杀虫真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱作用特点和控害效果.pdf

江苏农业学报 张志春 张 怡 沈迎春 等 杀虫真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱作用特点和控害效果 江苏农业学报 杀虫真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱作用特点和控害 效果 张志春 张 怡 沈迎春 郭慧芳 江苏省农业科学院植物保护研究所 江苏南京 江苏省农药总站 江苏南京 收稿日期 基金项目 江苏省农业科技自主创新基金项目 江苏 省农业科学院基金项目 江苏省农业三新工程 项目 江苏省特经作物安全用药筛选与登记项目 作者简介 张志春 男 江苏如皋人 博士 副研 主要从事害 虫生物防治研究 通讯作者 郭慧芳 沈迎春 摘要 烟粉虱是非洲菊上常发害虫 主要依赖化学防治 但常用药剂防治效果一般 生物防治是理想的替代 手段 本研究首先鉴定非洲菊烟粉虱的生物型 然后测定虫生真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的室内杀虫活性 并对其田间防治效果进行评价 结果表明 非洲菊烟粉虱属于 型 爪哇棒束孢含量为 孢子以上对非 洲菊烟粉虱成虫即具有很高的致病力 后校正死亡率达 以上 后非洲菊烟粉虱成虫全部死亡 在湿度大 于 条件下 孢子爪哇棒束孢油悬剂稀释到 孢子 对田间非洲菊烟粉虱具有较高的防 治效果 药后 和 的校正防效分别为 和 说明虫生真菌爪哇棒束孢对非洲菊上的烟粉虱 致病力高且实际防治效果好 可用于非洲菊等花卉烟粉虱的防治 关键词 非洲菊 烟粉虱 爪哇棒束孢 生物防治 中图分类号 文献标识码 文章编号 烟粉虱 属半翅目粉 虱科 作为重要的入侵生物 其已成为一种世界性害 虫 可通过直接刺吸 分泌蜜露诱发煤烟病以及传播 病毒等产生危害 给农业生产和经济作物造成极大 的危害 除为害蔬菜 棉花等经济作物外 烟粉 虱也是花卉上的重要害虫 长期以来 烟粉虱的防 治主要以化学农药防治为主 导致害虫对常见的化 学农药如啶虫脒等产生了严重抗药性 增加了防治 难度 且不同生物型烟粉虱在寄主适应性 抗药 性等方面均存在较大差异 进一步增强了防治难 度 非洲菊 是世界五大鲜 切花之一 其花色繁多 花枝挺拔 花期长且不易 衰败 深受花卉种植者和消费者喜爱 具有极高的经 济价值 然而由于非洲菊叶片宽大 是烟粉虱喜 好的寄主 受危害严重 严重时造成的霉污病不仅影 响光合作用 也影响非洲菊鲜切花的品质 非洲菊 烟粉虱的防治同样依赖化学农药 化学农药长期单 一使用后造成烟粉虱抗药性增强 由于繁殖速度 快 为害隐蔽 抗药性强 烟粉虱的生物防治研究一 直备受关注 其中利用虫生真菌进行生物防治已成 为替代化学防治的最重要手段之一 蜡蚧轮枝菌 球孢白僵菌 座壳孢菌 拟青毒等已被报道可作为生 物防治烟粉虱的杀虫真菌 其中球孢白僵菌已被 登记用于烟粉虱的防治 本实验室从田间烟粉虱中 分离出杀虫真菌爪哇棒束孢 并首次将这种真菌 登记为生物农药 用于蔬菜上烟粉虱的生物防治 为进一步发挥生物农药爪哇棒束孢的作用 本试验 研究了爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的室内杀虫活性 和田间防治效果等 以探明爪哇棒束孢对非洲菊烟 粉虱的作用特点和防治潜力 提升花卉害虫生物防 治水平 材料与方法 试验材料 供试昆虫 非洲菊烟粉虱采自南京市农业 科学研究所禄口基地 在人工气候室 温度 光周期 中用非洲菊饲养 供试药剂 爪哇棒束孢 