6种多倍体大花萱草组织培养研究.pdf

6 种 多 倍 体 大 花 萱 草 组 织 培 养 研 究 陈 曦 刘 志 洋 哈 尔 滨 市 农 业 科 学 院 黑 龙 江 哈 尔 滨 1 5 0 0 2 9 摘要 为了满足市场对 多倍体大花萱草数量及 品种的需求 降低由 国外 引种 的成 本 实 现 工 厂 化 生 产 引 进 多 倍 体 大 花 萱 草 红 运 红 宝石 橘黄色 肉粉色 大金杯 和 金娃娃 6 个品种为研 究 材 料 采 用 组 织 培 养 的 繁 殖 方 式 进 行 离 体 快 繁 技 术 研 究 通 过 对 外 植 体 部位 筛选 不定芽诱导 增殖培养 生根培养等 研 究 表 明 分 蘖 茎 段 是 诱 导 不 定 芽 形 成 的 最 佳 外 植 体 培 养 2 5 d 左 右 不 定 芽 平 均 伸 长 5 c m 左右 不同浓度的植物 生长调节剂对不同种多倍体大花萱草 诱导率 的 影响 有 很 大 差 异 不 同 植 物 生 长 调 节 剂 对 6 种 多 倍 体 大 花 萱 草芽 量和增殖系数的影 响变化趋势一致 但在同种处理 上 不同品种 间 存 在 着 差 异 6 个 品 种 组 培 苗 的 最 适 宜 生 根 时 间 为 2 0 d 左 右 最 大生 根率都在 7 6 8 以上 关键 词 大花萱草 组织培养 诱导率 植物生长调节剂 增殖系 数 生根 率 中图 分类号 S 6 8 2 1 9 文献标识码 A 文章 编号 0 5 1 7 6 6 1 1 2 0 2 0 0 1 0 1 0 6 0 5 d o i 1 0 3 9 6 9 j i s s n 0 5 1 7 6 6 1 1 2 0 2 0 0 1 0 3 3 开 放科学 资源 服务 标识 码 O S I D S t u d y o n T i s s u e C u l t i v a t i o n i n S i x P o l y p l o i d H e m e r o c a l l i s h y b r i d a C H E N X i L I U Z h i y a n g H a r b i n A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s H a r b i n H e i l o n g j i a n g 1 5 0 0 2 9 A b s t r a c t I n o r d e r t o m e e t t h e m a r k e t d e m a n d f o r t h e n u m b e r a n d v a r i e t y o f H e m e r o c a l l i s h y b r i d a r e d u c e t h e c o s t o f i n t r o d u c t i o n f r o m a b r o a d H o n g y u n H o n g b a o s h i J u h u a n g s e R o u f e n s e D a j i n b e i a n d J i n w a w a w e r e s e l e c t e d a s m a t e r i a l s t i s s u e c u l t u r e p r o p a g a t i o n m e t h o d s w e r e u s e d t o s t u d y i n v i t r o r a p i d p r o p a g a t i o n t e c h n i q u e s S t u d i e s o n e x p l a n t s a d v e n t i t i o u s b u d i n d u c t i o n p r o l i f e r a t i o n c u l t u r e a n d r o o t i n g c u l t u r e s h o w e d t h a t t i l l e r s t e m s e g m e n t w a s t h e b e s t e x p l a n t f o r i n d u c i n g a d v e n t i t i o u s b u d f o r m a t i o n a f t e r c u l t u r i n g f o r a b o u t 2 5 d a y s t h e a v e r a g e e l o n g a t i o n o f a d v e n t i t i o u s b u d s w a s a b o u t 5 c m e f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n d i f f e r e n t v a r i e t i e s o f H