 葡 萄 灰 霉 病 菌 菌 丝 的 生 长 及 分 生 孢 子 的 萌 发 恢 复 了 活 性 ， 显 著 降 低 了 抑 制 作 用 。 同 时 ， 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 7 种 病 原 真 菌 也 具 有 明 显 的 抑 制 作 用 ， 尤 其 对 棉 花 立 枯 丝 核 菌 病 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i K ü h n ） 、 番 茄 早 疫 病 菌 （ A l t e r n a r i a s o l a n i ） 稻 瘟 病 菌 （ M a g n a p o r t h e o r y z a e ） 、 棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 的 抑 菌 效 果 较 好 ， 其 抑 菌 率 达 90. 93% 94. 00% 。 关 键 词 ： 酵 母 菌 0939- 5； 葡 萄 灰 霉 病 菌 ； 挥 发 性 物 质 ； 抑 制 作 用 中 图 分 类 号 ： S436. 631 文 献 标 识 码 ： A 文 章 编 号 ： 1 672-68 20（ 201 8） 04-0005-06 收 稿 日 期 ： 201 7-1 1 -06 ； 修 回 日 期 ： 201 8 -01 -24 基 金 项 目 ： 公 益 性 行 业 （ 农 业 ） 科 研 专 项 （ 201 303025） 作 者 简 介 ： 张 迪 ， 硕 士 研 究 生 ， 研 究 方 向 为 植 物 病 害 生 物 防 治 。 E- m a i l ： 1 538 971 356q q . c o m * 通 讯 作 者 ： 王 晓 东 ， 博 士 ， 副 教 授 ， 从 事 植 物 病 害 生 物 防 治 研 究 。 E- m a i l ： w x d o n g 1 1 1 63. c o m 。 I n h i b i t o r y e f f e c t o f y e a s t 09 39 -5 o n B o t r y t i s c i n e r e a Z h a n g Di ,W a n g X i a o d o n g （ K e y La b o r a t o r y o f Pr e v e n t i o n a n d C o n t r o l f o r Oa s i s C r o p Di s e a s e ,Sh i h e z i U n i v e r s i t y ,Sh i h e z i X i n j i a n g 8 32000,C h i n a ） Ab s t r a c t :In h i b i t o r y e f f e c t o f y e a s t 0939-5 o n m y c e l i a l g r o w t h a n d s p o r e g e r m i n a t i o n o f B o t r y t i s c i n e r e a w e r e s t u d i e d b y t w o -s e a l e d -b a s e -p l a t e s m e t h o d a n d p l a t e i s o l a t i o n -c o n f r o n t a t i o n m e t h o d ,w h i c h t e s t e d t h e f u n c t i o n o f v o l a t i l e o r g a n i c c o m - p o u n d s (V OC s )p r o d u c e d b y t h e y e a s t c o n t r o l l e d w i t h a c t i v a t e d c a r b o n .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e V OC s h a d a s i g n i f i c a n t i n h i b i t o r y e f f e c t o n g r o w t h o f B .c i n e r e a (w i t h i n h i b i t i o n r a t e o f 71 . 59% )a n d c o n i d i a l g e r m i n a t i o n (w i t h i n h i b i t i o n r a t e o f 99. 