木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果.pdf

浙江农业学报Acta Agriculturae Zhejiangensis 6 z ny b cn 朱森林 王丹媚 唐秀梅 等 木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果 J 浙江农业学报 6 DO 6 issn 6 收稿日期 6 基金项目 国家自然科学基金 6 浙江省公益研究计划 GN C 6 GN C 作者简介 朱森林 6 男 浙江义乌人 学士 讲师 主要从事植物生理与食品营养研究 m i z usen in6 6 com 通信作者 罗军 m i qq com 木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果 朱森林 王丹媚 唐秀梅 陈 瑞 杨 蓉 徐月妹 金璐懿 任晴雯 刘 鹏 罗 军 金华职业技术学院农业与生物工程学院 浙江金华 浙江师范大学植物学实验室 浙江金华 广西壮族自治区 农业科学院经济作物研究所 广西南宁 摘 要 为提高木霉水分散粒剂的产量 并探明木霉水分散粒剂对黄瓜枯萎病的防治效果 本研究对菌株的 培养条件进行优化 结果表明 在本研究范围内 哈茨木霉 水分散粒剂中助剂的最佳配方 质量分数 为 炭黑 磷酸钾 羧甲基纤维素 可溶性淀粉 硅藻土 和木质素磺酸钠 深绿木霉 水分散粒剂中助剂的最佳配方 质量分数 为 炭黑 羧甲基纤维素钠 聚乙烯基吡咯烷酮 P P 可溶性淀粉 高岭土 和木质素磺酸钠 以黄瓜品种津研 号为试验材料 探究深绿木 霉 Trichoderma atroviride 和哈茨木霉 Trichoderma harzianum 对感染尖孢镰刀菌 Fusarium oxysporum 黄瓜 生理特性的影响 以仅接种病原菌的处理组作为对照 种木霉菌与黄瓜枯萎病原菌同时接种或单一接种均 可以显著提高黄瓜抗氧化酶活性 脯氨酸含量和叶绿素含量 均可以显著降低丙二醛含量 种木霉水分散 粒剂与黄瓜枯萎病菌共同接种的防治效果均达到了治理黄瓜枯萎病的目的 其中 深绿木霉的防效最佳 关键词 黄瓜枯萎病 木霉菌 水分散粒剂 生物防治 中图分类号 S 6 文献标志码 文章编号 6 Optimization of culture conditions of Trichoderma water dispersing granule and its biocontrol effects on cucumber fusarium wilt Z U Sen in W NG D nmei T NG Xiumei C N Rui Y NG Rong XU Yuemei J N uyi R N Qing en U Peng UO Jun Agricultural and Bioengineering Institute Jinhua Polytechnic Jinhua 321007 China Key Laboratory of Bot any Zhejiang Normal University Jinhua 321004 China Cash Crops Research Institute Guangxi Academy of Agricultural Sciences Nanning 530007 China Abstract n o de o im ove e yie d o Trichoderma e dis e sing g nu e nd s udy e biocon o e ec s o Trichoderma e dis e sing g nu e on Cucumbe Fus ium i e nu i ion condi ions o e s in e e o i mized T e esu s s o ed i in e sco e o is s udy e bes o mu ion m ss c ion o e d uv n in e e dis e sib e g nu e o Trichoderma harzianum s c bon b ck PO c bo yme y ce u ose so ub e s c i o i nd sodium ignosu on e T e o imum o mu ion m ss c ion o e d uv n in e e dis