h y b r i d a i n d u c t i o n r a t e h a d g r e a t d i f f e r e n c e e f f e c t s o f d i f f e r e n t p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n t h e b u d y i e l d a n d r e p r o d u c t i v e c o e f f i c i e n t o f s i x p o l y p l o i d g e r a n i u m b u d s w e r e c o n s i s t e n t b u t t h e r e w e r e d i f f e r e n c e s a m o n g d i f f e r e n t c u l t i v a r s i n t h e s a m e t r e a t m e n t t h e o p t i m u m r o o t i n g t i m e o f t h e 6 c u l t i v a r s w a s 2 0 d a n d t h e m a x i m u m r o o t i n g r a t e s w e r e a l l a b o v e 7 6 8 K e y w o r d s H e m e r o c a l l i s h y b r i d a T i s s u e c u l t i v a t i o n I n d u c t i o n r a t e P l a n t g r o w t h r e g u l a t o r P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t R o o t i n g r a t e 基 金 项 目 哈 尔 滨 市 科 技 创 新 人 才 项 目 2 0 1 3 R F Q Y J 0 1 9 作 者 简 介 陈 曦 1 9 8 2 女 黑 龙 江 哈 尔 滨 人 高 级 农 艺 师 硕 士 从 事 矮 牵 牛 育 种 及 宿 根 花 卉 引 种 驯 化 工 作 通 信 作 者 高 级 农 艺 师 硕 士 从 事 花 卉 育 种 工 作 收 稿 日 期 2 0 1 9 0 5 2 2 修 回 日 期 2 0 1 9 0 6 2 4 多倍体 大 花 萱 草 H e m e r o c a l l i s h y b r i d a 品 种 繁 多 花 型 秀美 花 色繁多 艳 丽 将 观 花 和 观 叶 融 为 一 体 在 东 北 地 区 花期 从 5 月 下 旬 到 9 月 对 土 壤 和 水 分 要 求 不 严 可 在 盐 碱 地上 生长开 花 加之冬 天极 耐 寒的特 性 使 大 花 萱 草 成 为 东 北 地区 主要园 林工程 花 卉品 种 目 前 各商 家纷纷 由国 外 引种 进 行 繁 殖 但 成 本 较 高 且 资 源 有 限 多 倍 体 大 花 萱 草 的 自 然 繁 殖 方 式 是 分 蘖 繁 殖 每 年分 蘖 2 3 株 而 且不结 实或很 少结实 繁 殖效率 低 不能满 足市 场需求 需 要利用 植物 组 织培养 技 术 对 引 进 的 萱 草 品 种 进 行 种 苗 的 大 量 繁 殖 以 满 足 园 林 市 场 需 求 解 决 限 制 多 倍 体大 花萱草 繁殖 速 度 的 瓶 颈 问 题 大 花 萱 草 的 组 织 培 养 研 究 已 有一些 报道 1 6 采 用 组织培 养方法 可以大 幅提 高 繁 殖 系 数 短 时 间 内 就 可 以 生 产 出 大 量 的 种 苗 投 放 市 场 加 快 了 新 品 种的应 用 为 了 能 够 满 足 市 场 对 多 倍 体 大 花 萱 草 数 量 及 品 种 的 需 求 降 低 由 国 外 引 种 的 成 本 增 加 新 品 种 多 倍 体 的数 量 该研究 引进多 倍体 大 花 萱 草 红 运 红 宝 石 橘 黄 色 肉 粉 色 大金 杯 和 金 娃 娃 6 个 品 种 为 材 料 采 用 组 织培 养的繁 殖方式 进 行离 体快繁 技 术 研 究 为 其 实 现 工 厂 化 生产 提供理 论依据 和 技术 支持 1 材 料 与方法 1 1 材 料 试 验 材 料 为 哈 尔 滨 市 农 业 科 学 院 园 区 内 种 植 的 6 个多倍 体大 花 萱草 品 种 取样时 间为每 年 6 9 月 盛花 期 1 2 方 法 1 2 1 外植 体 消 毒 与 处 理 选 取 花 蕾 分 蘖 茎 段 和 根 作 为 外 植 体材 料 将 采取 的 分 蘖 茎 段 切 成 1 2 c m 的 留 芽 小 段 先 用 洗 衣 粉 清 洗 材 料 再 用 流 水 冲 洗 6 0 m i n 后 在 超 净 工 作 台 上用 灭 菌剂 处 理 选用 