孢 子粉和 孢子爪哇棒束孢油悬剂由江苏 省农业科学院植物保护研究所研制 试验方法 烟粉虱生物型鉴定 反应扩增单头烟 粉虱 基因 根据 擎科生物科技有限公司 试剂盒说明书 利用 加热裂解法处理单头烟粉虱作为 模板 扩增所用引物为通用引物 上游引物 下游引物 扩 增产物为 基因 末端大小为 左 右的部分序列 反应体系 模板 加 至 反应体 系于 变性 然后进行 个循环 变 性 退火 延伸 然后再 延伸 反应产物置于 冰箱保存 送擎科生 物科技有限公司测序 测序结果通过 网站上 的 进行比对鉴定 室内杀虫活性测定 将爪哇棒束孢孢子粉 用 吐温 配置成 孢子 孢 子 孢子和 孢子 孢子 以 吐温 作为对照 均匀喷雾于带有采自非洲菊的烟 粉虱黄瓜叶正反面 待烟粉虱成虫稳定不乱飞后 将 黄瓜叶片放于高湿环境中 每个处理重复 次 分别 于药后 和 调查活虫数 计算死亡率 并与对 照死亡率进行比较 计算校正死亡率 用唐启义教 授开发的 统计分析软件进行数据处理 并 进行差异显著性比较 田间防效评价 在大棚中选取受烟粉虱危 害的非洲菊 做好标记 每个小区标记 株 将 孢子爪哇棒束孢油悬剂用水稀释 倍和 倍即得到 和 孢子 个处 理 用电动喷雾器均匀喷雾于非洲菊叶正反面 每个 处理设 个重复 每重复 株 同时用清水作对照 喷雾处理后大棚保持高湿环境 然后正常管理 后再次施以相同处理药液 分别于第一次施药 前 施药后 和 调查活虫数 计算死亡率 并 与对照死亡率进行比较 计算校正死亡率 感染率 为显症虫数占供试虫基数的百分率 用 统 计分析软件进行数据处理 用 法进行不同 处理间差异显著性比较 结果与分析 烟粉虱生物型的鉴定 对烟粉虱 基因的扩增结果表明 张志春等 杀虫真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱作用特点和控害效果 产物大小约为 与预计中的产物大小相 近 无非特异性条带 序列通过 比对 图 初步确定为 型 利用 软件 将非洲菊烟 粉虱 基因序列和 型烟粉虱 型烟粉虱 基因序列比对 结果发现非洲菊烟粉虱 序列和 型烟粉虱完全相同 非洲菊上的烟粉虱鉴 定为 型 图 烟粉虱 基因序列比对结果 爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的室内杀虫活性 爪哇棒束孢对烟粉虱的侵染效果如图 所示 从图 中可以看出 爪哇棒束孢真菌侵染 后 在 烟粉虱体表就能长满菌丝 后 烟粉虱体表的爪 哇棒束孢就能产生大量孢子 可以继续侵染其他烟 粉虱 处理后 处理后 未处理对照 图 非洲菊烟粉虱感染爪哇棒束孢后的症状 爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的室内杀虫活性见 表 从表 中可以看出 爪哇棒束孢对非洲菊烟 粉虱的致病力因孢子含量不同而异 在孢子含量为 及以上时 对害虫表现出很高的致病活 性 处理后 校正死亡率即达 以上 高达 孢子含量为 时 爪哇棒束孢杀虫 江苏农业学报 年第 卷第 期 活性较低 后校正死亡率为 爪哇棒束孢 处理后 对烟粉虱成虫的毒力回归方程为 和 分别为 孢子和 孢子 处理后 对烟粉虱 成虫的毒力回归方程为 和 分别为 孢子和 孢子 表 爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的室内活性 孢子含量 校正死亡率 处理后 处理后 同列数据后不同小写字母表示不同处理间差异达 显著水平 爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的田间防治效果 孢子爪哇棒束孢油悬剂对非洲菊 