贝莱斯芽孢杆菌JK-1可湿性粉剂研制及对辣椒褐腐病的防治效果.pdf

收稿日期 2022 10 25 基金项目 山东省科技型中小企业创新能力提升工程项目 2022TSGC1008 山东省济南市农业应用技术创新项目 CX202213 作者简介 赵春燕 1985 女 山东聊城人 农艺师 硕士 主要从事植物保护和农业技术的试验示范和推广研究 通讯作者简介 孙中涛 1973 男 山东鄄城人 副教授 博士 主要从事农业微生物 微生物工程与酶工程研究 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂研制及对辣椒褐腐病的防治 效果 赵春燕 1 安良聪 2 赵秋玲 3 孙中涛 2 1 聊城市茌平区农业农村局 山东茌平252100 2 山东农业大学生命科学学院 山东泰安271000 3 聊城市茌平区信发集团 山东茌平252100 摘 要 贝莱斯芽孢杆菌JK 1是一株优良的生防菌株 为了更好的开发利用 开展了其可湿性粉剂的研制 利用单因素试验和 正交试验设计对其助剂及配方进行优化 结果显示 JK 1菌株可湿性粉剂的最佳配方为高岭土35 聚乙二醇8 羧甲基纤维 素钠12 和可溶性淀粉0 8 在此条件下制得的贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂 活菌数大于580 00亿 g 1 悬浮率为86 润湿时间89 s pH值为7 06 细度为95 16 符合可湿性粉剂及微生物制剂的国家标准 通过辣椒果实离体试验和盆栽试验表 明 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂对辣椒褐腐病的防治效果达到64 4 同时辣椒株高增加32 65 茎粗增加17 39 根长 增加14 10 干质量和鲜质量分别增加7 78 和1 17 这说明该可湿性粉剂是一款值得开发利用的优良菌剂 关键词 贝莱斯芽孢杆菌 可湿性粉剂 研制 防治效果 中图分类号 S476 文献标识码 A DOI 编码 10 3969 j issn 1006 6500 2023 02 010 Preparation of Wettable Powder for Bacillus velezensis JK 1 and Control Effect on Brown Rot of Cayenne Pepper ZHAOChunyan 1 ANLiangcong 2 ZHAOQiuling 3 SUNZhongtao 2 1 Bureau of Agriculture and Rural Development Liaocheng Shandong 252100 China 2 College of Life Science Shandong Agri cultural University Taian Shandong 271018 China 3 Xinfa Group Company Limited Liaocheng Shandong 252100 China Abstract Bacillus velezensis JK 1 is an excellent strain of biocontrol and the development of its wettable powder was carried out in this paper for better development and utilization The results showed that the best formulation of the wettable powder of strain JK 1 was 35 kaolin 8 polyethylene glycol 12 sodium carboxymethyl cellulose and 0 8 soluble starch The Bacillus subtilis JK 1 wettable powder produced under these conditions had a viable bacterial count greater than 580 10 8 cfu g 1 a suspension rate of 86 a wetting time of 89 s a pH value of 7 06 and a fineness of 95 16 conforming to the national standards for wettable powders and microbial