烟色离褶伞工厂化栽培菌株的初步筛选.pdf

北 方 园 艺 食 用 菌 第 一作者简介 宋莹 女 硕 士 副研究员 现主要 从事食用菌遗传育种与栽培技术等研究工作 责 任作者 张敏 女 博 士 研究员 现主要从事食用 菌育种及栽培等研究工作 基 金项目 沈阳市中青年科技创新人才支持计划资助项目 食用菌产业体系资助项目 收 稿日期 烟色离褶伞工厂化栽培菌株的初步筛选 宋 莹 刘 娜 张 士 义 张 敏 冯 虎 于 凤 臣 辽宁省农业科学 院 食用菌研究所 辽宁 沈阳 彰武县第二高级中学 辽 宁 彰武 新宾满族自治县苇子峪镇政府农经站 辽 宁 抚顺 摘 要 以 株 烟色离褶伞菌株为试材 按照拮抗 固体和液体菌落生长 农艺性状栽 培试验的方法 进行不同烟色离褶伞菌株亲缘关系和菌株生长特性研究 以期为烟色离褶伞 工厂化栽培提供参考依据 结果表明 通过拮抗试验初步判定出 菌株是各自独 立菌株 菌株为同一菌株 菌株综合性状最佳 在固体培养基上培养时 菌丝 生长均匀 且生长速度最快 达到 在 液体培养基中培养时 菌球密 度最大 为 个 菌 球直径最小 单个菌球直径为 生 物量为 在 出菇栽培试验中 菌株的污染率最低 出菇整齐 生物学效率显著高于其它 菌株 达到 关 键词 烟色离褶伞 拮抗 菌丝生长 栽培 中图分类号 文 献标识码 文章编号 烟 色离褶伞 属 伞菌目 白 蘑科 离 褶伞属 俗 称槟榔菇或宾王菇 该 菇氨 基酸含量丰富 口感独特 菌肉细腻 久炖不绵 被 当地百姓视为珍品 近 年来 随着野生烟色离 褶伞菌株的人工驯化和栽培成功 离褶伞规模化 工厂化栽培方向也逐渐明确 离褶伞工厂化栽培 是 利用现代工业设施设备 通过人为控制其不同 生长阶段的环境条件 进行规模化栽培 具有生产 周期短 子实体产量高 品质好等特点 因 此 明确离褶伞种性及品种之间亲缘关系 筛选菌丝 生长快 生长周期短的菌种是烟色离褶伞工厂化 栽培的基础保障 该研究以收集到的 个 烟色 离褶伞菌株为试材 对其进行生长特性及亲缘关 系初步试验和分析 以期为烟色离褶伞工厂化栽 培的品种选择提供参考依据 材 料与方法 试 验材料 供 试菌株 供试菌株共 株 编 号为 号 由 表 供试烟色离褶伞菌株 菌 株 编 号 原 始采集地点 抚 顺市 彰 武县 彰 武县 彰 武县 紫 外诱变 彰 武县 彰 武县 彰 武县 黑 龙江省 彰 武县 辽 宁省农业科学院食用菌研究所提供 原始菌株 从烟色离褶伞原发地阜新彰武县 抚顺市 黑龙江 省采集 培 养基配方 改 良培养基 去 皮马铃薯 麦 芽 糖 大豆蛋白胨 玉米面 磷酸二氢 钾 硫 酸镁 琼 脂 蒸馏水 液 体培养基 去 皮马铃薯 麦 芽 糖 大豆蛋白胨 玉米面 磷酸二氢钾 硫 酸镁 蒸馏水 栽 培培养基 培养基配方为草炭 玉 米 芯 玉 米秸秆 麦 麸 石 膏 石 灰 试 验方法 菌 株亲缘关系分析 将供试菌株接入 改 良 培 养基 的平皿中 每个菌株接种 个菌块 接种后置于 恒 温箱中培养 观察平皿上菌丝交接处的反 应 判断菌株之间的亲缘关系 试 验设置 次 重复 固 体培养基菌丝培养 将 株 供试 菌 株 活 化 后 分 别 取 直 径 为 的 菌种块 接种于 改 良 培 养基 的平皿中央部位 接种后置于 恒 温箱培养 记录每天菌丝生长位置 颜色 长势 浓密程度及 满皿时间 采用十字划线法计算菌丝生长速度 试 验设置 次重复 菌丝生长速度 菌 落直径 培养 时间 液 体培养基菌丝培养 按照液体培养基配方制作培养基 分装在容 量为 的 三角瓶中 每瓶装 灭 菌 在无菌条件下接种 置于 恒 温摇床 振荡培 养 转 速 培 养结束后 记录菌 丝球形态和培养液颜色 测量菌丝球大小和菌丝 密度 培养液经过滤网过滤 所得菌丝体用蒸馏 水洗涤 次后 置于 干 燥箱烘干至恒质量 电子天平称量菌丝体质量 并计算每 液 体 培养基中的菌丝体生物量 设 次 重复 出 菇栽培试验 模拟工厂化栽培条件 采用 聚 丙烯 瓶进行生产栽培 每个菌株接种 瓶 观 察各菌 株子实体的形态特征 并随机抽取 个 子实体 测量菌盖直径 菌盖厚度 菌柄长度 菌柄直径 取 平均值 并计算生物学效率 生 物学效率 子实体鲜质量 培养料干 质量 数 据分析 试验数据采用 数据处理系统进行分析 结 果与分析 菌 株间亲缘关系 