33% ).W i t h a d s o r p t i o n o f a c t i v a t e d c a r b o n ,g r o w t h a n d c o n i d i a l g e r m i n a t i o n o f B .c i n e r e a r e s u m e d .An d t h e V OC s a l s o h a d a s i g n i f i c a n t i n h i b i t o r y e f f e c t o n t h e g r o w t h o f s e v e n k i n d s o f p a t h o g e n i c f u n g i .Es p e c i a l l y ,i t h a d g o o d a n t i -f u n g a l a c t i v i t y a g a i n s t R h i z o c t o n i a s o l a n i K ü h n ,A l t e r n a r i a s o l a n i ,M a g n a p o r t h e o r y z a e a n d V e r t i c i l l i u m d a h l i a ,w i t h t h e a n t i -f u n - g a l r a t e s o f 90. 93% -94. 00% . K e y w o r d s :y e a s t 0939-5;B o t r y t i s c i n e r e a ;v o l a t i l e o r g a n i c c o m p o u n d s ;i n h i b i t o r y e f f e c t 5 · · 201 8 年 第 4 期 C H I N A P L A N T P R O T E C T I O N 201 8 , V o l 3 8 N o 4 0.5c m 灰 霉 病 菌 酵 母 菌 图 1 平 板 隔 离 对 峙 培 养 模 式 有 效 、 环 保 的 防 治 途 径 日 趋 迫 切 。 利 用 微 生 物 熏 蒸 技 术 代 替 化 学 药 剂 控 制 果 蔬 采 后 病 害 得 到 国 内 外 研 究 者 的 重 视 5 -7 。 已 有 的 研 究 表 明 ， 能 产 生 挥 发 性 抑 菌 物 质 （ v o l a t i l e o r g a n i c c o m p o u n d s ， V OCs ） 的 微 生 物 主 要 有 真 菌 8 、 细 菌 9 和 放 线 菌 1 0 等 。 美 国 S t r o b e l 教 授 发 现 的 一 株 内 生 真 菌 （ M u s c o d o r a l b u s ） 能 产 生 28种 挥 发 性 物 质 ， 且 对 多 种 病 原 真 菌 和 细 菌 具 有 抑 制 或 杀 死 的 作 用 1 1 。 该 真 菌 产 生 的 挥 发 性 物 质 已 被 美 国 Ag r a Qu e s t 公 司 成 功 开 发 出 世 界 上 第 一 种 微 生 物 熏 蒸 剂 ， 并 推 向 市 场 1 2 。 近 年 来 ， 利 用 微 生 物 产 生 挥 发 性 物 质 控 制 果 蔬 采 后 灰 霉 病 的 相 关 报 道 越 来 越 多 。 M a r i 等 1 3 -1 4 研 究 表 明 ， 黑 酵 母 菌 （ Au r e o b a s i d i u m p u l l u l a n s ） L1和 L8产 生 的 挥 发 性 物 质 能 有 效 防 治 由 灰 葡 萄 孢 （ B . c i n e r e a ） 引 起 的 核 果 类 果 实 病 害 。 青 霉 菌 1 5 、 链 霉 菌 菌 株 F-1 1 6 、 假 丝 酵 母 菌 C410 1 7产 生 的 挥 发 性 物 质 能 有 效 降 低 灰 霉 病 造 成 草 莓 的 腐 烂 ， 且 链 霉 菌 JK-1产 生 的 挥 发 性 物 质 能 显 著 抑 制 灰 霉 病 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 1 8 。 然 而 ， 关 于 采 用 挥 发 性 物 质 生 物 熏 蒸 法 控 制 采 后 葡 萄 灰 霉 病 的 研 究 目 前 鲜 有 报 道 。 2015 2016年 ， 通 过 从 外 界 环 境 中 大 量 分 离 酵 母 菌 ， 成 功 筛 选 获 得 一 株 能 有 效 抑 制 葡 萄 灰 霉 病 菌 的 菌 株 0939-5。 在 培 养 期 间 发 现 ， 酵 母 菌 0939-5具 有 芳 香 味 ， 能 产 生 挥 发 性 气 体 物 质 ； 也 有 相 关 报 道 表 明 ， 酵 母 菌 能 够 通 过 利 用 产 生 的 挥 发 性 物 质 抑 制 病 原 菌 的 生 长 1 7 。 