preparations The experiments on pepper fruits in vitro and in pots showed that Bacillus subtilis JK 1 wettable fungicide was 64 4 effective in controlling brown rot of pepper while the height of pepper plant increased 32 65 stem thickness increased 17 39 root length increased 14 10 dry weight and fresh weight increased 7 78 and 1 17 respectively This indicates that the wettable fungicide is an excellent fungicide worth developing and utilizing Key words Bacillus velezensis wettable bacteriocides development control effect 天津农业科学 Tianjin Agricultural Sciences 2023 29 2 52 56 63 null植物保护 贝莱斯芽孢杆菌 Bacillus velezensis 是一种常 见的生防细菌 能够有效抑制多种植物病原菌生 长 1 贝莱斯芽孢杆菌通过代谢为植物生长提供N P K和Fe等矿质营养元素 合成生长激素促进植物 生长 2 贝莱斯芽孢杆菌能诱导植物产生系统抗病 性 3 与病原菌共存时彼此产生竞争作用 4 达到抑 菌和防病的效果 5 肖倩等 6 分离的贝莱斯芽孢杆菌 HMQAU19044 对黄瓜霜霉病的防效高达 59 82 有很好的治疗作用 并且持效期长 迟惠荣等 7 分离 得到的贝莱斯芽胞杆菌ZJU 3发酵液中 脂肽粗提 物可明显抑制尖孢镰刀菌菌丝的生长 抑制率达到 51 6 同时该菌株对多花黄精具有显著促生效果 长江大学植物与微生物互作研究室分离得到的贝莱 斯芽孢杆菌D61 A对水稻纹枯病具有很好的抑制 效果 8 目前国内外已有部分贝莱斯芽孢杆菌被制 作成微生物菌肥或生物杀菌剂 用于多种植物病害 的防治 9 贝莱斯芽孢杆菌TK2019微生物菌剂田间 试验证实 对棉花黄萎病的防效高达92 69 10 贝莱 第2期 水平 A高岭 土 B聚乙 二醇 C羧甲基纤维 素钠 D可溶性 淀粉 1 30 2 8 0 2 2 35 5 12 0 5 3 40 8 16 0 8 斯芽孢杆菌BV03菌剂在工厂化育苗中促生效果达 到30 能使壮苗指数提升45 以上 11 由此可见贝 莱斯芽孢杆菌的应用前景广阔 本试验中的贝莱斯芽孢杆菌JK 1是在辣椒根 际土壤中筛选得到的 前期试验证明JK 1菌株抗 菌谱广 为了进一步挖掘贝莱斯芽孢杆菌JK 1的 生防潜力 广泛开展实际应用 本文开展了该菌剂的 研究 并以辣椒褐腐病为例 测定了其对病害的防治 效果 筛选出适合制造该菌可湿性粉剂的理想助剂 以期能为该菌株的商品化开发奠定基础 1 材料与方法 1 1 试验材料 1 1 1 供试菌种 贝莱斯芽孢杆菌JK 1 辣椒褐腐 病病原菌角担菌 Ceratobasidium ramicola BING 15 由山东农业大学生命科学学院实验室提供 1 1 2 供试菌粉制备及病原菌活化 玉米秸秆75 麸皮25 玉米2 60 硫酸铵1 48 硫酸锰0 10 接种量8 pH值7 03 在37 培养箱固态发酵48h 在45 烘箱烘干后 进行超微粉碎 制成菌粉 活菌数 最高达到620 00亿 g 1 芽孢生成率最高为85 病原菌活化 将病原菌BING 15菌种接种到新 的PDA培养基上 28 的恒温培养箱内培养72 h 1 1 3 供试试剂 载体 硅藻土 高岭土 白炭黑 凹 凸棒土 湿润剂 十二烷基硫酸钠 SDS 聚乙二醇 PEG2000 CaCl 2 分散剂 木质磺酸钠 三聚磷酸 钠 亚甲基二磺酸钠 NNO 阿拉伯树胶 羧甲基纤 维素钠 保护剂 腐殖酸钠 黄原胶 高岭土 糊精 可 溶性淀粉 1 1 4 室内盆栽试验材料 线辣椒幼苗 品种为 帝王336 潍坊寿光鑫青种苗公司提供 供试土 壤 济南市佐田氏生物有限公司试验田土壤 栽培花 盆规格 上内径20 cm 下内径14 cm 高16 cm 1 2 相关指标的测定方法 1 2 1 生物相容性 活菌数 的测定 将样品稀释制 成发酵液 按照不同梯度在LB平板上涂布 计算每 个平板的菌落数 最终换算出活菌数 1 2 2 