e sib e g nu e o Trichoderma viride s c bon b ck C C N P P so ub e s c k o in nd sodium ignosu on e ec s o Trichoderma atrovide nd Trichoderma harzianum on e ysio ogic c c e is ics o cucumbe Jiny n in ec ed i Fusarium oxyspo rum e e s udied Com ed i e e men g ou on y inocu ed i ogens bo Trichoderma nd Fusari um i ogens inocu ed e s me ime o sing e inocu ion cou d signi ic n y im ove e c ivi ies o n io id n enzymes o ine con en nd c o o y con en o cucumbe nd educe D con en Bo Trichoderma s ecies e dis e sing g nu e s o ed good biocon o e ec s nd e ec o Trichoderma atrovide s be e Key words cucumbe us ium i Trichoderma e dis e sib e g nu e bio ogy con o 黄瓜 Cucumis sativus 是葫芦科 Cucu bi ce e 黄瓜属 Cueumis 植物 具有较高的经济 医药与营养价值 黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀 菌 Fusarium oxysporum 引起的一种严重真菌土 传病害 目前的防控措施多样 但效果均不 够理想 存在药剂持效期短 易残留 破坏土壤微 生物区系和污染环境等一系列问题 因此 开展 生物防治显得尤为重要 木霉菌 Trichoderma 是一类环境友好型生防真菌 其适应范围广 生 长繁殖速度快 可用来防治部分植物土传病 害 因此 探讨木霉水分散粒剂对黄瓜枯萎病 的防治效果 对黄瓜的安全生产和土传病害的生 物防治具有重要意义 国内外的许多关于木霉 菌剂的报道指出 木霉菌不仅能够拮抗土壤中多 数病原真菌 而且可以显著优化植株品质 也 有研究表明 添加木霉菌可以提高根际不同微生 物的相对丰度和多样性 其对土著微生物群落的 调控过程同样有助于拮抗土传病原真菌 6 如茶 树病害 等 且有利于土壤养分改善和植物生 长 牛鑫斌等 明确提出长枝木霉 Tri choderma longibrachiatum T6水分散粒剂对黄瓜 白粉病 黄瓜立枯病 Cucumbe d m ing o dis e se 和油菜 Brassica napus 根腐病 oo o 均具有较好的应用成效 木霉菌制剂现已开始 在市面上流通 如美国的To s ie d 哈茨木霉 T 和以色列的T ic ode 哈茨木霉T 以 及日本的防治烟草白绢病木霉菌剂 浙江大学 等研制的木霉菌制剂对根腐病的防效达到 增产幅度为 目前虽然已经开展 了木霉菌株对黄瓜枯萎病的拮抗作用相关研 究 6 但目前对木霉制剂的探究以可湿性粉 剂为主 关于木霉水分散粒剂对黄瓜枯萎病 的防治效果还未见报道 本研究通过测定相关 生理指标 以探讨木霉水分散粒剂的促生防病效 果 揭示木霉水分散粒剂的最优固体基质比例和 母药助剂的最佳配比 研制出应用效果良好的水 分散粒剂 为后期木霉菌剂的开发应用提供科学 依据 为黄瓜设施优质栽培奠定基础 材料与方法 试验材料 供试黄瓜品种为津研 号 种子由河北省沧 州市百盛种业有限公司提供 供试培养基为马 铃薯葡萄糖琼脂培养基 PD 供试菌株来自 于中国农业微生物菌种保藏管理中心的深绿木霉 Trichoderma atroviride菌株编号 CCC 哈 茨木霉 Trichoderma harzianum菌株编号 CCC 和尖孢镰刀菌 Fusarium oxysporum 菌株编号 CCC 木霉水分散粒剂的研制 主要参考 i by等 的方法 木霉固体培 养基基质的优化 设置草炭 蛭石 牛粪质量比分 别为 进行条件优化 木霉母药助剂的筛选 通过测定不同助剂条件下 木霉的产孢量 筛选出最佳紫外保护剂 稳定剂 黏结剂 崩解剂 载体和湿润剂及其比例 