本 研 究 针 对 该 菌 株 产 生 的 挥 发 性 物 质 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 的 抑 菌 作 用 进 行 了 探 讨 ， 为 葡 萄 采 后 灰 霉 病 ， 尤 其 是 葡 萄 储 运 期 间 灰 霉 病 的 生 物 防 治 提 供 理 论 依 据 。 1 材 料 与 方 法 1 1 供 试 菌 株 和 培 养 基 葡 萄 灰 霉 病 病 菌 S B-3-2和 酵 母 菌 0939-5由 本 实 验 室 分 离 、 鉴 定 和 保 存 。 棉 花 立 枯 丝 核 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i Kü h n ） 、 瓜 类 炭 疽 病 菌 （ Co l l e t o - t r i c h u m l a g e n a r i u m ） 、 番 茄 早 疫 病 菌 （ Al t e r n a r i a s o l a n i ） 、 水 稻 稻 瘟 病 菌 （ M a g n a p o r t h e o r y z a e ） 、 梨 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a k i k u c h i a n a T a n a k a ） 、 棉 花 枯 萎 病 菌 （ F u s a r i u m o x y s p o r u m f .s p .v a s i n f e c t u m ） 、 棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 由 石 河 子 大 学 植 物 病 理 实 验 室 王 晓 东 提 供 。 供 试 培 养 基 为 PD A、 Y PD 和 W A参 照 文 献 1 9的 方 法 制 备 。 1 2 方 法 1 2 1 对 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 抑 制 作 用 测 定 采 用 双 皿 对 扣 法 。 取 两 个 直 径 9 c m 培 养 皿 ， 移 去 皿 盖 ， 分 别 编 号 为 A和 B。 将 100 L 1× 10 8 c f u /m L 酵 母 菌 0939-5菌 体 悬 浮 液 涂 布 于 含 有 20 m L Y PD 培 养 基 的 A皿 平 板 上 。 同 时 ， 将 直 径 0. 7c m 灰 霉 菌 菌 株 S B-3-2菌 丝 块 接 入 含 有 20 m L PD A培 养 基 的 B 皿 平 板 上 。 AB皿 相 扣 ， 用 封 口 膜 封 口 ， 置 于 20 恒 温 培 养 箱 中 ， 培 养 3 d 后 测 量 灰 霉 菌 菌 落 半 径 大 小 。 以 未 涂 布 酵 母 菌 的 Y PD 平 板 作 为 对 照 。 每 个 处 理 3个 皿 ， 试 验 重 复 3次 。 测 量 后 的 B皿 ， 盖 皿 盖 置 于 20 培 养 箱 中 再 培 养 3 d ， 测 量 灰 霉 菌 菌 落 半 径 。 1 2 2 对 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 抑 制 作 用 的 显 微 观 察 采 用 平 板 对 峙 隔 离 法 （ 图 1） 。 将 PD A平 板 中 央 位 置 约 0. 5c m 宽 的 部 分 除 去 ， 使 两 侧 的 培 养 基 互 不 相 接 触 。 一 侧 培 养 基 上 涂 布 100 L 1× 108 c f u /m L 酵 母 菌 0939-5菌 体 悬 浮 液 ， 在 另 一 侧 培 养 基 上 铺 一 层 无 菌 玻 璃 纸 ， 并 接 入 直 径 0. 7c m 新 鲜 的 灰 霉 菌 菌 饼 。 以 未 涂 布 酵 母 菌 的 PD A平 板 作 为 对 照 。 置 于 20 培 养 箱 中 培 养 3 d ， 在 生 物 显 微 镜 下 观 察 对 照 及 处 理 的 灰 霉 菌 菌 丝 的 形 态 。 1 2 3 活 性 炭 对 酵 母 菌 0939-5抑 菌 作 用 的 影 响 方 法 同 1. 2. 2。 在 培 养 皿 一 侧 PD A平 板 中 间 位 置 涂 布 100 L 1× 10 8 c f u /m L酵 母 菌 0939-5菌 体 悬 浮 液 ， 在 另 一 侧 上 接 种 直 径 为 0. 7c m 的 灰 霉 菌 菌 丝 块 ， 培 养 皿 内 靠 边 缘 位 置 放 入 含 10 g 活 性 炭 无 菌 小 6 · · 201 8 年 第 4 期 C H I N A P L A N T P R O T E C T I O N 201 8 , V o l 3 8 N o 4 灰 霉 菌 编 号 菌 落 半 径 （ c m ） S B -3-2-a 1.27± 0.06 S B -3-2-b 4.03± 0.15 S B -3-2-CK 4.47± 0.15 表 1 酵 母 菌 0 9 3 9 -5 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 株 S B -3 -2 菌 丝 生 长 的 抑 制 作 用 1） 1） a 为 AB皿 相 扣 ， 封 口 培 养 3d ； b 为 B皿 灰 霉 菌 测 量 后 ， 开 封 继 续 培 养 3d 。 