新疆番茄黄化曲叶病毒与烟粉虱隐种的区域分布检测.pdf

第 38 卷 第 2 期 2 020 年 4 月 石 河 子 大 学 学 报 自 然 科 学 版 J o u r n a l o f Shi he z i U ni v e r s i t y N a t ur a l Sc i e nc e V o l 38 N o 2 A pr 2020 收 稿 日 期 2 0 1 9 0 5 2 0 基 金 项 目 兵 团 区 域 创 新 计 划 项 目 2 0 1 8 B B 4 0 3 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 3 1 5 6 0 5 3 4 农 业 部 西 北 荒 漠 绿 洲 作 物 有 害 生 物 综 合 治 理 重 点 实 验 室 开 放 基 金 资 助 课 题 K F J J 2 0 1 8 0 1 0 5 作 者 简 介 韩 畅 1 9 9 4 女 硕 士 研 究 生 研 究 方 向 为 植 物 病 理 学 通 信 作 者 都 业 娟 1 9 7 3 女 副 教 授 硕 士 生 导 师 研 究 方 向 为 植 物 病 理 学 e m a i l d y j a g r s i n a c o m D O I 1 0 1 3 8 8 0 j c n k i 6 5 1 1 7 4 n 2 0 1 9 2 3 0 1 2 文 章 编 号 1 0 0 7 7 3 8 3 2 0 2 0 0 2 0 1 6 0 0 6 新 疆 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 与 烟 粉 虱 隐 种 的 区 域 分 布 检 测 韩 畅 1 张 兴 旺 1 高 国 龙 1 韩 盛 2 都 业 娟 1 1 石 河 子 大 学 农 学 院 新 疆 绿 洲 农 业 病 虫 害 治 理 与 植 保 资 源 利 用 重 点 实 验 室 新 疆 石 河 子 8 3 2 0 0 3 2 农 业 部 西 北 荒 漠 绿 洲 作 物 有 害 生 物 综 合 治 理 重 点 实 验 室 新 疆 农 业 科 学 院 植 物 保 护 研 究 所 新 疆 乌 鲁 木 齐 8 3 0 0 9 1 摘 要 由 T Y L C V T o m a t o y e l l o w l e a f c u r l v i r u s 引 起 的 番 茄 黄 化 曲 叶 病 危 害 严 重 为 明 确 该 病 毒 在 新 疆 的 发 生 与 分 布 本 研 究 利 用 T Y L C V 特 异 引 物 对 采 集 自 新 疆 南 北 和 东 疆 温 室 及 露 地 的 2 2 9 株 表 现 黄 化 曲 叶 症 状 的 番 茄 样 品 通 过 P C R 检 测 其 带 毒 率 为 进 一 步 明 确 T Y L C V 传 毒 介 体 烟 粉 虱 的 隐 种 类 型 及 带 毒 情 况 利 用 烟 粉 虱 和 T Y L C V 特 异 引 物 对 番 茄 上 采 集 的 5 4 3 头 烟 粉 虱 进 行 了 M E D 和 M E A M 1 隐 种 及 带 毒 率 的 P C R 检 测 结 果 表 明 1 7 0 个 病 株 检 测 到 T Y L C V 病 株 带 毒 率 为 7 4 2 烟 粉 虱 M E D 隐 种 和 M E A M 1 隐 种 在 新 疆 均 有 分 布 检 出 率 分 别 为 8 2 7 和 1 7 3 说 明 M E D 隐 种 是 新 疆 烟 粉 虱 优 势 种 群 烟 粉 虱 M E D 隐 种 和 M E A M 1 隐 种 均 可 携 带 T Y L C V 带 毒 率 分 别 为 6 0 8 和 4 3 说 明 M E D 隐 种 带 毒 率 远 高 于 M E A M 1 隐 种 的 带 毒 率 本 研 究 明 确 了 T Y L C V 可 侵 染 新 疆 番 茄 且 在 温 室 及 露 地 番 茄 上 均 主 要 由 烟 粉 虱 优 势 种 群 M E D 隐 种 携 带 和 传 播 关 键 词 T Y L C V 烟 粉 虱 隐 种 检 测 中 图 分 类 号 S 4 3 6 4 1 2 文 献 标 志 码 A D i s t r i b u t i o n o f t o m a t o y e l l o w l e a f c u r l v i r u s T Y L C V f r o m t o m a t o e s a n d B e m i s i a t a b a c i i n X i n j i a