润湿时间的测定 按 农药湿性粉剂之间温 性剂定方法 GB T5451 2001 12 为参考标准测定 润湿时间 1 2 3 悬浮率的测定 按国家标准 农药县浮率测定 方法 GB T14825 2006 13 为参考标准测定悬浮率 1 2 4 pH值的测定 按国家标准 农药pH值的测定 方法 GB T1601 1993 14 为参考标准测定pH值 1 2 5 细度的测定 参考国家标准 农药粘剂 可湿 性粉剂细度测定方法 GB T 16150 1995 15 农药 可湿性粉剂细度测定 1 3 载体的筛选 母粉的制备 将菌粉分别与4种载体 硅藻土 高岭土 凹凸棒土 白炭黑 按3 2例混合均匀 超微 粉碎后过筛 200目 备用 每种样品设置3组重复 测活菌数 润湿时间 悬浮率值 1 4 润湿剂的筛选 将各分湿润剂和母粉按1 5比例混合均匀后超 微粉碎 过筛 200目 处理备用 每种样品设置3组 重复 测活菌数 润湿时间 悬浮率值 1 5 分散剂的筛选 将各分散剂与母粉按1 4比例混合均匀超微粉 碎后过筛 200目 处理 制得样品 每种样品设置3 组重复 测活菌数 润湿时间 悬浮率值 1 6 保护剂的筛选 将各保护剂与母粉按1 50比例混合均匀超微 粉碎后 过筛 200 目 处理 每种样品设置 3 次重 复 各组处理在距离紫外灯 254 nm 20 W 40 cm处 照射40min 将样品稀释后涂布 观察菌落生长效果 以不添加保护剂 紫外不处理为对照 通过比较紫外 线照射前后可湿性粉剂理化性质筛选紫外保护剂 载体 润湿剂 分散剂 保护剂筛选中活菌数 润 湿时间 悬浮率的测定按照1 2 1中的国家标准和方 法进行测定 1 7 可湿性粉剂配方的研制 将筛选的最佳载体 分散剂 润湿剂和保护剂设 置成四因素三水平L 9 3 4 表1 的设计进行正交试 验 将各种助剂按照比例混合均匀制成可湿性粉剂 通过测定悬浮率确定可湿性粉剂的最佳配方 1 8 可湿性粉剂质量指标的测定 根据最佳配方研制的可湿性粉剂 按照1 2 1中 的国家标准和方法测定活菌数 润湿时间 悬浮率 pH值 细度 1 9 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂效果研究 1 9 1 离体果实防治效果 选取长势一致的辣椒果 表1 助剂筛选的因素和水平 赵春燕等 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂研制及对辣椒褐腐病的防治效果 53 天津农业科学 第 29 卷 分散剂 活菌数 亿 g 1 悬浮率 润湿时间 s 对照 530 00 0 06b 59 50 0 17e 79 67 0 33c 木质磺酸钠 460 00 0 12c 71 30 0 06d 30 67 0 33d 三聚磷酸钠 390 00 0 06d 75 53 0 03b 23 33 0 67e 亚甲基二磺酸钠 480 00 0 12c 73 30 0 06c 179 00 0 58a 阿拉伯树胶 553 00 0 06ab 73 60 0 06c 78 33 0 33c 羧甲基纤维素钠 576 00 0 03a 78 27 0 39a 49 67 0 88c 润湿剂 活菌数 亿 g 1 悬浮率 润湿时间 s 对照 520 00 0 12b 52 67 0 67c 79 67 0 33a SDS 567 00 0 07a 75 67 0 67b 51 33 0 33c 聚乙二醇 600 00 0 20a 77 67 0 33a 50 67 0 67c 氯化钙 447 00 0 07c 50 33 0 33d 61 00 0 58b 载体 活菌数 亿 g 1 悬浮率 润湿时间 s 对照 490 00 0 18b 60 00 0 58c 84 67 0 33c 硅藻土 500 00 0 10b 50 00 0 58d 47 67 0 33e 高岭土 576 00 0 07a 78 00 0 58a 82 77 0 15d 白炭黑 385 00 0 19c 64 00 0 58b 146 67 0 33a 凹凸棒土 522 00 0 20b 44 00 0 58e 97 67 0 33b 实 用75 的酒精消毒后 再用无菌水冲洗3次擦 干备用 将辣椒果实浸泡在可湿性粉剂稀释液 250 倍 2 h后取出 将活化的病原菌BING 15打菌饼 5 mm 接种到辣椒上 用灭菌的接种针刺伤 接种的 辣椒放置到铺满吸水纸的培养皿中 在28 培养箱 培养3 d 测量辣椒果实的病斑长度 根据公式计算 防治效果 以无菌水浸泡为对照 每组处理设3个重 