酵 母 菌 灰 霉 病 菌 活 性 炭 酵 母 菌 灰 霉 病 菌 a b 图 2 添 加 活 性 炭 抑 菌 效 果 测 定 模 式 a .加 活 性 炭 b .未 加 活 性 炭 铁 盒 （ 直 径 5 c m ） （ 图 2a ） 。 以 无 活 性 炭 的 培 养 皿 为 对 照 （ 图 2b ） ， 培 养 皿 封 口 后 ， 置 于 20 下 培 养 5 d 后 ， 测 量 灰 霉 菌 菌 落 直 径 。 每 个 处 理 设 3个 重 复 ， 每 皿 涂 布 酵 母 菌 菌 悬 液 面 积 相 等 ， 试 验 重 复 3次 。 测 量 灰 霉 菌 菌 落 半 径 （ c m ） 。 1 2 4 酵 母 菌 0939- 5对 灰 霉 病 菌 分 生 孢 子 萌 发 的 影 响 采 用 1.2.1中 方 法 。 处 理 ， 取 两 个 直 径 14c m 培 养 皿 ， 将 200 L 1× 10 8 c f u /m L酵 母 菌 0939- 5菌 体 悬 浮 液 涂 布 于 A皿 Y P D平 板 上 ， B皿 W A培 养 基 上 涂 布 400 L 1× 10 6 c f u /m L灰 霉 孢 子 液 ； 处 理 ， 在 涂 有 200 L 1× 108 c f u /m L酵 母 菌 0939- 5菌 体 悬 浮 液 的 A 皿 内 靠 边 缘 位 置 放 入 含 10 g 活 性 炭 无 菌 小 铁 盒 （ 直 径 5 c m ） ， B皿 W A培 养 基 上 涂 布 400 L 1× 10 6 c f u /m L灰 霉 菌 分 生 孢 子 悬 浮 液 。 AB两 皿 相 扣 后 ， 用 封 口 膜 封 口 ， 置 于 20 培 养 箱 中 培 养 12h 后 ， 观 察 和 计 算 各 处 理 中 灰 霉 病 菌 分 生 孢 子 的 萌 发 率 （ 每 处 理 观 察 5个 视 野 ） 。 每 个 处 理 3个 皿 ， 试 验 重 复 3次 。 以 只 接 种 灰 霉 菌 孢 子 悬 浮 液 的 B皿 为 对 照 。 孢 子 萌 发 率 （ % ） =萌 发 的 孢 子 总 数 /检 查 的 孢 子 总 数 × 100% 。 1 2 5 酵 母 菌 0939- 5抑 菌 谱 的 测 定 采 用 平 板 对 峙 隔 离 法 。 在 P DA平 板 一 侧 培 养 基 上 涂 布 100 L 1× 10 8 c f u /m L酵 母 细 胞 悬 浮 液 ， 在 另 一 侧 分 别 接 种 直 径 0.7 c m 供 试 病 原 菌 物 的 菌 饼 ； 以 未 涂 布 酵 母 菌 的 P DA 平 板 作 为 对 照 。 培 养 皿 封 口 后 ， 置 于 28 下 ， 培 养 7 d 后 测 量 菌 落 半 径 。 每 个 处 理 设 3个 重 复 ， 试 验 重 复 3次 。 测 量 供 试 病 原 菌 菌 落 半 径 ， 并 计 算 其 抑 菌 率 。 抑 菌 率 （ % ） =（ 对 照 的 菌 落 半 径 - 处 理 的 菌 落 半 径 ） /对 照 的 菌 落 半 径 × 100% 。 1 3 数 据 分 析 与 统 计 利 用 M i c r o s o f t E x c e l 2003进 行 数 据 处 理 。 2 结 果 与 分 析 2 1 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 对 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 的 抑 制 作 用 测 定 采 用 隔 离 对 峙 培 养 的 方 法 ， 观 察 到 由 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 灰 霉 菌 S B- 3- 2菌 丝 的 生 长 具 有 明 显 抑 制 作 用 （ 表 1） 。 灰 霉 菌 菌 落 平 均 半 径 为 1.27 c m ， 而 对 照 处 理 的 灰 霉 菌 菌 落 半 径 为 4.47 c m ， 其 抑 菌 率 为 71.59% 。 B皿 灰 霉 菌 菌 落 测 量 后 ， 未 封 口 继 续 培 养 3d ， 其 菌 落 半 径 为 4.03c m 。 表 明 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 能 够 显 著 的 抑 制 灰 霉 病 菌 菌 丝 的 生 长 。 