n g H A N C ha ng 1 Z H A N G X i ng w a ng 1 G A O G uo l o n g 1 H A N She ng 2 D U Y e j ua n 1 1 A g r i c u l t u r a l C o l l e g e o f S h i h e z i U n i v e r s i t y K e y L a b o r a t o r y o f O a s i s A g r i c u l t u r a l P e s t M a n a g e m e n t a n d P l a n t P r o t e c t i o n R e s o u r c e s U t i l i z a t i o n X i n j i a n g U y g u r A u t o n o m o u s R e g i o n S h i h e z i X i n j i a n g 8 3 2 0 0 3 C h i n a 2 K e y L a b o r a t o r y o f C o m p r e h e n s i v e C o n t r o l o f H a r m f u l C r o p V e r m i n o f C h i n a N o r t h w e s t e r n O a s i s o f M i n i s t r y o f A g r i c u l t u r e R e s e a r c h I n s t i t u t e o f P l a n t P r o t e c t i o n X i n j i a n g A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s U r u m q i X i n j i a i n g 8 3 0 0 9 1 C h i n a A b s t r a c t T o m a t o y e l l o w l e a f c u r l d i s e a s e T Y L C D c a u s e d b y t o m a t o y e l l o w l e a f c u r l v i r u s T Y L C V h a d c a u s e d s e r i o u s d a m a g e t o t o m a t o p r o d u c t i o n T h i s r e s e a r c h a i m e d t o d e t e r m i n e t h e d i s t r i b u t i o n o f T Y L C V t h e o c c u r r e n c e o f c r y p t i c s p e c i e s o f B e m i s i a t a b a c i a n d t h e p r o p o r t i o n o f B t a b a c i c a r r y i n g T Y L C V i n X i n j i a n g T h e t o t a l o f 2 2 9 t o m a t o p l a n t s w i t h y e l l o w l e a f c u r l s y m p t o m s w h i c h w e r e c o l l e c t e d f r o m g r e e n h o u s e a n d f i e l d s i n d i f f e r e n t r e g i o n s o f X i n j i a n g w e r e d e t e c t e d b y P C R u s i n g s p e c i f i c p r i m e r s t h e t o t a l o f 5 4 3 B t a b a c i f r o m s a m e a r e a s w e r e d e t e c t e d b y P C R t o d e t e r m i n e M E D a n d M E A M 1 o f B t a b a c i a n d t h e p r o p o r t i o n o f t h e i r c a r r y i n g T Y L C V T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t T Y