挤压造 粒 得到木霉水分散粒剂 试验方法 试验于 年 月至 年6月在金华职 业技术学院植物学实验室内进行 将黄瓜种子 置于烧杯中充分吸水 播种前取种子在 O 中浸泡 min进行表面消毒 然后用蒸馏 水洗净药液 在 条件下水浴浸种 浸种时不 断搅拌 持续 min 使种子吸水膨胀 供给种子 萌发所需基本水量 并起到种子表面消毒的作 用 取出后于 恒温箱中黑暗催芽 当黄瓜 苗长出 个真叶时 选取生长健壮 长势一致 的黄瓜幼苗 栽培于学校植物学实验室 接种 前 用质量体积分数为 的高锰酸钾溶液对所 浙江农业学报 第 卷 第6期 用花盆进行消毒 试验设 个处理 接种哈茨木 霉水分散粒剂 T 接种深绿木霉水分散粒剂 T 接种哈茨木霉水分散粒剂和尖孢镰刀菌 T B 接种深绿木霉水分散粒剂和尖孢镰刀菌 T B 接种尖孢镰刀菌 B 接种多菌灵和尖孢 镰刀菌 CB 无菌水对照组 P 接种处理采用 层施法 施接种菌剂 g 盆 每处理重复 次 每盆种植黄瓜幼苗 株 每处理共种植黄瓜 株 指标测定方法 在试验进行的第 和 天 用打孔器取 相同质量的幼苗中上部叶片作为样品 将采集的 样品放入液氮中保存 进行相关生理指标的测 定 叶绿素含量测定采用丙酮乙醇法 用硫 代巴比妥酸法检测丙二醛 D 含量 茚三 酮显色法测定脯氨酸含量 NBT光化还原法 测定超氧化物歧化酶 SOD 活性 愈创木酚 法测定过氧化物酶 POD 活性 紫外吸收法 测定过氧化氢酶 C T 活性 茚三酮显色法 测定游离脯氨酸的含量 从黄瓜植株出现第 株病株开始 每天调查 所有植株发病情况 进行病情指数统计 防治效 果参照张素平 的分级标准 病情指数参照宗 兆锋等 6 的标准 级 无症状 级 真叶 子叶 黄化或萎蔫面积不超过总面积的 级 真 叶 子叶黄化或萎蔫面积超过总面积的 级 叶片萎蔫或枯死 仅生长点存活 级 全株严 重萎蔫 以致枯死 病情指数 病级株 数 代表级数 植株总数 最高代表级值 防治效果 对照病情指数 处理 病情指数 对照病情指数 数据处理 利用SPSS 对数据进行统计 通过单因 素方差分析和Dunc n法计算平均值和标准误 分析差异显著性 使用O igin 软 件绘制图表 图表中数据为平均值 标准误 结果与分析 不同培养基质和母药助剂对木霉菌产孢量 的影响 由表 可知 在各种培养基质和母药助剂 中 种木霉的菌丝均能生长 但产孢量差异显 著 表明不同的培养基质 木霉菌母药助剂对哈 茨木霉 和深绿木霉 菌丝生长的影响 不同 草炭 牛粪 蛭石质量比为 的培养基 中 种木霉菌的产孢量最大 添加炭黑紫外保 护剂使 种木霉菌产孢量显著高于其余各组 说 明炭黑能有效抵御紫外线对木霉的伤害 提高木 霉水分散粒剂的利用效率 磷酸钾 羧甲基纤维 素分别是哈茨木霉 的最佳稳定剂和黏结 剂 而深绿木霉 则在添加羧甲基纤维素 钠 P P条件下最稳定 可溶性淀粉作为崩解剂 时 种木霉菌的产孢量都显著高于对照 说明 种崩解剂都与木霉菌有较好的相容性 凹凸棒 土为载体时 种木霉菌产孢水平均较低于对照 组 说明凹凸棒土对木霉菌生长存在抑制作用 硅藻土为载体时 哈茨木霉产孢量最大 显著大 于其他处理 高岭土为载体时 深绿木霉产孢量 最大 显著大于其他处理 湿润剂中木质素磺酸 钠对木霉菌有较好地保护作用 而十二烷基硫酸 钠和十二烷基苯磺酸钠的保护作用不明显 对哈茨木霉 深绿木霉 水分散 粒剂的相关指标和贮存稳定性进行筛选 最终确 定哈茨木霉 水分散粒剂中助剂的最佳配 方 质量分数 为 炭黑 磷酸钾 羧甲 基纤维素 可溶性淀粉 硅藻土 和木 质素磺酸钠 该配方水分散粒剂的孢子含量 为6 g 6 水分含量 湿润时间 s 颗粒强度强 各项检测结果均符合国家标 准 最终确定深绿木霉 水分散粒剂中助 剂的最佳配方 质量分数 为 炭黑 羧甲 基纤维素钠 聚乙烯基吡咯烷酮 P P 可溶性淀粉 高岭土 和木质素磺酸钠 该配方水分散粒剂的孢子含量为 6 g 6 水分含量 湿润时间 s 颗粒强度较弱 各项检测结果均符合国家标准 木霉水分散粒剂对黄瓜抗氧化酶系统的影响 在受到病原菌侵害时 植物体内会产生过量 的活性氧 对植物产生危害 抗氧化系统可以 减少活性氧积累和逆境条件下的氧化损伤 由 图 得出 接种木霉水分散粒剂后 黄瓜叶片 SOD POD和C T活性较P处理有显著提高 不 同木霉水分散粒剂对抗氧化酶活性的调节程度存 朱森林 等 木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果 