通 过 封 口 培 养 3d 的 B皿 中 灰 霉 菌 菌 落 前 端 菌 丝 的 显 微 观 察 ， 发 现 经 酵 母 菌 0939- 5处 理 的 灰 霉 菌 菌 丝 与 对 照 （ 图 3a ） 相 比 ， 菌 丝 变 细 ， 出 现 扭 曲 、 畸 形 ， 且 菌 丝 分 支 明 显 增 多 ， 菌 丝 长 度 变 短 ， 隔 膜 间 距 变 短 （ 图 3b ） 。 2 2 活 性 炭 对 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 抑 菌 作 用 的 影 响 添 加 活 性 炭 对 酵 母 菌 0939- 5抑 制 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 的 试 验 结 果 显 示 ， 有 活 性 炭 存 在 时 ， 灰 霉 菌 S B- 3- 2菌 落 半 径 大 于 未 添 加 活 性 炭 的 处 理 ， 其 菌 落 半 径 为 4.73c m ； 而 未 添 加 活 性 炭 的 处 理 ， 菌 落 平 均 半 径 仅 为 2.07 c m 。 由 此 说 明 ， 活 性 炭 吸 附 了 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 ， 明 显 的 降 低 了 其 挥 发 性 物 质 对 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 的 抑 制 作 用 。 2 3 活 性 炭 对 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 抑 制 分 生 孢 子 萌 发 的 影 响 通 过 添 加 活 性 炭 测 定 了 酵 母 菌 0939- 5对 灰 霉 病 菌 分 生 孢 子 萌 发 的 影 响 ， 证 实 了 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 灰 霉 病 病 菌 的 抑 制 作 用 。 试 验 中 有 活 性 炭 的 存 在 ， 灰 霉 菌 S B- 3- 2分 生 孢 子 的 萌 发 率 为 61.00% ， 而 未 加 活 性 炭 的 处 理 ， 孢 子 萌 发 率 仅 有 0.67% 。 加 活 性 炭 处 理 后 ， 灰 霉 菌 孢 子 可 以 萌 发 ， 其 7 · · 201 8 年 第 4 期 C H I N A P L A N T P R O T E C T I O N 201 8 , V o l 3 8 N o 4 对 照 处 理 1 2 3 4 5 6 7 1.番 茄 早 疫 病 菌 （ Al t e r n a r i a s o l a n i ） 2.棉 花 立 枯 丝 核 病 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i K ü h n ） 3.棉 花 枯 萎 病 菌 （ F u s a r i u m o x y s p o r u m f .s p .v a s i n f e c t u m ） 4.水 稻 稻 瘟 病 菌 （ M a g n a p o r t h e o r y z a e ） 5.梨 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a k i k u c h i a n a T a n a k a ） 6.棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 7 .瓜 类 炭 疽 病 菌 （ Co l l e t o t r i c h u m l a g e n a r i u m ） 图 5 酵 母 菌 菌 株 0 9 3 9 -5 对 7 种 病 原 菌 菌 丝 生 长 的 影 响 a .空 白 对 照 处 理 b .添 加 活 性 炭 处 理 c .未 加 活 性 炭 处 理 图 4 活 性 炭 处 理 酵 母 菌 菌 株 0 9 3 9 -5 产 挥 发 性 物 质 对 灰 霉 病 病 菌 孢 子 萌 发 的 影 响 显 微 观 察 a .未 接 种 酵 母 菌 处 理 的 灰 霉 菌 菌 丝 b .接 种 酵 母 菌 处 理 的 灰 霉 菌 菌 丝 图 3 酵 母 菌 0 9 3 9 -5 处 理 后 葡 萄 灰 霉 病 菌 菌 株 S B -3 -2 菌 丝 形 态 的 显 微 观 察 萌 发 的 芽 管 的 长 度 （ 图 4 b ） 显 著 小 于 空 白 对 照 处 理 的 孢 子 萌 发 芽 管 长 度 （ 图 4 a ） 。 而 未 加 活 性 炭 的 处 理 ， 灰 霉 菌 孢 子 几 乎 不 能 萌 发 （ 图 4 c ） 。 表 明 活 性 炭 吸 附 了 酵 母 菌 09 39 - 5产 生 的 挥 发 性 物 质 ， 显 著 降 低 了 其 挥 发 性 物 质 对 灰 霉 菌 孢 子 萌 发 的 抑 制 作 用 。 