DB11/T 905-2012 草莓种苗.pdf

ICS 65.020.20 B 31 备案号: DB11 北京市地方标准 DB11/T 9052012 草莓种苗 Strawberry seedling 2012 - 09 - 27发布 2013 - 01 - 01实施 北京市质量技术监督局   发布 DB11/T 9052012 I 前  言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由北京市农业局提出。 本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。 本标准由北京市农业局组织实施。 本标准起草单位：北京市种子管理站、北京市农林科学院林业果树研究所。 本标准主要起草人：贾希海、张运涛、董清华、徐全明、律宝春、吴明生、宋歌、云晓敏、郭慧杰。 DB11/T 9052012 1 草莓种苗 1 范围 本标准规定了草莓种苗的相关定义、质量要求、检验和质量判定规则。 本标准适用于生产和销售的草莓种苗。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.5   农作物种子检验规程  真实性和品种纯度鉴定 NY/T 406   脱毒草莓种苗病毒检测技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1  茎尖培养苗 shoot tip culture seedling（F0） 从经过热处理脱毒及病毒检测后的草莓植株取茎尖分生组织，进行茎尖培养后获得的、经检测后确认不携带本标准规定的检测病毒的试管苗。 3.2  原原种苗 pre-basic seedling（F1） 茎尖培养苗在网室中经过一年繁殖培养后获得并不携带本标准规定的检测病毒的植株。 3.3  原种苗 basic seedling（F2） 原原种苗经过一年繁殖培养后获得并经检测后达到规定质量要求的植株。 3.4  生产用种苗 certified seedling（F3） 原种苗经过一年繁殖培养后获得并经检测后达到规定质量要求的植株。 3.5  成活种苗 survival seedling DB11/T 9052012 2 种苗定植一定时间后生长出新根、芽、叶的植株。 3.6  无毒种苗 virus-free seedling 不携带草莓斑驳病毒（Strawberry mottle virus，SMoV）、草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus，SMYEV）、草莓镶脉病毒（Strawberry vein banding virus，SVBV）以及草莓皱缩病毒（Strawberry crinkle virus，SCV）中任一种病毒的植株。 4 质量要求 草莓种苗质量要求见表1。 表1 草莓种苗质量要求 单位为% 作物名称 种苗类别 纯度 无毒率 病株率 成活率 单株要求 草莓 原原种苗 100.0 100.0 0 90.0 四个叶柄并一个芯；芯茎粗不小于0.6cm；须根不少于6条，根长不小于6cm。 原种苗 99.0 100.0 0 生产用种苗 96.0 95.0 炭疽病1.0； 叶斑病3.0 5 检验 5.1 抽样 5.1.1 原原种苗 每株应检测。 5.1.2 原种苗 在整个组培扩繁过程的前、中和后期，采用随机取样法抽取1%2%的组培苗。 5.1.3 生产用种苗 5.1.3.1 采用随机取样方法抽取样品，抽样数量见表2。 表2 生产用种苗抽样数量 种苗总数量（株） 抽样百分率（%） 抽样最低数量（株） 10000 610 100 10000 35 注：不足抽样最低数量的全部作为混合样品 5.1.3.2 将初次抽取的样品组成混合样品，从混合样品中随机抽取10%的样品作为检测样品。 DB11/T 9052012 3 5.2 纯度鉴定 5.2.1 检测方法 按GB/T 3543.5执行。 5.2.2 结果计算和表示 按GB/T 3543.5执行。 5.3 无毒率检测 5.3.1 检测病毒种类 草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒和草莓皱缩病毒。 5.3.2 检测方法 5.3.2.1 分子生物学聚合酶链式反应检测法（PCR/RT-PCR） 草莓斑驳病毒（SMoV）：取草莓种苗的叶片，提取总RNA，反转录为cDNA后进行PCR检测。利用引物（上游引物5TAAGCGACCACGACTGTGACAAAG3和下游引物5TCTTGGGCTTGGATCGTCACCTG3）扩增得到219 bp的片段。 草莓轻型黄边病毒（SMYEV）：取草莓种苗的叶片，提取总RNA，反转录为cDNA后进行PCR检测。利用引物（上游引物5GTGTGCTCAATCCAGCCAG3和下游引物5CATGGCACTCATTGGAGCTGGG3）扩增得到271 bp的片段。 草莓镶脉病毒（SVBV）：取草莓种苗的叶片，提取基因组DNA，进行PCR检测。利用引物（上游引物5GAATGGGACAATGAAATGAG3和下游引物5GTGAGGAGAACTTAGGACA3）扩增得到574 bp的片段。 草莓皱缩病毒（SCV）：取草莓种苗的叶片，提取总RNA，反转录为cDNA后进行 PCR 检测。利用引物（上游引物5 CATTGGTGGCAGACCCATCA3和下游引物5TTCAGGACCTATTTGATGACA3）扩增得到345bp的片段。 5.3.2.2 指示植物小叶嫁接法 具体检测方法应按NY/T 406执行。 5.3.2.3 结果计算和表示 计算见公式（1），结果保留一位小数。 100% = 供检种苗数的种苗数不携带本标准规定病毒）无毒率（  . (1) 5.4 病株率检测 5.4.1 检测方法 目测法检测。 5.4.2 结果计算和表示 DB11/T 9052012 4 计算见公式（2），结果保留一位小数。 100% = 供检种苗数的种苗数感染本标准所规定病害）病株率（  . (2) 5.5 成活率鉴定 5.5.1 检测方法 以100株为一次重复，计4次重复。 在温室中进行，温度保持在2025；选择沙壤土做苗床并消毒；使用防虫网隔离，防止感染外界病毒；使用遮阳网进行遮阴，日盖夜揭；定植后及时灌水，满足植株生长对水分的需求；20天后，进行种苗成活率鉴定。 5.5.2 结果计算和表示 计算见公式（3），结果保留一位小数。 100% = 供检种苗数成活种苗数）成活率（  . (3) 5.6 单株要求检测 5.6.1 检测方法 芯茎粗和根长用精确度达0.1mm的长度计量器具进行测定。 5.6.2 结果计算和表示 单株要求试验结果以样品单株数据平均数表示，结果保留一位小数。每个重复取单株试验数据的平均数，最后结果按两次重复平均数计算。 6 质量判定规则 6.1 纯度、无毒率、病株率、成活率、单株要求其中一项未达到质量要求的，判为劣质种苗。 6.2 纯度、无毒率、病株率、成活率、单株要求其中一项达不到标签上相应标注值的，判为劣质种苗。 6.3 带有国家规定检疫性有害生物的，判为劣质种苗。 _