表1 不同培养基质和母药助剂对 种木霉菌产孢量的影响 Table 1 ec s o di e en cu u e medium nd mo e medicine ddi ive on s o u ion yie d o o Trichoderma s s ins 处理 T e men g ou 哈茨木霉 产孢量 Trichoderma harzianum S o u ion 6 g 深绿木霉 产孢量 Trichoderma atroviride s o u ion g 培养基质 草炭 牛粪 蛭石质量比 Cu u e medium m ss io o e 6 b b co dung nd ve micu i e c c d d C d 66 66 d 紫外保护剂炭黑C bon b ck 66 6 6 U o ec ion gen 环糊精 cyc ode in 6 6 b 6 b 抗坏血酸 sco bic cid 666 bc d 羧甲基纤维素C bo yme y ce u ose 66 66 c c C c d 稳定剂S bi ize 碳酸钙C CO d d 磷酸钾 PO b 羧甲基纤维素钠C C N b 磷酸氢二钾 PO c c C d 66 d 粘结剂Binde 淀粉S c 6 6 d b 羧甲基纤维素C bo yme y ce u ose d P P 6 6 c P b b C d c 崩解剂Disin eg n 可溶性淀粉So ub e s c 硫酸钠N SO 666 b 666 bc 尿素U e bc b 硫酸铵 N SO c 66 c C 666 c bc 载体C ie 凹凸棒土 u gi e 666 c c 石英砂Qu z s nd 666 b 666 bc 高岭土 o in b 666 硅藻土T i o i b C 666 c 6 b 湿润剂We ing gen 木质素磺酸钠Sodium ignosu on e 十二烷基硫酸钠Sodium dodecy su e 66 b 6 66 b 十二烷基苯磺酸钠SDBS 666 c 66 66 c C 66 6 b c 同列数据后无相同小写字母表示差异显著 P D m ked i ou e s me o e c se e e in e c co umn indic ed signi ic n di e ences P 在差异 处理 和 d T B处理的黄瓜叶片 SOD POD和C T活性均低于T B处理 由此可 见 接种木霉水分散粒剂可提高黄瓜叶片的抗氧 化酶活性 且其对黄瓜叶片抗氧化酶活性的影响 存在品种间差异 深绿木霉作用效果更佳 木霉水分散粒剂对黄瓜 D 和脯氨酸含 量的影响 由图 可以看出 T T 处理的黄瓜叶片 D 含量均显著低于P处理 差值最大可达P 处理的 和 T T 处理之间差异 不显著 深绿木霉水分散粒剂或多菌灵和病原 菌同时施用有利于减缓黄瓜叶片 D 含量的累 积 B处理的叶片 D 含量最高 T B T B和 CB处理的 D 含量均显著低于B处理 T B处 理的 D 含量最低 较B处理最大降幅分别达 66 T B处理与CB处理 无显著差异 由此可以得出 接种木霉水分散粒 剂可有限缓解黄瓜叶片中 D 的积累 减少活性 浙江农业学报 第 卷 第6期 数据以鲜质量计 柱上无相同小写字母表示差异显著 P T 接种哈茨木霉水分散粒剂 T 接种深绿木霉水分 散粒剂 T B 接种哈茨木霉水分散粒剂和尖孢镰刀菌 T B 接 种深绿木霉水分散粒剂和尖孢镰刀菌 B 接种尖孢镰刀菌 CB 接种多菌灵和尖孢镰刀菌 P 无菌水对照组 下同 D s de ec ed b sed on es eig D on e b s m ked i ou e s me o e c se e e indic ed signi ic n di e ences P T nocu ed i Trichoderma harzianum e dis e sing g nu e T nocu ed i Trichoderma atroviride e dis e sing g nu e T B nocu ed i Trichoderma harzianum e dis e sing g nu e nd Fusarium oxysporum T B nocu ed i Trichoderma atroviride e dis e sing g nu e nd Fusar ium oxysporum B