复 每个重复处理5个辣椒 防治效果 对照组病斑长度径 试验组病斑长 度径 对照组病斑直径 100 1 9 2 盆栽试验 盆栽试验设置了 3 组分别为 CK T1和T2 每1组设置了5盆 每盆装土2 5 kg 定植一株长势大致一致的线辣椒幼苗 在辣椒开花 期 分别从每组处理中选取3盆长势一致的辣椒植 株进行试验 活化的病原菌菌饼接种在PDA液体培 养基中培养72 h后 制成发酵液 设2个处理 T1 为施加 500 mL 病原菌发酵液 500 mL 无菌水 T2 为500 mL病原菌发酵液 500 mL可湿性粉剂稀释 液 250倍 500 mL 以1 000 mL无菌水为对照 浇 灌辣椒根际土壤 25 d后通过松土处理 将辣椒植株 地上与根系部位完整取出 用清水将根部泥土清洗 干净 并用吸水纸擦拭干净 本试验将辣椒植株的株 高 茎粗 鲜质量 干质量作为生物量的测定指标 辣 椒的株高茎粗通过米尺和游标卡尺测量 辣椒的鲜 质量采用直接称质量法测量 辣椒干质量采用烘干 测量法测定 1 10 数据处理 采用 Microsoft Excel 2013软件进行数据处理 利用SPSS 22 0软件进行数据统计分析 采用正交 试验进行数据处理 2 结果与分析 2 1 载体的筛选 通过表2可知 以凹凸棒土和高岭土为载体的样 本活菌数较高 分别522 00亿 g 1 和576 00亿 g 1 两 者差距不大 硅藻土和高岭土润湿时间和悬浮率分别 为47 67s 50 和82 77s 78 润湿性是农药可湿性粉 剂的一个重要性能指标 悬浮率高 菌剂能均匀悬浮在 水中 在喷头中均匀喷出 达到好的防治效果 同时 也 要考虑到制剂的实用性 选择成本低 原材料丰富 运 输便利的载体 综合考虑 选择高岭土为最佳载体 2 2 润湿剂的筛选 由表3可知 以聚乙二醇为湿润剂的样本活菌 数为600 00亿 g 1 最高 SDS和聚乙二醇悬浮率较 高 分别为75 77 润湿时间聚乙二醇润湿时间 最少50 s 润湿剂能够降低水的表面张力 有利于有 效成分尽快被水润湿 更好发挥可湿性粉剂的药效 因此 筛选润湿剂时中应着重考虑其悬浮率和润湿 性 综合考虑 选择聚乙二醇为最佳润湿剂 2 3 分散剂的筛选 由表4可知 以羧甲基纤维素钠为分散剂的样 本活菌数 悬浮率最高分别为 576 00 亿 g 1 78 27 润湿时间为亚甲基二磺酸钠夫 对照 阿拉 伯树胶 羧甲基纤维素钠 木质磺酸钠 三聚磷酸 钠 分散剂可以降低菌粉表面张力 使其在介质中均 匀分散 有利于可湿性粉剂发挥稳定性能 羧甲基纤 维素钠的活菌数高 悬浮率高 润湿效果较优 成本 相对较低 综合考虑 选择羧甲基纤维素钠为最佳分 散剂 2 4 保护剂的筛选 由表5可知 经紫外线照射后 保护剂为可溶性 淀粉时 菌剂的活菌数最高 为557 00亿 g 1 黄原 表 2 载体的筛选 注 同列不同小写字母表示经 Duncan s 新复极差法检验差 异显著 P 0 05 下同 表3 润湿剂的筛选 表 4 分散剂的筛选 54 第 2 期 处理 病斑长度 cm 防治效果 试验组 2 27 64 40 对照组 6 38 指标 国家标准 测量值 活菌含量 亿 g 1 100 580 00 悬浮率 75 0 86 润湿时间 s 180 89 00 pH 值 5 0 8 0 7 06 细度 90 95 16 处理号 因素 A 高岭土 B 聚乙二醇 C 羧甲基纤维素钠 D 可溶性淀粉 悬浮率 1 1 30 1 2 1 8 1 0 2 79 22 2 1 30 2 5 2 12 2 0 5 89 28 3 1 30 3 8 3 16 3 0 8 88 7 4 2 35 1 2 2 12 3 0 8 89 33 5 2 35 2 5 3 16 1 0 2 86 83 6 2 35 3 8 1 8 2 0 5 88 56 7 3 40 1 2 3 16 2 0 5 86 44 8 3 40 2 5 1 8 3 0 8 86 61 9 3 40 3 8 2 12 1 0 2 90 56 K1 85 71 85 00 84 80 85 54 K2 88 24 87 57 89 70 88 09 K3 87 87 89 27 87 32 88 21 极差R 2 53 4 27 4 90 2 67 最优组合 A2 B3 C2 D3 保护剂 活菌数 亿 g 1 悬浮率 润湿时间 s 对照 507 00 0 07c 57 00 0 58d 79 13 0 19a 腐植酸钠 455 00 0 03d 51 73 0 22e 36 60 0 21d 黄原胶 527 00 0 07bc 79 67 0 24a 