2 4 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 对 几 种 病 原 菌 的 抑 制 作 用 由 表 2和 图 5可 知 ， 酵 母 菌 09 39 - 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 供 试 病 原 真 菌 番 茄 早 疫 病 菌 （ Al t e r n a r i a s o l a n i ） 、 棉 花 立 枯 丝 核 病 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i K ü h n ） 、 棉 花 枯 萎 病 菌 （ F u s a r i u m o x y s p o r u m f .s p . v a s i n f e c t u m ） 、 水 稻 稻 瘟 病 菌 （ M a g n a p o r t h e o r y z a e ） 、 梨 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a k i k u c h i a n a T a n a k a ） 、 棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 、 瓜 类 炭 疽 病 菌 （ Co l - l e t o t r i c h u m l a g e n a r i u m ） 的 生 长 均 有 不 同 程 度 的 抑 制 8 · · 201 8 年 第 4 期 C H I N A P L A N T P R O T E C T I O N 201 8 , V o l 3 8 N o 4 病 原 真 菌 抑 菌 率 （ % ） 棉 立 枯 丝 核 菌 病 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i Kü h n ） 94.00± 0.00 番 茄 早 疫 病 菌 （ Al t e r n a r i a s o l a n i ） 93.19± 0.69 稻 瘟 病 菌 （ M a g n a p o r t h e o r y z a e ） 91.08± 0.30 棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 90.93 ± 0.95 瓜 类 炭 疽 病 菌 （ Co l l e t o t r i c h u m l a g e n a r i u m ） 84.00± 1.00 梨 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a k i k u c h i a n a Ta n a k a ） 7 0.59± 0.46 棉 花 枯 萎 病 菌 （ F u s a r i u m o x y s p o r u m f .s p .v a - s i n f e c t u m ） 44.29± 0.48 表 2 酵 母 菌 0 9 3 9 - 5 对 几 种 主 要 病 原 菌 的 抑 制 作 用 作 用 ， 其 中 ， 对 棉 花 立 枯 丝 核 菌 抑 制 作 用 最 强 ， 平 均 抑 制 率 可 达 94.00% ， 对 棉 花 枯 萎 病 菌 抑 制 作 用 最 弱 ， 平 均 抑 制 率 为 44.29% 。 3 讨 论 近 年 来 ， 国 内 外 对 利 用 真 菌 20-21 、 细 菌 22-23以 及 链 霉 菌 1 5产 生 的 挥 发 性 物 质 来 防 治 植 物 病 害 做 了 较 多 的 研 究 。 陈 利 军 等 24研 究 表 明 ， 产 香 真 菌 Z Y- 2菌 株 产 挥 发 性 物 质 对 草 霉 灰 霉 病 菌 （ B . c i n e r e a Pe r s ） 、 水 稻 胡 麻 斑 病 菌 （ Bi e o l a r i s o r v z a e Sh o e m a k e r ） 、 小 麦 赤 霉 病 菌 （ F u s a r i u m g r a m i n e a r u m Se h w ） 、 白 菜 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a b r a s s i c a e Sa c c ） 和 莴 苣 菌 核 病 菌 （ S c l e r o t i n i a s c l e r o t i o r u m Ba r v ） 等 5种 植 物 病 原 真 菌 均 有 一 定 的 抑 制 作 用 。 利 用 芽 孢 杆 菌 （ Ba c i l l u s s u b t i l i s ） 产 生 的 挥 发 性 物 质 可 以 显 著 地 抑 制 柑 橘 青 霉 病 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 25 。 