nocu e i Fusarium oxysporum CB noc u ed i c bend zim nd Fusarium oxysporum P Con o g ou inocu ed i s e i e e T e s me s be o 图1 木霉水分散粒剂对黄瓜抗氧化酶系统的影响 Fig 1 ec s o Trichoderma e dis e sing g nu e on n io id n enzyme sys em o Cucumis sativus 图2 木霉水分散粒剂对黄瓜 D 和脯氨酸含量 的影响 Fig 2 ec s o Trichoderma e dis e sing g nu e on D nd o ine con en o Cucumis sativus 氧自由基生成量 减轻膜脂过氧化程度 脯氨酸是植物蛋白质的组分之一 以游离状 态广泛存在于植物体中 是植物体内的一种重要 抗逆境调节物 由图 可见 较P处理而言 B处理脯氨酸含量显著下降 在 d降幅 分别达 6 T B和T B处 理的叶片脯氨酸含量分别比B处理最大提高了 6 说明木霉水分散粒剂对尖孢 镰刀菌有抑制作用 接种深绿木霉水分散粒剂 T B 比接种哈茨木霉水分散粒剂 T B 效果 更佳 木霉水分散粒剂对黄瓜叶绿素含量的影响 叶绿素含量可直接反映植物光合作用的情 况 由图 可知 T 处理叶片叶绿素含量最 高 在试验后期 处理 d 显著高于T T B 和T B处理 处理 d T B处理叶绿素含量显 著高于T B和CB处理 处理不同时间 T B处 理叶绿素含量均显著高于B处理 处理 d T B 朱森林 等 木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果 图3 木霉水分散粒剂对黄瓜叶绿素含量的影响 Fig 3 ec s o Trichoderma e dis e sing g nu e on c o o y con en o Cucumis sativus 处理比B处理叶绿素含量高6 6 处理 d T B处理比P处理叶绿素含量高 可见 不同木霉水分散粒剂对染病幼苗叶绿素含量的 影响存在差异 但 种木霉水分散粒剂均可提高 黄瓜叶片的叶绿素含量 木霉水分散粒剂对黄瓜枯萎病病情指数和 防治效果的影响 由图 可知 木霉水分散粒剂处理组 T B T B 和施加多菌灵组 CB 的病情指数分别为 和 6 6 显著低于尖孢镰刀菌处理 组 B 且施加深绿木霉水分散粒剂组的黄瓜发 病程度最低 从防治效果看 接种病害 d后 图4 木霉水分散粒剂对黄瓜病情指数和防治效果 的影响 Fig 4 ec s o Trichoderma e dis e sing g nu e on dise se inde nd con o e ec o Cucumis sativus T B的防效显著高于T B处理 与多菌灵处理组 CB 差异不显著 而T B的防效也与多菌灵处 理 CB 组差异不显著 可见 深绿木霉水分散 粒剂组的防效较哈茨木霉水分散粒剂好 讨论 木霉菌作为一类环境友好型生防真菌 对多 种植物病原菌有拮抗作用 有研究表明 其 通过调节黄瓜体内抗氧化酶活性 生物膜过氧化 程度和脯氨酸含量等 对植物体内因逆境胁迫而 产生的大量氧自由基进行清除 防止活性氧 ROS 诱导细胞损伤 本研究显示 在受尖 孢镰刀菌侵害初期 黄瓜体内SOD POD和C T 活性上升 D 含量降低 中后期则呈相反趋势 而木霉水分散粒剂处理组可以明显提高SOD POD和C T活性 由此推测 种木霉水分散粒剂 可以率先激活SOD POD和C T活性 并有效缓 解 D 的积累 激活植物本身的防御系统 减轻 生物膜抗氧化程度 增强植物抵抗病原菌侵害的 能力 脯氨酸能保持植物原生质体与环境的渗 透平衡 黄瓜脯氨酸含量在木霉水分散粒剂 灌根后显著提高 并随着处理时间的延长而缓慢 上升 由此可见 木霉水分散粒剂能提高黄瓜的 抗逆性 进而减轻尖孢镰刀菌对其的危害 本研 究中 木霉水分散粒剂明显促进了黄瓜叶片叶绿 素的合成 提高了植物的光合能力 这与姜传英 等 揭示的棘孢木霉可有效提高植物叶绿素含 量的结论相一致 深绿木霉水分散粒剂的防效 超过传统的化学药剂 高达 表现出良好 的治病能力 辛鑫等 研究表明 绿色木霉 6 对香蕉枯萎病有显著抑制作用 与本研究中木 霉水分散粒剂对黄瓜枯萎病防效结果相似 综 上所述 在木霉水分散粒剂作用下 黄瓜的抗氧 化酶活性 脯氨酸和叶绿素含量显著提高 