28 27 0 15e 糊精 407 00 0 07e 66 10 0 59b 16 03 0 09f 高岭土 540 00 0 12b 63 17 0 44c 69 87 0 19b 可溶性淀粉 557 00 0 04a 79 67 0 17a 43 33 0 89c 胶和可溶性淀粉为保护剂是 菌剂悬浮率最高 为 79 67 在筛选保护剂的过程中 活菌数是重要的衡 量指标 综合考虑 选择可溶性淀粉为最佳保护剂 2 5 可湿性粉剂配方的筛选 通过单因素试验确定高岭土 聚乙二醇 羧甲 基纤维素钠和可溶性淀粉为可湿性粉剂的最佳载 体和助剂 以这4种材料为筛选因素进行正交试 验 设置3个质量分数 将悬浮率作为指标 由表6 极差分析可知 极差分析可知4个因素结合R值 因素极差值 对比可知4个因素优劣排序为 R3 R2 R4 R1 4个影响因素按影响程度依次为 C羧 甲基纤维素钠 B聚乙二醇 D可溶性淀粉 A高岭 土 因此 可湿性粉剂的最佳方案A2B3C2D3 即高 岭土35 聚乙二醇8 羧甲基纤维素钠12 和可 溶性淀粉0 8 表 5 保护剂的筛选 表 6 助剂正交试验结果 2 6 可湿性粉剂质量指标测定 如表7可知 根据JK 1菌株可湿性粉剂的筛 选试验确定最优组分为高岭土35 聚乙二醇8 羧甲基纤维素钠12 和可溶性淀粉0 8 菌粉补足 至100 制成可湿性粉 此工艺制成可湿性粉剂测 得活菌数为 580 00 亿 g 1 悬浮率为 86 00 润湿 时间为89 s pH值为7 06 细度为94 16 因此可 知 各项指标均符合农药可湿性粉剂的国家标准 说 明制成的可湿性粉剂合格 2 7 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可是湿性粉剂效果 2 7 1 离体果实防治效果 将辣椒褐腐病病原菌接 种到辣椒果实上 结果发现经JK 1可湿性粉剂稀 释液浸泡之后 果实发病程度明显小于清水处理组 图1 清水处理的果实腐烂程度严重 腐烂面积 大 腐烂病斑长度达到6 38 cm 稀释液处理的果实 腐烂程度明显受到抑制 腐烂病斑长度为 2 27 cm 表8 通过计算得知 JK 1菌株能够防治辣椒 褐腐病 防治效果为64 4 2 7 2 可湿性粉剂对辣椒的促生作用 可湿性粉剂 对辣椒的生长的促进作用如9表所示 与对照组相 表 7 可湿性粉剂指标的测定 表 8 JK 1可湿性粉剂对辣椒果实的防治效果 赵春燕等 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂研制及对辣椒褐腐病的防治效果 55 天津农业科学 第 29 卷 处理 株高 cm 茎粗 mm 鲜质量 g 干质量 g 根长 cm CK 49 00 1 53b 4 60 0 39ab 28 98 0 75a 5 53 0 09a 9 86 0 91a T1 30 00 2 52c 3 41 0 51b 14 67 2 39b 2 66 0 32b 4 77 0 34b T2 65 00 6 03a 5 40 0 64a 29 32 2 09a 5 96 0 45a 11 25 0 74a 比 T2处理组长势良好 无褐腐病病害发生 株高 茎粗 鲜质量 干质量 根长均增加 分别增加了 32 65 17 39 1 17 7 78 14 10 T1 处理的 株高 茎粗 鲜质量 干质量 根长均下降 说明辣椒 褐腐病病原菌能够抑制辣椒生长 施加JK 1可湿 性粉剂不仅能够有效防治辣椒褐腐病 对辣椒生长 也有一定促进作用 A 对照处理 B 可湿性粉剂稀释液处理 图 1 JK 1 可湿性粉剂处理后辣椒褐腐病对辣椒果实 的侵染状况 表 9 可湿性粉剂对辣椒生长的影响 3 讨论与结论 微生物制剂中的可湿性粉剂是最主要的类型 可湿性粉剂比液体菌剂运输和贮藏方便 比其他固 体菌剂有效成分多 润湿性和悬浮效果好 农业应用 更为广泛 常常用润湿性 与生物相容性 含水量 悬 浮率 细度等对可湿性粉剂的性能进行评价 16 庄新 亚等 17 在研制防除野燕麦的可湿性粉剂时发现硅藻 土作为载体 润湿性较好 悬浮率较高 李姝江等 18 研制防治核桃根腐病的可湿性菌剂时认为高岭土作 为载体 可湿性粉剂的悬浮率较高 本研究认为 高 岭土和凹凸棒土与菌株的生物相容性较高 但凹凸 棒土悬浮率低 因此选择高岭土为最佳载体 可湿性 粉剂在田间防治过程中 紫外线的照射将会影响粉 剂内菌体的生长 在制备过程中需要添加可溶性淀 粉作为紫外线保护剂 对菌体进行保护 载体和助剂与可湿性粉剂的悬浮率 润湿时间 等各项性能指标有密切关系 李磊等 19 在研制解淀 粉芽胞杆菌 