7 5 乙醇 和 0 1 升 汞 灭 菌 设 5 个 处 理 表 1 表 1 灭菌剂 种类及处理 时间 T a b l e 1 S t e r i l i z e r t y p e a n d t r e a t m e n t t i m e 处理 T r e a t m e n t 7 5 乙醇处 理时间 T r e a t m e n t t i m e o f 7 5 e t h a n o l s 0 1 升汞 处理时间 T r e a t m e n t t i m e o f 0 1 m e r c u r y m i n 5 5 1 0 5 2 0 8 3 0 8 4 0 1 0 1 2 2 不定 芽 诱 导 不同植 物 品 种 适 宜 的 基 本 培 养 基 也 不 尽 相 同 目前 多倍 体 大 花 萱 草 最 常 用 基 本 培 养 基 为 M S 培 养 基 7 9 通过 在 基本 培 养 基 中 添 加 不 同 植 物 生 长 调 节 物 质 和 比 例促 使 外植 体 材料 分 化和 发 育 其 次 是 添 加 不 同 的 营 养 物 质 调 节 培 养 基 内 的 微 环 境 达 到 适 合 外 植 体 发 育 和 分 化 理 想 环境 以 M S 培 养基 为 基本 培 养 基 添 加 不 同 浓 度 的 植 物 生 长 调 节 剂 6 B A N A A 共设 置 1 0 个 浓 度梯 度 表 2 将 预处 理 好 的 6 种 多 倍体 萱 草的 分 蘖茎 段 分 别 接 种 于 上 述 培 养 基 中 每 个 品种 每 个 处 理 接 种 1 0 瓶 每 瓶 3 个 外 植 体 重 复 3 次 安 徽 农 业 科 学 J A n h u i A g r i c S c i 2 0 2 0 4 8 1 1 0 6 1 1 0 以 M S 为 基本 培 养基 添 加 蔗 糖 3 0 g L 琼 脂 7 g L p H 调 至 6 0 2 培 养 温度 2 5 左 右 空气 相对湿 度 控 制 在 4 0 6 0 光 照 强度 1 0 0 0 2 0 0 0 l x 培 养一定 时间后 调 查 污 染 情 况 和 统计 不定芽 诱导情 况 诱 导 率 成 功 诱 导 不 定 芽 数 接 种 培 养基 总数 1 0 0 表 2 诱 导培养中植 物生长调节 剂的浓度 T a b l e 2 C o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r i n i n d u c t i o n c u l t u r e m g L 培养基 M e d i u m 6 B A N A A M 1 0 0 M 2 0 5 0 0 5 M 3 0 5 0 1 0 M 4 0 5 0 2 0 M 5 1 0 0 0 5 M 6 1 0 0 1 0 M 7 1 0 0 2 0 M 8 2 0 0 0 5 M 9 2 0 0 1 0 M 1 0 2 0 0 2 0 1 2 3 不 定芽增 殖 培养 以 M S 培养 基为 基 本培 养 基 添 加 不同 浓度 植 物 生 长 调 节 剂 6 B A N A A 共 设 6 个 浓 度 梯 度 表 3 将 经过成 功 诱导 的 6 种 多 倍 体 大 花 萱 草 组 培 苗 分 别 接种 于增 殖 培 养 基 上 每 个 品 种 每 个 处 理 接 种 1 0 瓶 每 瓶 3 丛 块 重 复 3 次 2 0 d 统 计 其 芽 量 和 增 殖 系 数 光 照 强 度 为 2 0 0 0 3 0 0 0 l x 温 度 为 2 5 增殖 系数 增殖 苗数 接种 苗数 表 3 增 殖培养中植 物生长调节 剂的浓度 T a b l e 3 C o n c e n t r a t i o n o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s i n m u l t i p l i c a t i o n c u l t u r e m g L 培养基 M e d i u m 6 B A N A A Z 1 0 0 Z 2 0 5 0 1 Z 3 1 0 0 1 Z 4 2 0 0 2 Z 5 3 0 0 3 Z 6 5 0 0 5 1 2 4 生 根培养 当不 定 芽长 至 2 3 c m 时 将 不 定 芽 分 割 成单 个 外 植 体 以 1 2 M S 为 基 本 培 养 基 添 加 不 同 浓 度 的 N A A 和 I B A 表 4 比 较 2 种 植 物 生 长 调 节 剂 的 生 根 情 况 挑选 出 红宝 石 红运 橘 黄 色 肉 粉 色 大 金 杯 和 金 娃娃 增殖培 养 2 0 d 4 6 c m 高的 健壮植 株 其 叶 色 浓 绿 切 除 基 部 的 愈 伤 组 织 分 别 接 种 于 生 根 培 养 基 上 每 处 理 接 种 1 0 瓶 每瓶 接 种 3 株 培 养 苗 重 复 