L C V w a s d e t e c t e d f r o m 1 7 0 t o m a t o p l a n t s t h e i n c i d e n c e o f T Y L C V w a s 7 4 2 T o d e t e r m i n e M E D a n d M E A M 1 o f B t a b a c i a n d t h e p r o p o r t i o n o f t h e i r c a r r y i n g T Y L C V M E D a n d M E A M 1 w a s 8 2 7 a n d 1 7 3 r e s p e c t i v e l y i n d i c a t i n g t h a t b o t h M E D a n d M E A M 1 o c c u r r e d i n X i n j i a n g a n d M E D w a s d o m i n a n t p o p u l a t i o n T Y L C V c a n b e c a r r i e d b y M E D a n d M E A M 1 t h e p r o p o r t i o n o f T Y L C V c a r r i e d b y M E D a n d M E A M 1 w a s 6 0 8 a n d 4 3 r e s p e c t i v e l y i n d i c a t i n g t h a t M E D i s m o r e c a p a b l e o f c a r r y i n g T Y L C V t h a n M E A M 1 T h e s t u d y c o n f i r m e d t h a t T Y L C V c o u l d i n f e c t e d t o m a t o i n X i n j i a n g T Y L C V w a s m a i n l y t r a n s m i t e d b y d o m i n a n t p o p u l a t i o n M E D i n g r e e n h o u s e a n d f i e l d s K e y w o r d s t o m a t o y e l l o w l e a f c u r l v i r u s B e m i s i a t a b a c i c r y p t i c s p e c i e s o f B e m i s i a t a b a c i d e t e c t i o n 番 茄 黄 化 曲 叶 病 T o m a t o y e l l o w l e a f c u r l d i s e a s e T Y L C D 是 影 响 番 茄 生 产 的 主 要 病 毒 病 害 该 病 害 可 第 2 期 韩 畅 等 新 疆 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 与 烟 粉 虱 隐 种 的 区 域 分 布 检 测 1 6 1 由 多 种 双 生 病 毒 G e m i n i v i r u s e s 引 起 1 其 中 尤 以 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 T o m a t o y e l l o w l e a f c u r l v i r u s T Y L C V 发 生 最 广 危 害 最 重 T Y L C V 侵 染 番 茄 后 表 现 为 植 株 矮 化 叶 片 上 卷 产 量 降 低 苗 期 感 染 时 可 造 成 绝 收 T Y L C V 属 于 双 生 病 毒 科 G e m i n i v i r i d a e 菜 豆 金 色 花 叶 病 毒 属 B e g o m o v i r u s 是 由 烟 粉 虱 B e m i s i a t a b a c i 传 播 的 单 链 D N A 病 毒 共 编 码 6 个 开 放 阅 读 框 架 O R F 单 个 基 因 组 D N A A 就 能 侵 染 致 病 2 烟 粉 虱 是 一 个 全 球 广 泛 分 布 的 包 含 3 0 多 个 隐 种 的 物 种 复 合 体 3 6 遗 传 结 构 十 分 复 杂 其 中 入 侵 性 很 强 的 B 型 和 Q 型 烟 粉 虱 分 别 属 于 M i d d l e E