D 含量降低 有利于缓解黄瓜枯萎病对植株造成的 伤害 表明木霉水分散粒剂对该病有良好的防治 效用 木霉菌对植物病原菌的拮抗存在多种机制 分别为竞争 重寄生和抗生作用 竞争作用 表现为对生长生存所需条件的竞争 木霉菌生长 迅速 生命力较强 在本实验中可能较尖孢镰刀 浙江农业学报 第 卷 第6期 菌更快占领空间 吸取养分 通过对多组木霉菌 基因组信息进行分析得出 重寄生是木霉最初的 生存模式 6 可清晰观察到从识别病原菌到寄 生的复杂过程 木霉菌对病原物最直接的生 防机制是重寄生作用 在这个过程中 木霉菌通 过产生大量真菌壁的降解酶来降解病原菌的细 胞壁 从而达到寄生和杀死病原菌的效果 与本 实验得出木霉水分散粒剂具有良好的防病成效 结果相一致 此外 土壤中的木霉菌对植物地上 部分发生的病害也有一定的防治效果 即木霉菌 的诱导抗性作用 Bigi im n 等 首次证明了 木霉菌具有诱导植物抗性的效果 木霉菌在植 物根部定殖 刺激植物产生胞壁沉积物 可不同 程度上阻止病原菌入侵 并增加植物体内与 防御有关酶的合成与积累 使植物产生防御反 应 本实验结果显示 接种木霉水分散粒剂 后 黄瓜抗氧化酶系活力显著提升 因此 推测 木霉水分散粒剂能增强黄瓜抗性的主要原因是 竞争 重寄生和诱导抗性等多种机制共作的 结果 环境因素对生物制剂的稳定性影响较大 且 药效也随之改变 其中 以孢子制剂为甚 选 择与木霉菌有较好相容性的各类母药助剂加入 木霉水分散粒剂中 可有效减小外界环境造成的 药效不稳定性 本研究的 种紫外保护剂中 炭黑作为紫外保护剂时 种木霉菌产孢量最高 磷酸钾作为稳定剂时对哈茨木霉孢子的相容 性最好 深绿木霉的最佳稳定剂为 羧甲基纤 维素钠 测定备选颗粒剂的粒度 堆密度 松密 度 从中筛选出与木霉菌相容性较好且成粒 率高者作为黏结剂 在供试的 种黏结剂中 羧甲基纤维素和聚乙烯基吡咯烷酮 P P 分 别对哈茨木霉 深绿木霉孢子萌发影响较小 可 考虑利用两者作为哈茨木霉 深绿木霉水分散粒 剂的黏结剂 崩解剂以崩解时间小于 s为合 格 可溶性淀粉对 种木霉菌孢子活性的影 响低于其他处理 其产孢量分别较对照组高 所以 可溶性淀粉可作为木 霉水分散粒剂的崩解剂 哈茨木霉的最佳载体 为 硅藻土 而深绿木霉的最佳载体为 高 岭土 本试验所选的 种湿润剂对木霉菌丝的 生长均没有影响 最佳湿润剂为 木质素磺 酸钠 合理采用物理 化学 生物手段进行土传病 害的防治 对农作物的安全生产至关重要 本研 究探讨了木霉水分散粒剂对黄瓜生理特性的影 响 阐明了其对于黄瓜枯萎病的防治效果 对黄 瓜的安全生产具有一定意义 但木霉水分散粒 剂对黄瓜生长的影响是多方面的 下一步需深入 探究木霉水分散粒剂对黄瓜生长发育各方面的 影响 以提高其生产效益和经济价值 促进黄瓜 的开发利用和推广种植 为生防菌的施用环境与 剂量探索提供理论依据 木霉水分散粒剂可与 化学手段配合解决植物病虫害问题 逐渐减少农 药用量 为营造绿色生态环境贡献力量 木霉水 分散粒剂对黄瓜枯萎病具有拮抗作用 且深绿木 霉 水分散粒剂较哈茨木霉 水分散粒 剂防治效用更好 木霉水分散粒剂能通过重寄 生和诱导抗性作用等过程增强植株的抗氧化酶 活性 促进其光合作用和调节其 D 及脯氨酸 含量 进而减缓尖孢镰刀菌对黄瓜生长的抑制 因此 在黄瓜规模化生产中 可选择适宜剂量的 深绿木霉水分散粒剂进行处理 以期达到黄瓜的 最佳栽培效果 参考文献 References 陈立华 哈茨木霉及其微生物有机肥对黄瓜土传枯萎病 的生物防治及其机理 D 南京 南京农业大学 C N Bio ogic con o o us ium i o cucumbe i Trichoderma harzianum bioo g nic e i ize nd i s mec nism D N n ing N n ing g icu u Unive si y in C inese i ng is bs c 王汉荣 茹水江 王连平 等 黄瓜嫁接防治枯萎病和疫 病技术的研究 J 浙江农业学报 6 6 W NG R RU S J W NG P e S udy on e con o o us ium i nd y o o b ig in cucumbe by g ing J Acta Agriculturae Zhejiangensis 6 6 in C inese i ng is bs c 杨侃侃 刘晓虹 陈宸 等 黄瓜枯萎病研究进展 J 湖 南农业科学 6 