Ht q6 可湿性粉剂时选用硅藻土作为 载体 分散剂为木质素磺酸钠 十二烷基苯磺酸钠为 润湿剂 保护剂为抗坏血酸 此时润湿时间为45 s 悬浮率为85 6 本试验研制的可湿性粉剂的配方 为高岭土 聚乙二醇 羧甲基纤维素钠和可溶性淀 粉 制成的可湿性粉剂活菌数580 00亿 g 1 悬浮率 86 润湿时间为89 s 主要指标均性能优于农药可 湿性粉剂的国家标准 20 与李磊等 19 研究结果比较 接近 但是润湿时间增加一半 可能是载体和助剂的 细度不一样导致 通过辣椒果实离体试验和盆栽试 验证实 贝莱斯芽孢杆菌JK 1可湿性粉剂能减轻 辣椒褐腐病的发生 防治效果为64 40 同时能促 进辣椒植株的生长 株高增加 32 65 茎粗增加 17 39 根长增加14 10 相关研究表明 贝莱斯芽 孢杆菌能产生IAA和铁离子载体 促进植物生长 21 因此 贝莱斯芽孢杆菌制成的可湿性粉剂既可作为 杀菌剂也可作为微生物菌肥使用 参考文献 1 RUIZ GARCnullA C BnullJAR V MARTnullNEZ CHECA F et al Bacillus velezensis sp nov a surfactant producing bacterium isolated from the river V lez in M laga southern Spain J International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 2005 55 Pt 1 191 195 2 胡秀娜 苹果根际促生菌的筛选鉴定及其对苹果砧木 平邑甜茶的促生效果 D 泰安 山东农业大学 2016 3 孔庆科 丁爱云 刘招舰 等 根际细菌诱导的系统抗 性 J 山东科学 2001 14 4 18 25 4 KUnullERA I SEDLnull EK V Involvement of the cbb3 type terminal oxidase in growth competition of bacteria biofilm formation and in switching between denitrification and aerobic respiration J Microorganisms 2020 8 8 1230 5 DI R LOW Y C WANG L Y et al Draft genome sequence of Streptomyces aureoverticillatus HN6 a strain antagonistic against Fusarium oxysporum f sp cubense race 4 J Microbiology Resource Announcements 2020 9 23 e00210 20 6 肖倩 李守望 梁晨 等 贝莱斯芽孢杆菌对黄瓜霜霉病 的作用方式和持效期 J 农药 2021 60 11 829 831 7 迟惠荣 张亚惠 曾欣 等 多花黄精内生贝莱斯芽胞 杆菌的分离鉴定及其抗菌与促生作用分析 J 植物保护 2019 45 4 122 131 下转第 63 页 56 第 2 期 8 ZHENG T W LIU L NIE Q W et al Isolation identification and biocontrol mechanisms of endophytic bacterium D61 A from Fraxinus hupehensis against Rhizoctonia solani J Biological Control 2021 158 104621 9 FAN B WANG C DING X L et al AmyloWiki an integrated database for Bacillus velezensis FZB42 the model strain for plant growth promoting Bacilli J Database 2019 2019 baz071 10 史应武 杨红梅 楚敏 等 一种贝莱斯芽孢杆菌微生 物菌剂及其应用 CN202011336925 5 P 2022 10 11 11 谢雪迎 张新建 周方园 等 一种贝莱斯芽孢杆菌 BV03 菌剂及其制备方法和应用 CN202010302150 3 P 2022 08 23 12 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 农药可 湿性粉剂润湿性测定方法 GB T 