3 次 转 接 后 注 意 观 察 记 录苗 的生 根 情 况 2 0 d 后 测 量 根 长 统 计 生 根 率 并 进 行 移 栽 生根率 生 根苗数 接 种 小苗 数 1 0 0 1 2 5 炼 苗及移 栽 打 开 组 培 瓶 盖 在 室 温 下 炼 苗 3 4 d 接 受 太 阳 光 照 射 取 出 组 培 苗 并 用 流 水 洗 净 根 系 上 的 培 养 基 然 后 直 接 移 栽 到 营 养 钵 中 待 长 出 新 芽 后 再 移 栽 到 花 盆 或 大 田 表 4 N A A 和 I B A 生 根培养基的浓 度 T a b l e 4 C o n c e n t r a t i o n o f N A A a n d I B A r o o t i n g m e d i u m m g L 生长调节剂 G r o w t h r e g u l a t o r 培养基 M e d i u m 浓度 C o n c e n t r a t i o n N A A S 1 0 S 2 0 1 S 3 0 3 S 4 0 5 S 5 0 7 S 6 1 0 I B A T 1 0 T 2 0 1 T 3 0 2 T 4 0 4 T 5 0 6 T 6 1 0 2 结 果与分 析 2 1 外 植体 的 确立 从 3 种 外 植 体 接 种 到 培 养 基 后 的 表 现 看 花 蕾 部 分 先 产 生 愈 伤 组 织 再 由 愈 伤 组 织 诱 导 生 成 不 定 芽 而 根 的 诱 导 率 极 低 分 蘖 茎 段 以 器 官 发 生 途 径 直 接 诱 导 形 成 不 定 芽 缩 短 了 不 定 芽 生 成 时 间 不 容 易 引 起 变 异 是 诱 导 不 定芽 形 成的 最 佳外 植 体 2 2 灭 菌方 法 对 外 植 体 的 影 响 由 表 5 可 知 乙 醇 处 理 时 间 过 长容 易 导致 外 植体 死 亡 然而 乙 醇 处 理 时 间 短 则 容 易 导 致 灭 菌效 果 不理 想 在 乙 醇 处 理 时 间 一 致 的 情 况 下 外 植 体 污 染 率 随 着 升 汞 处 理 时 间 增 加 而 减 少 但 死 亡 率 同 步 上 升 说 明 灭 菌 时 间 越 长 其 污 染 率 越 低 而 灭 菌 时 间 过 长 对 外 植 体 会 造 成 严 重 的 创 伤 如 加 重 外 植 体 的 褐 化 程 度 使 外 植 体 发 生 水浸 状 态变 化 致 使 其 死 亡 或 失 水 萎 蔫 1 0 但 是 灭 菌 时 间 过 短 污 染 率 增 加 不 能 达 到 真 正 的 灭 菌 目 的 污 染 致 使 外 植 体 死亡 表 5 不同 灭菌方法对 外植体的影响 T a b l e 5 E f f e c t s o f d i f f e r e n t s t e r i l i z a t i o n m e t h o d s o n e x p l a n t 处理 T r e a t m e n t 接种数个 N u m b e r o f v a c c i n a t i o n 个 污染数 P o l l u t i o n n u m b e r 个 死 亡数 N u m b e r o f d e a t h s 个 污染率 P o l l u t i o n r a t e 死亡率 M o r t a l i t y r a t e 5 4 3 7 0 6 8 5 0 5 7 2 0 0 3 5 1 0 5 0 8 2 1 6 0 4 0 5 4 5 4 9 3 7 4 5 6 2 7 3 6 1 2 5 综合 认 为 7 5 乙 醇 3 0 s 0 1 升 汞 8 m i n 是 多 倍 体 大 花 萱 草分 蘖 茎段 适 宜的 灭 菌方 法 2 3 多 倍 体 大 花 萱 草 不 定 芽 形 成 过 程 将 多 倍 体 大 花 萱 草 的 分 蘖茎 段 分割 成 1 2 c m 接 种 到 诱 导 培 养 基 中 5 d 后 茎 芽 呈 黄绿 色 部 分 开 始 伸 长 7 d 左 右 茎 芽 开 始 增 粗 略 有 伸 长 颜 色偏绿 新 长 出的 嫩 叶稍 稍 向 外 翻 卷 1 0 d 后 茎 芽 长 出 嫩 叶 平 均伸 长 1 5 c m 左 右 颜 色 翠 绿 茎 基 部 出 现 不 同 数 量 的 不 定 芽 嫩 叶 向 外 翻 卷 宽 度 明 显 增 加 接 种 1 5 d 后 新 7 0 1 4 8 卷 1 期 陈 曦 等 6 种 多 倍 体 大 花 萱 草 组 织 培 养 研 究 芽伸 长 量 平 均 达 3 c m 左 右 不 定 芽 增 多 形 成 芽 丛 2 0 2 5 d 不 定 芽平 均 长度 可 达 5 c m 左右 图 1 注 A 分蘖茎段 接到培养基 中 2 d 的生长情况 B 7 d 后长 出子叶 颜色 变绿 C 1 0 d 后茎叶伸 长增粗 长出侧芽 D 1 5 d 后 不 定 芽 