a s t A s i a M i n o r 1 M E A M 1 隐 种 和 M e d i t e r r a n e a n M E D 隐 种 7 目 前 在 许 多 入 侵 地 逐 渐 取 代 本 地 烟 粉 虱 4 王 晓 伟 等 8 研 究 表 明 这 可 能 与 入 侵 型 烟 粉 虱 分 泌 B t 5 6 的 能 力 明 显 强 于 本 地 烟 粉 虱 有 关 存 在 于 烟 粉 虱 唾 液 中 的 B t 5 6 蛋 白 不 仅 能 降 低 植 物 的 抵 抗 力 还 能 增 强 烟 粉 虱 的 存 活 和 繁 殖 力 在 过 去 的 2 0 多 年 里 随 着 烟 粉 虱 M E A M 1 和 M E D 隐 种 在 世 界 各 地 的 爆 发 T Y L C V 也 在 世 界 不 同 地 区 扩 展 发 生 并 造 成 番 茄 等 多 种 作 物 的 严 重 损 失 我 国 2 0 0 6 年 首 次 在 上 海 检 测 到 T Y L C V 9 随 后 几 年 迅 速 扩 展 至 山 东 北 京 新 疆等 地 1 0 1 1 目 前 已 在 全 国 3 1 个 省 市 番 茄 等 寄 主 上 发 生 刘 勇 等 1 2 于 2 0 1 3 2 0 1 7 年 对 全 国 采 集 的 6 5 3 3 份 番 茄 病 毒 病 样 品 进 行 检 测 结 果 表 明 T Y L C V 的 检 出 率 仅 次 于 C M V C u c u m b e r m o s a i c v i r u s T M V T o b a c c o m o s a i c v i r u s 和 T o M V T o m a t o m o s a i c v i r u s 已 给 我 国 番 茄 生 产 造 成 了 严 重 损 失 新 疆 地 域 广 阔 天 山 山 脉 横 贯 中 部 地 理 气 候 差 异 很 大 通 常 按 地 理 区 域 分 为 南 疆 北 疆 和 东 疆 20 11 年 底 在 南 疆 喀 什 地 区 莎 车 县 发 现 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 病 1 3 并 迅 速 扩 展 至 东 疆 的 吐 鲁 番 地 区 1 4 1 5 对 新 疆 设 施 农 业 和 番 茄 产 业 影 响 较 大 近 年 番 茄 黄 化 曲 叶 病 在 新 疆 不 断 扩 散 是 否 与 传 播 介 体 烟 粉 虱 的 优 势 种 群 分 布 动 态 发 生 变 化 有 关 本 研 究 通 过 分 子 检 测 明 确 其 在 北 疆 南 疆 昆 玉 市 和 东 疆 鄯 善 县 的 分 布 并 选 取 上 述 地 点 采 集 烟 粉 虱 进 行 隐 种 鉴 定 和 带 毒 检 测 旨 在 明 确 新 疆 番 茄 黄 化 曲 叶 病 的 发 生 与 烟 粉 虱 优 势 种 群 的 分 布 及 其 带 毒 率 的 相 关 性 从 而 为 其 有 效 防 控 提 供 依 据 1 材 料 与 方 法 1 1 样 品 采 集 供 试 番 茄 病 株 20 14 年 1 月 2 01 8 年 11 月 从 温 室 和 露 地 共 采 集 2 29 份 番 茄 黄 化 曲 叶 病 疑 似 病 株 用 于 T Y L C V 检 测 其 中 南 疆 41 份 东 疆 3 8 份 北 疆 15 0 份 表 1 病 株 均 表 现 黄 化 曲 叶 等 症 状 置 70 冰 箱 保 存 备 用 供 试 烟 粉 虱 从 上 述 温 室 和 露 地 番 茄 疑 似 病 株 上 同时 采集 5 4 3 头烟 粉虱 用 于隐 种和 带毒 检 测 其中 南 疆 昆 玉 市 1 4 2 头 东 疆 鄯 善 县 1 3 5 头 北 疆 克 拉 玛 依 市 石 河 子 市 乌 鲁 木 齐 市 2 6 6 头 表 1 表 1 番 茄 及 烟 粉 虱 样 品 采 集 信 息 采 集 地 点 番 茄 样 品 数 量 个 烟 粉 虱 虫 口 数 个 生 境 采 集 时 间 南 疆 昆 玉 市 4 1 1 4 2 温 室 2 0 1 8 年 1 1 月 东 疆 鄯 善 县 3 8 1 3 5 温 室 2 0 1 4 年 1 月 北 疆 克 拉 玛 依 市 5 0 1 2 0 温 室 2 0 1 5 年 7 月 克 拉 玛 依 市 9 0 5 4 露 地 2 0 1 5 年 7 月 9 日 石 河 子 市 7 7 2 露 地 2 0 1 8 年 7 月 乌 鲁 木 齐 市 3 2 0 露 地 2 0 1 8 年 1 0 月 1 