野 生 凤 梨 （ M u s - c o d o r c r i s p a n s ） 通 过 利 用 产 生 的 多 种 挥 发 性 物 质 能 有 效 地 抑 制 腐 霉 菌 （ P y t h i u m u l t i m u m ） 、 疫 霉 菌 （ P h y - t o p h t h o r a c i n n a m o m i ） 和 核 盘 菌 （ S c l e r o t i n i a s c l e r o t i o - r u m ） 等 多 种 病 原 菌 的 生 长 26 。 Hu a n g 等 27 报 道 了 掷 孢 酵 母 具 有 优 良 的 生 防 潜 质 ， 其 产 生 的 挥 发 性 物 质 能 显 著 抑 制 灰 霉 病 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 。 本 研 究 同 样 发 现 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 葡 萄 灰 霉 病 菌 菌 丝 的 生 长 和 孢 子 的 萌 发 均 有 显 著 的 抑 制 作 用 。 试 验 中 酵 母 菌 与 灰 霉 菌 无 直 接 接 触 即 能 抑 制 其 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 ， 且 添 加 活 性 炭 后 ， 酵 母 菌 0939- 5产 VO Cs 对 灰 霉 菌 的 生 长 及 分 生 孢 子 的 萌 发 抑 菌 作 用 明 显 下 降 ， 表 明 酵 母 菌 产 生 的 挥 发 性 物 质 是 导 致 灰 霉 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 受 抑 制 的 主 要 原 因 。 此 外 ， 酵 母 菌 0939- 5产 生 的 挥 发 性 物 质 对 番 茄 早 疫 病 菌 （ Al t e r n a r i a s o l a n i ） 、 棉 花 立 枯 丝 核 病 菌 （ R h i z o c t o n i a s o l a n i Kü h n ） 、 棉 花 枯 萎 病 菌 （ F u s a r i u m o x y s p o r u m f .s p .v a s i n f e c t u m ） 、 水 稻 稻 瘟 病 菌 （ M a g - n a p o r t h e o r y z a e ） 、 梨 黑 斑 病 菌 （ Al t e r n a r i a k i k u c h i a n a Ta n a k a ） 、 棉 花 黄 萎 病 菌 （ V e r t i c i l l i u m d a h l i a ） 、 瓜 类 炭 疽 病 菌 （ Co l l e t o t r i c h u m l a g e n a r i u m ） 7种 病 原 真 菌 的 生 长 也 具 有 抑 菌 作 用 。 利 用 微 生 物 产 生 的 挥 发 性 抑 菌 物 质 防 治 果 蔬 采 后 病 害 日 趋 受 到 国 内 外 学 者 的 青 睐 28 。 微 生 物 熏 蒸 被 认 为 是 一 种 理 想 的 生 防 途 径 。 该 方 法 的 运 用 不 会 造 成 农 产 品 农 药 残 留 、 公 共 安 全 和 病 原 菌 产 生 抗 药 性 等 系 列 问 题 29-30 。 研 究 报 道 木 霉 菌 产 生 的 6-戊 基 - 2H-吡 喃 - 2-酮 对 番 茄 灰 霉 病 菌 有 明 显 抑 制 作 用 31 。 Hu a 等 32 研 究 发 现 异 常 威 克 汉 姆 酵 母 （ W i c k e r - h a m o m y c e s a n o m a l u s ） 产 生 的 挥 发 性 物 质 苯 乙 醇 能 有 效 地 抑 制 黄 曲 霉 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 。 本 研 究 中 的 酵 母 菌 0939- 5能 产 生 的 挥 发 性 抑 菌 物 质 的 有 效 成 分 分 析 还 有 待 进 一 步 研 究 。 参 考 文 献 1 陈 宇 飞 ， 文 景 芝 ， 李 立 军 . 葡 萄 灰 霉 病 研 究 进 展 J . 东 北 农 业 大 学 学 报 ， 2006， 37 （ 5） ： 693-699. 2 田 世 平 ， 范 青 . 控 制 果 蔬 采 后 病 害 的 生 物 学 技 术 J . 植 物 学 通 报 ， 2000， 17 （ 3 ） ： 211-217 . 3 丁 中 ， 刘 峰 ， 王 会 利 ， 等 . 番 茄 灰 霉 病 的 多 重 抗 药 性 研 究 J . 山 东 农 业 大 学 学 报 ， 2001， 32（ 4） ： 452-456. 4</p>