越 来 越 多 形 成 芽 丛 E 2 0 d 后 芽丛增 粗增 长 颜 色更绿 F 2 5 d 左右 长大 的不定芽 N o t e A T h e g r o w t h o f t h e t i l l e r s t e m s e g m e n t s i n t h e m e d i u m f o r 2 d a y s B A f t e r 7 d a y s t h e c o t y l e d o n s g r e w a n d t h e c o l o r t u r n e d g r e e n C A f t e r 1 0 d a y s t h e s t e m s a n d l e a v e s w e r e t h i c k e n e d a n d t h e l a t e r a l b u d s g r e w D A f t e r 1 5 d a y s m o r e a n d m o r e b u d s w e r e f o r m e d E A f t e r 2 0 d a y s t h e b u d s g r e w t h i c k e r a n d t h e c o l o r w a s d e e p g r e e n F A b o u t 2 5 d a y s t h e g r o w i n g a d v e n t i t i o u s b u d s 图 1 多倍体大 花萱草不定 芽形成过程 F i g 1 T h e p r o c e s s t o i n d u c e b u d o f H h y b r i d a 2 4 不 同 浓 度 6 B A 和 N A A 配 比 对 不 定 芽 诱 导 的 影 响 6 B A 是 诱 导再 生 芽 的 主 要 因 素 随 着 6 B A 浓 度 的 增 加 产 生 的不定 芽 数 逐 渐 增 加 但 是 过 高 浓 度 的 6 B A 会 抑 制丛 生芽后 期 生 长 黄 化 直 至 逐 渐 枯 萎 另 外 添 加 一 定 浓 度的 生长素 N A A 可以 促进 不 定 芽 分 化 提 高 平 均 再 生 芽 数 但 N A A 过高会 使不定 芽矮 小 抑 制 其 伸 长 生 长 因 此 适 合 的 植物 生长调 节剂配 比 是生 长不定 芽 的必 要 条件 由表 6 可知 不 同 浓度 的 植物 生 长 调 节 剂 对 不 同 基 因 型 多 倍 体萱 草 的诱 导 率影 响 也有 很 大 的 差 异 从 整 体 变 化 趋 势 看 红 宝石 红 运 橘 黄 色 肉 粉 色 和 大 金 杯 在 M 3 M 4 M 5 M 6 M 7 中 有不 同 的 表 现 但 诱 导 率 最 高 的 情 况 都 出 现 在 M 6 培 养 基 上 金 娃 娃 与 其 他 5 个 品 种 不 同 在 M 2 M 3 M 4 M 5 M 6 上 较为 活 跃 而 诱 导 率 最 高 的 情 况 出 现 在 处 理 M 3 中 表 6 不同浓 度植物生长 调节剂对大 花萱草诱导率 的影响 T a b l e 6 E f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n i n d u c t i o n r a t e o f H h y b r i d a 培养基 M e d i u m 红宝 石 H o n g b a o s h i 红运 H o n g y u n 橘 黄色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a M 1 M 2 2 3 8 M 3 1 7 6 1 8 9 2 2 3 2 0 7 1 7 7 7 8 4 M 4 1 9 6 2 1 1 2 5 8 3 2 7 3 3 9 5 2 1 M 5 3 0 8 3 2 7 4 0 2 3 8 3 5 0 6 3 5 2 M 6 6 7 5 7 8 3 8 1 0 6 6 4 7 3 8 1 9 7 M 7 4 2 6 3 7 8 2 9 7 2 4 5 1 9 8 M 8 M 9 M 1 0 2 5 多倍 体大 花 萱 草 增 殖 培 养 由 表 7 可 知 不 同 浓 度 的 植物 生长调 节剂对 红宝 石 红 运 橘 黄 色 肉 粉 色 大 金 杯 和 金 娃 娃 6 个 品 种 芽 量 和 增 殖 系 数 的 影 响 较 大 橘黄 色 肉 粉 色 和 金 娃 娃 在 Z 3 处 理 上 芽 量 和 增 殖 系 数最 大 其中 橘黄色 芽 量 为 1 8 5 个 增 殖 系 数 达 3 1 红 宝 石 和 红 运 的 最 大 芽 数 出 现 在 Z 4 处 理 中 红 运 的 增 殖 系 数最 大 达 3 2 大 金 杯 的 最 大 芽 量 和 增 殖 系 数 分 别 为 1 5 6 和 2 6 不同 植 物生 