2 供 试 菌 株 及 试 剂 盒 E c o l i D H 5 菌 株 用 于 T Y L C V 及 烟 粉 虱 检 测 的 阳 性 对 照 质 粒 由 石 河 子 大 学 植 物 病 理 学 教 研 室 提 供 植 物 D N A 提 取 试 剂 盒 P l a nt D N A I s o l a t i o n R e a g e nt 购 自 T A K A R A 宝 生 物 工 程 大 连 有 限 公 司 单 头 烟 粉 D N A 提 取 试 剂 盒 D N e a s y B l o o d P C R 扩 增 T a q P C R M a s t e r M i x 试 剂 盒 D N A 纯 化 回 收 U ni v e r s a l D N A P ur i f i c a t i o n K i t 试 剂 盒 购 自 T I A N G E N 生 化 科 技 有 限 公 司 1 3 用 于 T Y C L V 和 烟 粉 虱 检 测 的 引 物 特 异 性 引 物 T Y L C V F T Y L C V R 1 6 用 于 T Y L C V 的 检 测 通 用 引 物 C 1 J 2 1 95 T L 2 N 2 819 1 7 及 Q F Q R B F B R 1 8 分 别 用 于 烟 粉 虱 及 M E D 和 M E A M 1 隐 种 的 检 测 表 2 表 2 用 于 检 测 T Y C L V 和 烟 粉 虱 的 引 物 引 物 引 物 序 列 5 3 长 度 b p T Y L C V F A C G C A T G C C T C T A A T C C A G T G T A 5 4 0 T Y L C V R C C A A T A A G G C G T A A G C G T G T A G A C C 1 J 2 1 9 5 T T G A T T T T T T G G T C A T C C A G A A G T 8 4 0 L 2 N 3 0 1 4 T C C A A T G C A C T A A T C T G C C A T A T T A Q F C T T G G T A A C T C T T C T G T A G A T G T G T G T T 3 0 0 Q R C C T T C C C G C A G A A G A A A T T T T G T T C B F C T A G G G T T T A T T G T T T G A G G T C A T C A T A T A T T C 4 8 0 B R A A T A T C G A C G A G G C A T T C C C C C T 1 4 番 茄 病 株 T Y L C V 的 P C R 检 测 提 取 番 茄 植 物 总 D N A 参 照 T A K A R A 公 司 的 P l a nt D N A I s o l a t i o n R e a g e n t 试 剂 盒 说 明 利 用 T Y L C V 的 特 异 性 引 物 T Y L C V F 和 T Y L C V R 进 行 P C R 扩 增 以 实 验 室 保 存 的 含 T Y L C V 基 因 组 的 质 1 6 2 石 河 子 大 学 学 报 自 然 科 学 版 第 3 8 卷 粒 为 阳 性 对 照 对 供 试 番 茄 病 株 进 行 T Y L C V 带 毒 检 测 P C R 反 应 体 系 总 体 积 为 25 L 为 12 5 L 2 P C R M i x 1 L D N A 模 板 1 0 m o l L 上 下 游 引 物 各 1 L 加 d dH 2 O 补 足 2 5 L 反 应 程 序 为 94 预 变 性 3 m i n 94 变 性 30 s 5 0 退 火 30 s 72 延 伸 1 3 m i n 循 环 5 次 94 变 性 3 0 s 5 5 退 火 30 s 72 延 伸 1 3 m i n 循 环 3 0 次 72 延 伸 10 m i n 4 终 止 反 应 反 应 产 物 经 1 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 后 在 紫 外 灯 下 观 察 结 果 1 5 烟 粉 虱 M E D 隐 种 和 M E A M 1 隐 种 的 P C R 检 测 提 取 单 头 烟 粉 虱 总 D N A 参 考 Q I A G E N 公 司 的 D N e a s y B l o o d 确 定 为 烟 粉 虱 