5451 2001 S 北京 中国标准出版社 2004 13 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国 家标准化管理委员会 农药悬浮率测定方法 GB T 14825 2006 S 北京 中国标准出版社 2007 14 国家技术监督局 农药 pH 值的测定方法 GB T 1601 1993 S 北京 中国标准出版社 1994 15 国家技术监督局 农药粉剂 可湿性粉剂细度测定方 法 GB T 16150 1995 S 北京 中国标准出版社 2004 16 徐妍 孙宝利 战瑞 等 浅谈农药可湿性粉剂的质量 提升 J 现代农药 2009 8 1 7 11 17 庄新亚 程亮 郭青云 燕麦镰刀菌 GD 2 可湿性粉剂 研制及对野燕麦的防除效果 J 青海大学学报 2020 38 3 9 17 43 18 李姝江 方馨玫 曾艳玲 等 解淀粉芽孢杆菌 BA 12 可湿性粉剂研制及对核桃根腐病的防治效果 J 中国 生物防治学报 2016 32 5 619 626 19 李磊 许敏 王美琴 生防菌解淀粉芽胞杆菌 Ht q6 可湿性粉剂的研制及对番茄病害的田间防效 J 中国 生物防治学报 2018 34 5 738 745 20 郭庄园 杨成德 金梦军 等 枯草芽胞杆菌 262XY2 可湿性粉剂的研制 J 中国生物防治学报 2022 38 2 414 420 21 夏明聪 邓晓旭 齐红志 等 贝莱斯芽孢杆菌 YB 145 对小麦纹枯病的防治效果及促生作用 J 河南农 业科学 2021 50 10 76 83 上接第 56 页 35 1 219 229 21 孙建财 周丹丹 王薇 等 生物炭改性及其对污染物 吸附与降解行为的研究进展 J 环境化学 2021 40 5 1503 1513 22 向书江 余泺 熊子怡 等 化肥和有机肥配施生物炭 对紫色土壤养分及磷赋存形态的影响 J 环境科学 2021 42 12 6067 6077 23 SHARPLEY A MOYER B Phosphorus forms in manure and compost and their release during simulated rainfall J Journal of Environmental Quality 2000 29 5 1462 1469 24 NEGASSA W LEINWEBER P How does the Hedley sequential phosphorus fractionation reflect impacts of land use and management on soil phosphorus a review J Journal of Plant Nutrition and Soil Science 2009 172 3 305 325 25 秦红益 杨焱堃 施雅洁 等 热解温度对鸡粪生物炭 磷形态及磷淋失的影响 J 环境工程学报 2021 15 9 3004 3011 26 CHIRONE R SALATINO P SCALA F The relevance of attrition to the fate of ashes during fluidized bed combustion of a biomass J Proceedings of the Combustion Institute 2000 28 2 2279 2286 27 胡龙龙 不同磷基生物炭磷释放特征及其对污染土壤 铅的钝化研究 D 淮南 安徽理工大学 2020 28 QIAN T T WANG L LE C C et al Low temperature steam activation of phosphorus in biochar derived from enhanced biological phosphorus removal EBPR sludge J Water Research 2019 161 202 210 29 赵卫 不同环境条件下生物炭对磷的吸附及其内源磷 的释放 D 曲阜 曲阜师范大学 2016 30 李辉婷 生物炭内源磷与外源磷释放特征及其对铅吸 附的影响 D 淮南 安徽理工大学 2021 31 郑春荣 陈怀满 周东美 等 土壤中积累态磷的化学 耗竭 J 应用生态学报 2002 13 5 559 563 32 阮华珍 高章龙 陈玉婷 等 共存钙离子对镧铝改性 稻壳生物炭除磷性能的影响 J 环境化学 2020 39 5 1279 1289 彭权懿等 磷改性生物炭对土壤中磷溶出的影响 63