长 调 节 剂 对 6 种 多 倍 体 萱 草 芽 量 和 增 殖 系 数 的 影 响 变 化 趋 势 一 致 但 在 同 种 处 理 上 不 同 品 种 间 存 在 8 0 1 安徽农业 科学 2 0 2 0 年 着差 异 在 Z 2 处理 上 红 宝 石 红 运 和 大 金 杯 的 芽 量 和增 殖 系 数 均 无 变 化 而 橘 黄 色 芽 数 为 7 2 增 殖 系 数 为 1 2 金 娃娃 则 为 9 6 和 1 6 在 Z 3 处理 上 芽 数和增 殖系数 均 表 现为 红 宝石 大 金 杯 红 运 肉 粉 色 金 娃 娃 橘 黄色 表 7 不同 浓度植物生 长调节剂对 组培苗增殖的 影响 T a b l e 7 E f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r o n p r o l i f e r a t i o n o f t i s s u e c u l t u r e p l a n t l e t s 培养基 M e d i u m 红 宝 石 H o n g b a o s h i 芽数 N u m b e r o f b u d s 个 增殖系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 红运 H o n g y u n 芽数 N u m b e r o f b u d s 个 增殖 系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 橘黄色 J u h u a n g s e 芽数 N u m b e r o f b u d s 个 增 殖系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 肉 粉色 R o u f e n s e 芽 数 N u m b e r o f b u d s 个 增殖系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 大金 杯 D a j i n b e i 芽 数 N u m b e r o f b u d s 个 增殖系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 金娃 娃 J i n w a w a 芽数 N u m b e r o f b u d s 个 增殖系数 P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t Z 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Z 2 7 2 1 2 7 9 1 3 9 6 1 6 Z 3 8 3 1 4 9 7 1 6 1 8 5 3 1 1 6 8 2 8 9 0 1 5 1 7 8 3 0 Z 4 1 6 8 2 8 1 9 2 3 2 1 3 4 2 2 1 3 2 2 2 1 5 6 2 6 1 1 7 2 0 Z 5 1 0 2 1 7 1 1 2 1 9 1 0 5 1 8 9 2 1 5 1 3 1 2 2 7 0 1 2 Z 6 7 8 1 3 8 3 1 4 6 8 1 1 7 2 1 2 7 7 1 3 6 3 1 1 2 6 多倍 体大 花 萱 草 生 根 和 成 苗 过 程 由 图 2 可 知 将 组 培 苗 转接到 生根培 养 基中 4 d 左 右 根部 生 成 乳 黄 色 根 瘤 状 根 瘤 随着时 间的增 加 逐渐 增大 7 d 后 每 株 长 出 3 4 条 白 色 细 根 当 组培苗 转接到 生 根 培 养 基 中 1 6 d 左 右 时 平 均 根 长 可达 3 5 c m 左 右 时 颜 色 转 为 黄 绿 色 根 尖 部 依 然 为 黄 白 色 同 时根瘤 处长出 一些 白 色 细 小 须 根 生 根 培 养 2 0 d 左 右 时 各 品种 根 部 生 长 都 达 到 了 炼 苗 标 准 根 长 度 达 3 5 c m 以 上 的组 培 苗可 直 接移 栽 到营 养 钵 里 进 行 炼 苗 处 理 因 此 多 倍 体 大花 萱 草组 培 苗适 宜 的生 根 培养 时间为 2 0 d 左 右 注 A 组培苗在 生根培养基中 生长 7 d 左右的 情况 B 组 培苗在生根 培养基中生 长 2 0 d 左 右的 情况 C 生根培养 后的组培苗 D 将组 培 苗 移 栽 到 营 养 钵中 E 将 组培苗移 栽 到试验地中 F 长 大的组 培苗 N o t e A T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s g r e w i n r o o t i n g m e d i u m f o r a b o u t 7 d a y s B T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s