的 样 品 再 分 别 利 用 M E D 隐 种 的 特 异 性 引 物 Q F 和 Q R M E A M 1 隐 种 的 特 异 引 物 B F 和 B R 进 行 扩 增 以 实 验 室 保 存 的 质 粒 为 阳 性 对 照 对 烟 粉 虱 隐 种 进 行 检 测 P C R 反 应 体 系 同 1 4 利 用 烟 粉 虱 通 用 引 物 进 行 P C R 扩 增 反 应 程 序 为 9 4 预 变 性 3 m i n 9 4 变 性 30 s 5 2 退 火 30 s 72 延 伸 1 m i n 35 个 循 环 72 延 伸 1 0 m i n 4 终 止 反 应 利 用 隐 种 特 异 引 物 进 行 P C R 扩 增 的 反 应 程 序 是 9 4 预 变 性 3 m i n 9 4 变 性 3 0 s 64 退 火 1 m i n 72 延 伸 1 m i n 3 0 个 循 环 7 2 延 伸 10 m i n 4 终 止 反 应 反 应 产 物 经 1 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 后 在 紫 外 灯 下 观 察 结 果 并 回 收 纯 化 目 标 条 带 1 6 烟 粉 虱 携 带 T Y L C V 的 P C R 检 测 对 上 述 检 测 为 不 同 隐 种 的 烟 粉 虱 再 利 用 T Y L C V 的 特 异 性 引 物 T Y L C V F 和 T Y L C V R 分 别 进 行 带 毒 检 测 以 实 验 室 保 存 的 含 T Y L C V 基 因 组 的 质 粒 为 阳 性 对 照 P C R 反 应 体 系 及 反 应 程 序 同 1 4 2 结 果 与 分 析 2 1 番 茄 黄 化 曲 叶 病 病 株 症 状 新 疆 温 室 及 露 地 番 茄 上 发 生 的 黄 化 曲 叶 病 的 症 状 主 要 表 现 为 植 株 节 间 变 短 矮 化 图 1 A 叶 片 变 小 变 厚 质 感 脆 硬 并 向 上 卷 曲 黄 化 部 分 品 种 后 期 叶 脉 呈 紫 色 图 1 B 苗 期 受 害 则 花 少 或 不 开 花 全 株 坐 果 很 少 果 实 小 而 畸 形 严 重 时 不 结 果 图 1 C D A 苗 期 危 害 状 B 叶 脉 变 紫 C 温 室 番 茄 受 害 症 状 D T Y L C V 危 害 症 状 图 1 番 茄 黄 化 曲 叶 病 症 状 2 2 番 茄 T Y L C V 带 毒 率 的 分 子 检 测 利 用 T Y L C V 的 特 异 性 引 物 T Y L C V F 和 T Y L C V R 对 采 集 自 新 疆 不 同 区 域 的 2 29 份 番 茄 样 品 进 行 P C R 扩 增 170 份 样 品 扩 增 到 与 阳 性 对 照 一 致 的 54 0 b p 的 目 标 片 段 图 2 表 明 这 些 番 茄 样 品 受 到 T Y L C V 侵 染 带 毒 率 达 7 4 2 M D N A 分 子 量 标 准 1 阳 性 性 对 照 2 阴 性 对 照 3 2 3 为 番 茄 样 品 图 2 T Y L C V F T Y L C V R 引 物 对 不 同 番 茄 样 品 的 P C R 检 测 温 室 采 集 的 129 份 样 品 中 1 07 份 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 82 9 其 中 采 集 自 南 疆 昆 玉 市 温 室 41 份 样 品 均 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 10 0 采 集 自 东 疆 鄯 善 县 温 室 3 8 份 样 品 18 份 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 47 4 采 集 自 北 疆 克 拉 玛 依 市 温 室 5 0 份 样 品 中 48 份 带 毒 带 毒 率 高 达 96 表 3 露 地 采 集 的 10 0 份 样 品 中 63 份 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 63 0 其 中 采 集 自 克 拉 玛 依 的 9 0 份 样 品 60 份 检 测 到 病 毒 带 毒 率 66 7 采 集 自 乌 鲁 木 齐 露 地 的 3 份 样 品 均 检 测 到 病 毒 带 毒 率 100 采 集 自 石 河 子 露 地 的 7 份 