Y NG U X C N C e Rese c og ess o cucumbe Fus ium i J Hunan Agricultural Sciences 6 in C inese i ng is bs c 刘士旺 生防绿色木霉工程菌的构建及其诱导植物抗病 性研究 D 杭州 浙江大学 U S W Cons uc ion o bio ogic con o s ins o Tri 朱森林 等 木霉水分散粒剂的培养条件优化及其对黄瓜枯萎病的防治效果 choderma viride nd s udy o ei bi i y o induce n dis e se esis nce D ngz ou Z e i ng Unive si y in C inese i ng is bs c R X C F P NG G e So ubi is ion o os e nd mic onu ien s by Trichoderma harzianum nd i s e ion s i i e omo ion o om o n g o J PLoS One 6 e 6 X ONG W GUO S JOUSS T e Bio e i ize ic ion induces soi su essiveness g ins us ium i dise se by es ing e soi mic obiome J Soil Biology and Bio chemistry SU D C D N J F S R UJOD P C S e Trichoderma asperelloides n gonism o nine Sclerotinia sclero tiorum s ins nd bio ogic con o o i e mo d dise se in soybe n n s J Biocontrol Science and Technology 6 GUPT J UR J BROT N Y Trichoderma as perelloides su esses ni ic o ide gene ion e ici ed by Fusari um oxysporum in Arabidopsis oo s J Molecular Plant Mi crobe Interactions OT ST N GR W T US W R e In vitro n gonism o Trichoderma s g ins Sclerotium rolfsii nd Rhizoctonia solani nd ei es onse o ds g o o cu cumbe bo e gou d nd bi e gou d J European Journal of Plant Pathology P NG G C F R X e Trichoderma en ic ed o g nic e i ize c n mi ig e mic obiome degene ion o mono c o ed soi o m in in be e n g o J Plant and Soil 6 徐文 黄媛媛 黄亚丽 等 木霉 植物互作机制的研究 进展 J 中国生物防治学报 XU W U NG Y Y U NG Y e dv nces on mec nism o Trichoderma n in e c ion J Chinese Journal of Biological Control in C inese i ng is bs c 牛鑫斌 徐秉良 刘佳 等 长枝木霉T6水分散粒剂对 种植物病害的生防效果 J 甘肃农业大学学报 N U X B XU B U J e Bio ogic con o e iciency o T longibrachiatum T6 e dis e sib e g nu es g ins ee kinds o n dise se J Journal of Gansu Agricultur al University in C inese i ng is bs c 黄剑 吴文君 利用 XC 快速进行毒力测定中的致死 中量计算和卡方检验 J 昆虫知识 6 U NG J WU W J C cu e e medi n e dose nd C i squ e es i XC in o ico ogic es J Ento mological Knowledge 