烟粉虱表现出理想的田间控害效果 从表 可以看 出 孢子爪哇棒束孢油悬剂配置成 和 孢子 个孢子含量药液喷雾处 理 对温室内非洲菊烟粉虱均具有较好的防治效果 首次施药后 孢子和 孢子 药液对害虫的校正防效分别为 和 真菌感染率分别为 和 高孢子含量 处理感染率显著高于低孢子含量处理 表 孢子爪哇棒束孢油悬剂对非洲菊烟粉虱的田间 防治效果 孢子含量 首次施药后 校正死亡率 感染率 首次施药后 校正死亡率 感染率 同列数据后不同小写字母表示不同处理间差异达 显著水平 讨论 利用虫生真菌防治害虫是生物防控的重要手 段 因其环境友好 对人畜安全 易于规模生产 难以 产生抗性等优点 日益受到人们的重视和青睐 由 于长期使用化学农药 非洲菊烟粉虱对一些常用化 学药剂产生了很高的抗药性 利用生物防治可以很 好地解决这些问题 国内外利用虫生真菌防治 烟粉虱已经取得了一些成果 比如利用球孢白僵菌 玫烟色拟青霉菌和蜡蚧轮枝菌等虫生真菌能较好地 防治烟粉虱 前人研究发现 白僵菌在湿度 为 的室内条件下对烟粉虱 龄若虫的 为 孢子 而玫烟色拟青霉菌的 为 孢子 孢子玫烟色棒束孢 菌株在室内高湿条件下处理烟粉虱成虫 的校正死亡率为 而本研究结果表 明 在室内爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱成虫 的 即为 孢子 显著优于玫烟色棒束 孢 菌株 对于烟粉虱等害虫的杀虫真菌研究 大多数局 限于对杀虫真菌的室内活性研究 缺少田间条件下 对害虫的杀虫效果评价 本研究发现 爪哇棒束孢 油悬剂对设施大棚的非洲菊烟粉虱也具有很好的防 治效果 有效成分用量为 孢子时 的校正防效达 的校正防效达 且真菌感染率很高 综合上述研究结果表 明 爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱的生物防治潜力大 除已开发用于蔬菜上的烟粉虱防治产品外 也可开 发用于非洲菊等花卉上烟粉虱防治产品 由于杀虫 真菌的侵染特点 施药后 内需要田间保持高湿 度 有可能带来田间病害增加的风险 如何协调设 施内病虫害的防控 营造短期高湿度条件以发挥杀 虫真菌对害虫的防控作用 同时减少对病害发生的 直接影响 需要进一步根据不同作物种类及生长期 等进行病虫害发生和控制的系统研究 参考文献 许丽丽 蔡 力 沈伟江 等 中国部分地区烟粉虱生物型种类 及系统发育关系分析 应用生态报 张志春等 杀虫真菌爪哇棒束孢对非洲菊烟粉虱作用特点和控害效果 何玉仙 翁启勇 黄 建 等 烟粉虱田间种群的抗药性 应 用生态学报 郑 宇 赵建伟 何玉仙 等 福建省烟粉虱田间种群抗药性发 展及其影响因素 应用生态学报 郝向阳 林 觅 孙雪丽 等 福建非洲菊产区根腐病病原菌的 分离与鉴定 福建农业学报 焦元辰 郝向阳 孙雪丽 等 不同激素和非生物胁迫处理对非 洲菊 活性的影响 园艺与种苗 王 慧 孔维娜 马瑞燕 烟粉虱生物防治研究进展 山西 农业大学学报 宋薇薇 朱 辉 余凤玉 等 植物内生菌及其对植物病害的防 治作用综述 江苏农业科学 李 欢 曹雪梅 陈 茹 等 高效拮抗链孢霉和绿色木霉海洋 细菌的筛选及鉴定 南方农业学报 蒋 妮 白丹宇 宋利沙 等 棘孢木霉 菌株对三七灰霉病 的生物防治作用 江苏农业科学 梁 丽 田 晶 马瑞燕 玫烟色棒束孢研究进展 山西农 业大学学报 王联德 黄 建 烟粉虱的为害及其生物防治策略 福建农 业大学学报 刘 召 雷仲仁 对烟粉虱具有高致病力的虫生真菌筛选 中国蔬菜 田 晶 田浩楷 刁红亮 等 玫烟色棒束孢对烟粉虱致病的时 间 剂量 死亡率模型分析 河南农业科学 责任编辑 陈海霞 江苏农业学报 年第 卷第 期