番 茄 均 未 检 测 到 病 毒 表 3 第 2 期 韩 畅 等 新 疆 番 茄 黄 化 曲 叶 病 毒 与 烟 粉 虱 隐 种 的 区 域 分 布 检 测 1 6 3 表 3 新 疆 番 茄 T Y L C V 的 带 毒 率 检 测 采 集 地 点 生 境 样 品 数 量 个 带 毒 数 个 带 毒 率 南 疆 昆 玉 市 温 室 4 1 4 1 1 0 0 东 疆 鄯 善 县 温 室 3 8 1 8 4 7 4 北 疆 克 拉 玛 依 市 温 室 5 0 4 8 9 6 克 拉 玛 依 市 露 地 9 0 6 0 6 6 7 石 河 子 市 露 地 7 0 0 乌 鲁 木 齐 市 露 地 3 3 1 0 0 2 3 烟 粉 虱 隐 种 的 鉴 定 利 用 烟 粉 虱 m t D N A C O I 基 因 片 段 通 用 引 物 C 1 J 2 1 9 5 和 L 2 N 3 0 1 4 对 采 集 自 新 疆 不 同 区 域 的 5 43 头 粉 虱 的 D N A 分 别 进 行 P C R 扩 增 结 果 显 示 5 43 头 粉 虱 均 扩 增 到 与 阳 性 对 照 一 致 的 约 840 b p 的 目 标 条 带 图 3 表 明 这 些 粉 虱 均 为 烟 粉 虱 B e m i s i a t ab a c i 进 一 步 利 用 M E D 隐 种 特 异 性 引 物 Q F 和 Q R M E A M 1 隐 种 的 特 异 引 物 B F 和 B R 分 别 对 54 3 头 烟 粉 虱 进 行 隐 种 检 测 结 果 显 示 44 9 头 可 由 引 物 Q F 和 Q R 扩 增 到 约 300 bp 的 目 标 条 带 却 不 能 由 引 物 B F 和 B R 扩 增 到 任 何 目 标 条 带 表 明 44 9 头 烟 粉 虱 为 M E D 隐 种 占 供 试 烟 粉 虱 的 82 7 9 4 头 烟 粉 虱 可 由 引 物 B F 和 B R 扩 增 到 约 48 0 b p 的 目 标 条 带 不 能 由 引 物 Q F 和 Q R 扩 增 到 任 何 目 标 条 带 表 明 这 9 4 头 烟 粉 虱 为 M E A M 1 隐 种 占 供 试 烟 粉 虱 的 17 3 图 4 从 烟 粉 虱 来 源 看 温 室 采 集 的 39 7 头 烟 粉 虱 中 37 5 头 为 M E D 隐 种 占 94 5 22 头 为 M E A M 1 隐 M D N A 分 子 量 标 准 1 阴 性 对 照 2 阳 性 对 照 3 8 为 烟 粉 虱 样 品 图 3 基 于 m t D N A C O I 基 因 的 烟 粉 虱 检 测 M D N A 分 子 量 标 准 1 2 为 M E A M 1 和 M E D 隐 种 阳 性 对 照 3 4 为 M E A M 1 和 M E D 隐 种 阴 性 对 照 5 2 4 为 烟 粉 虱 样 品 图 4 烟 粉 虱 M E D 和 M E A M 1 隐 种 的 P C R 检 测 种 占 5 5 其 中 南 疆 昆 玉 市 采 集 的 1 4 2 头 烟 粉 虱 中 141 头 为 M E D 隐 种 占 99 3 1 头 为 M E A M 1 隐 种 占 0 7 东 疆 鄯 善 县 采 集 的 1 35 头 烟 粉 虱 中 11 6 头 为 M E D 隐 种 占 8 5 9 19 头 为 M E A M 1 隐 种 占 14 1 北 疆 克 拉 玛 依 市 采 集 1 2 0 头 118 头 为 M E D 隐 种 占 98 3 2 头 为 M E A M 1 隐 种 占 1 7 表 4 表 明 新 疆 温 室 番 茄 上 的 烟 粉 虱 虽 有 M E A M 1 隐 种 发 生 但 是 主 要 以 M E D 隐 种 为 优 势 隐 种 露 地 采 集 的 14 6 头 烟 粉 虱 中 74 头 为 M E D 隐 种 占 50 7 72 头 为 M E A M 1 隐 种 占 4 9 3 其 中 克 拉 玛 依 市 采 集 的 5 4 头 乌 鲁 木 齐 市 采 集 的 20 头 烟 粉 虱 均 为 M E D 隐 种 石 河 子 市 采 集 的 72 头 烟 粉 虱 均 为 M E A M 1 隐 种 表 4 表 明 北 疆 露 地 番 茄 上 的 烟 粉 虱 的 优 势 隐 种 在 不 同 地 区 之 间 存 在 明 显 差 异 表 4 新 疆 烟 粉 虱 隐 种 分 布 检 测 采 集 地 点 生 境 烟 粉 虱 样 品 数 个 M E D M E A M 1 虫 口 数 个 