拮抗反应的试验操作简单 结果也比较容 易辨别 常被用于食用菌的菌种鉴别研究 从 表 和 图 可以看出 大部分菌株之间拮抗现象 比较明显 只有少数菌株拮抗现象不明显或无拮 抗现象 菌株 和其它几株菌株均存 在明显拮抗现象 初步判定为区别于其它菌株的 株独立菌株 菌株和 菌株无拮抗 与 菌株拮抗不明显 菌株和 菌株无拮抗 与 菌株拮抗不明显 菌株和 菌株无拮抗 与 菌株拮抗不明显 可判定 菌 株为同一菌株 固 体培养基菌丝生长情况 从表 可以看出 不同烟色离褶伞菌株的母 种菌丝生长速度和长势差异较大 菌株的菌丝 生长速度最快 为 且 菌丝长势强 其次为 菌株 菌丝生长速度为 长 势 强 生长速度最慢的为 菌 株 仅 为 长 势相对弱 北 方 园 艺 月 上 表 菌株间拮抗反应 菌 株编号 不 明显 不明显 不 明显 不 明显 注 拮 抗特别明显 拮 抗明显 无 拮抗 图 部分菌株拮抗试验结果 液 体培养基菌丝生长情况 从表 可以看出 不同菌株在相同培养条件 下的液体培养基中 菌球密度 直径 整齐度 菌丝 生物量及颜色表现不同 摇瓶 后 株 菌株 均有菌球出现 表现最好的为 菌株 菌球密度 最大 为 个 菌 球 直 径 最 小 为 菌 球整齐度较好 菌球生物量最大 为 颜 色为深黄色 工 厂化栽培出菇情况 供试的 株 烟色离褶伞菌株 其中 和 菌株没有出菇 出菇的 株菌株单菇质量和菇质 方面存在差异 表 其 中 菌株污染率最低 菇盖较厚 菌柄最长 生物学效率显著高于其它 株菌株 达到 且 出菇整齐度高 具有培养 为工厂化栽培品种的潜力 菌株生物 学效率与 菌株差异不显著 为 其 中 菌 株污染率最高 为 菌 株单菇产量 最低 生物学效率仅为 污 染率最高 达到 在 株 菌株中 菌株特点较突出 单菇 质量最大 菌盖直径最大 菌柄短而粗 较适宜 地栽 第 期 北 方 园 艺 表 固体培养基菌丝生长情况 菌 株编号 菌 丝长速 菌 丝长势 注 菌 丝数据为 不同小写英文字母表示菌株间差异显著 下 同 表 液体培养基菌种生长情况 菌 株编号 菌 球密度 个 菌 球直径 菌 球整齐度 菌 丝生物量 干质量 培 养基颜色 金 黄色 浅 金黄色 金 黄色 浅 金黄色 金 黄色 深 黄色 金 黄色 金 黄色 浅 金黄色 金 黄色 注 表 示均匀 表 示不均匀 表 不同菌株农艺性状 菌 株编号 污 染率 单 菇质量 菌 盖直径 菌 盖厚度 菌 柄长度 菌 柄直径 生 物学效率 讨 论与结论 年 烟 色离褶伞首次被驯化成功 之 后 一 些学者对烟色离褶伞母种培养基配方进行 了筛选和优化 筛选出烟色离褶伞母种生长培养 基配方为葡萄糖 蛋 白 胨 硫 酸 镁 课题组前期对烟色离褶伞液 体 菌种培养条件进行了优化并对栽培配方进行了 北 方 园 艺 月 上 筛 选 菌丝生长周期缩短到 生 物学效率达到 烟 色离褶伞目前尚未突破规模工厂化 人工栽培的技术瓶颈 优良菌株筛选 培养基优 化 制种技术 缩短制种和栽培周期 提高生物学 效率 稳定产品优良性状等方面依然是该菇种人 工栽培的重点研究方向 该研究从资源入手 对收集到的种质开展亲 缘关系 菌株的菌丝生长及栽培试验 通过拮抗 试验初步鉴定出 菌株是各自独立菌 株 菌株为同一菌株 通过菌丝生长 速度 液体菌种生长情况及农艺性状等指标筛选 出 菌株较适宜工厂化栽培 参考文献 杨 军 林文 王兴龙 野生宾王菇人工驯化研究初报 食 用菌 刘 昆 宋小亚 蒋俊等 食用菌拮抗反应的定量分析 食 药用菌 赵 季 灰离褶伞液体发酵工艺研究及成分分析 重庆 西南大学 冯 云利 汤昕明 余金凤 等 离褶伞属真菌研究概况 蔬 菜 吴 汉琼 陈躬国 赵光辉 等 秀珍菇菌株的拮抗与品比筛选 安徽农业科学 岳 万松 郭相 冯云利 等 两个离褶伞野生菌株的鉴定及其 液体培养基的初步筛选 北方园艺 田 梦媛 高原 杜双田 等 个香菇菌株农艺性状比较研 究 中国农业大学学报 程 继红 郑慧芬 贲伟东 等 荷叶离褶伞工厂化栽培 食 用菌学报 张 金霞 食用菌种学 北京 中国农业出版社 张 敏 李红 苏君伟 宾王菇母种培养基的筛选 食用菌 李 红 张敏 刘俊杰 宾王菇母种培养基的优化研究初报 食用菌 宋 莹 吕立涛 杨镇 等 烟色离褶伞液体菌种培养条件及栽 培基质优化 食用菌学报 第 期 北 方 园 艺