g r e w i n r o o t i n g m e d i u m f o r a b o u t 2 0 d a y s C T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g a f t e r r o o t i n g D T r a n s p l a n t i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s i n t o p l a n t i n g b o w l s E T r a n s p l a n t i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s i n t o e x p e r i m e n t a l s i t e s F T h e g r o w i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g 图 2 多倍 体大花萱草 的生根和成 苗过程 F i g 2 R o o t i n g a n d s e e d l i n g f o r m a t i o n o f H h y b r i d a 2 7 不 同 浓 度 植 物 生 长 调 节 剂 对 多 倍 体 大 花 萱 草 生 根 率 的 影响 与表 8 相比 表 9 的 生 根 率 变 化 更 大 在 无 植 物 生 长 调节 剂添 加 的 情 况 下 各 品 种 的 生 根 率 为 3 8 2 5 8 1 肉粉 色 和 金娃 娃 在 1 2 M S N A A 0 1 m g L 时 生 根 率 达 到 最 大 为 9 7 4 和 9 6 2 而 在 1 2 M S I B A 1 0 m g L 时 只 有 8 4 2 和 8 1 3 当 植 物生 长调节 剂为 N A A 时 橘黄色 和 大 金 杯 最 大 生 根 率 出 现 在 浓 度 为 1 2 M S N A A 0 3 m g L 分 别 为 9 6 3 9 5 6 当 植 物 生 长 调 节 剂 为 I B A 时 橘 黄 色 最大 生根 率 出 现 在 1 2 M S I B A 0 2 m g L 时 为 8 3 7 大金 杯 的 最 大 生 根 率 在 1 2 M S I B A 0 4 m g L 出 现 为 7 6 8 都 较 植 物 生 长 调 节 剂 为 N A A 时 大 幅 降 低 综 合 2 种 植 物 生 长 调 节 剂 对 6 种 多 倍 体 大 花 萱 草 根 长 生 根 率 9 0 1 4 8 卷 1 期 陈 曦 等 6 种 多 倍 体 大 花 萱 草 组 织 培 养 研 究 的影 响 以 及 从 价 格 考 虑 建 议 在 大 批 量 生 产 中 采 用 N A A 为 佳 表 8 不同浓 度 N A A 对 大花 萱草生根 率的影响 T a b l e 8 E f f e c t s o f d i f f e r e n t N A A c o n c e n t r a t i o n s o n r o o t i n g r a t e o f H h y b r i d a 培养基 M e d i u m 红宝 石 H o n g b a o s h i 红运 H o n g y u n 橘 黄色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a S 1 4 6 7 4 3 6 3 8 2 4 8 3 5 1 3 5 8 1 S 2 8 8 4 8 3 7 9 4 7 9 7 4 8 9 4 9 6 2 S 3 9 2 5 8 7 7 9 6 3 9 3 3 9 5 6 9 2 1 S 4 9 8 6 9 7 3 8 8 3 8 8 9 9 3 2 8 7 7 S 5 9 3 2 8 6 7 8 5 2 8 6 4 8 7 6 8 5 8 S 6 8 1 3 8 2 8 7 8 4 8 2 3 7 5 9 6 9 4 表 9 不同 浓 度 I B A 对 大花萱草生 根率影响 T a b l e 9 E f f e c t s o f d i f f e r e n t I B A c o n c e n t r a t i o n s o n r o o t i n g r a t e o f H h y b r i d a 培养基 M e d i u m 红宝 石 H o n g b a o s h i 红运 H o n g y u n 橘 黄色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a T 1 4 6 7 4 3 6 3 8 2 4 8 3 5 1 3 5 8 1 T 2 7 5 3 6 9 4 8 0 1 8 4 2 6 9 5 8 1 3 T