检 出 率 虫 口 数 检 出 率 南 疆 昆 玉 市 温 室 1 4 2 1 4 1 9 9 3 1 0 7 东 疆 鄯 善 县 温 室 1 3 5 1 1 6 8 5 9 1 9 1 4 1 北 疆 克 拉 玛 依 市 温 室 1 2 0 1 1 8 9 8 3 2 1 7 克 拉 玛 依 市 露 地 5 4 5 4 1 0 0 0 0 石 河 子 市 露 地 7 2 0 0 7 2 1 0 0 乌 鲁 木 齐 市 露 地 2 0 2 0 1 0 0 0 0 2 4 烟 粉 虱 T Y L C V 带 毒 率 的 分 子 检 测 利 用 T Y L C V 特 异 性 引 物 T Y L C V F 和 T Y L C V R 对 所 有 烟 粉 虱 带 毒 率 进 行 检 测 结 果 显 示 从 2 个 隐 种 的 烟 粉 虱 上 均 能 扩 增 到 与 阳 性 对 照 一 致 的 54 0 b p 的 目 标 片 段 图 5 表 明 烟 粉 虱 的 2 个 隐 种 均 能 携 带 T Y L C V 对 不 同 隐 种 的 带 毒 率 的 统 计 结 果 显 示 44 9 头 M E D 隐 种 中 273 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 6 0 8 94 头 M E A M 1 隐 种 中 4 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 4 3 表 明 M E D 隐 种 带 毒 率 远 远 高 于 M E A M 1 隐 种 的 带 毒 率 对 烟 粉 虱 带 毒 情 况 的 分 析 结 果 显 示 温 室 采 集 的 375 头 M E D 隐 种 中 2 3 6 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 62 9 22 头 M E A M 1 隐 种 中 4 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 18 2 其 中 南 疆 昆 玉 市 采 集 的 141 头 M E D 隐 种 中 108 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 76 6 M E A M 1 隐 种 1 头 带 毒 带 毒 率 100 东 疆 鄯 善 县 采 集 的 1 6 4 石 河 子 大 学 学 报 自 然 科 学 版 第 3 8 卷 M D N A 分 子 量 标 准 1 阴 性 对 照 2 5 为 M E D 隐 种 烟 粉 虱 6 8 为 M E A M 1 隐 种 烟 粉 图 5 T Y L C V F T Y L C V R 引 物 对 烟 粉 虱 的 P C R 检 测 11 6 头 M E D 隐 种 中 80 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 68 9 1 9 头 M E A M 1 隐 种 中 3 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 15 8 北 疆 克 拉 玛 依 市 采 集 的 1 1 8 头 M E D 隐 种 中 4 8 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 40 7 2 头 M E A M 1 隐 种 未 检 测 到 病 毒 结 果 表 明 温 室 中 发 生 的 烟 粉 虱 2 个 隐 种 都 能 传 播 T Y L C V 但 主 要 以 M E D 隐 种 传 播 为 主 露 地 采 集 的 74 头 M E D 隐 种 烟 粉 虱 中 37 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 50 0 72 头 M E A M 1 隐 种 均 未 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 0 其 中 北 疆 克 拉 玛 依 市 54 头 M E D 隐 种 中 3 1 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 为 57 4 乌 鲁 木 齐 市 20 头 M E D 隐 种 中 6 头 检 测 到 病 毒 带 毒 率 3 0 0 石 河 子 市 采 集 的 7 2 头 M E A M 1 隐 种 均 不 带 毒 表 5 结 果 表 明