6 in C inese i ng is bs c 王燕云 赵龙杰 郝春莉 等 生物有机肥对不同连作年 限设施黄瓜土壤微生物数量和酶活性的影响 J 浙江 农业学报 6 6 W NG Y Y Z O J O C e ec s o bio o g nic e i ize on soi mic obi o u ion nd enzymes c iv i ies unde di e en con inuous c o ing ye s o o ec ed cucumbe J Acta Agriculturae Zhejiangensis 6 6 in C inese i ng is bs c 谷祖敏 毕卉 张兵 等 不同木霉菌株对黄瓜枯萎病菌 的拮抗作用 J 西北农业学报 6 GU Z B Z NG B e n ibi ion c ion o di e en Trichoderma strains on Fusarium oxysporum s cu cumerinum J Acta Agriculturae Boreali Occidentalis Sini ca 6 in C inese i ng is b s c 6 高长敏 马光恕 廉华 等 木霉菌对黄瓜幼苗生长和膜 脂过氧化指标的影响及对枯萎病的防治效果 J 中国 生物防治学报 6 G O C G S N e ec o Trichoderma on e g o o cucumbe seed ings memb ne i id inde es nd con o e ec g ins Fus ium i J Chinese Journal of Biological Control 6 in C inese i ng is bs c B R T R SR ec o Trichoderma har zianum in combin ion i ungicides in con o ing g y mou d dise se Botrytis cinerea o s be y J American Journal of Plant Sciences 6 66 RBY F R NOS S C e W e dis e sib e g nu e o mu ions con ining ne de o ming gen J Journal of ASTM International URC ORTON P cc im ion o o osyn esis o i di nce nd s ec qu i y in B i is n s ecies c o o y con en o osyn e ic c ci y nd bi e e ence J Plant Cell and Environment S C UT N ec s o ig em e u e on m ondi de yde con en su e o ide oduc ion nd g o c nges in e seed ings Triticum aestivum J Ekologija 6 6 N NT R N S P D R J N T Y R N G S e Nin yd in sodium mo ybd e c omogenic n y i c obe o e ss y o mino cids nd o eins J Spec trochimica Acta Part A Molecular and Biomolecular Spectros copy 张志良 植物生理学实验指导 版 北京 高等教 育出版社 6 赵炀 李永生 高秀峰 基于愈创木酚荧光减量准确测 定过氧化物酶活性的新方法 J 分析化学 6 浙江农业学报 第 卷 第6期 6 Z O Y Y S G O X F ne me od o ccu e de e min ion o e o id se c ivi y b sed on uo escence de c e se o gu i co J Chinese Journal of Analytical Chemis try 6 in C inese i ng is bs c T N W U J D T e e ions in o osyn esis nd n io id n enzyme c ivi y in in e e sub ec ed o os n esis e ogging J Photosyntheti