3个蓝莓品种花芽分化特性比较研究_和志娇.pdf

48 中 国 果 树 2024 9 48 56 本 文 于 2023 11 24 收 到 2024 01 25 收 到 修 改 稿 国 家 自 然 科 学 基 金 32160695 丽 江 市 后 备 人 才 培 养 计 划 2022HBRC01 2021rc04 云 南 省 重 大 科 技 专 项 计 划 项 目 202302AE090005 云 南 省 科 技 人 才 与 平 台 计 划 项 目 院 士 专 家 工 作 站 202205AF150029 高 山 农 业 科 技 创 新 及 成 果 展 示 转 化 专 项 经 费 530000210000000017045 和 志 娇 杨 雅 涵 为 共 同 第 一 作 者 E mail hezhijiao yangyahan11 和 加 卫 为 通 信 作 者 E mail hejw4522 DOI 10 16626 ki issn1000 8047 2024 09 007 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 毕 海 林 杨 洪 涛 苏 泽 春 和 根 强 杨 燕 林 杨 正 松 云 南 省 农 业 科 学 院 高 山 经 济 植 物 研 究 所 丽 江 674199 摘 要 为 探 讨 云 南 省 蓝 莓 多 次 花 芽 分 化 的 形 态 变 化 花 芽 分 化 规 律 和 品 种 间 的 差 异 对 蓝 丰 双 丰 及 夏 普 蓝 的 物 候 期 进 行 调 查 利 用 改 良 的 石 蜡 切 片 方 法 对 其 花 芽 分 化 过 程 进 行 观 察 和 分 析 并 采 用 MRM 方 法 测 定 了 夏 普 蓝 3 次 花 芽 分 化 过 程 中 5 种 内 源 激 素 含 量 结 果 表 明 蓝 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 1 次 双 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 2 次 分 别 表 示 为 双 丰 第 1 次 双 丰 第 2 次 夏 普 蓝 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 3 次 分 别 表 示 为 夏 普 蓝 第 1 次 夏 普 蓝 第 2 次 夏 普 蓝 第 3 次 双 丰 第 1 次 的 果 熟 末 期 与 双 丰 第 2 次 的 现 蕾 期 之 间 的 时 间 间 隔 比 较 明 显 从 现 蕾 到 果 熟 期 夏 普 蓝 第 1 次 与 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 重 合 的 生 育 期 夏 普 蓝 第 2 次 与 夏 普 蓝 第 3 次 也 具 有 重 合 的 生 育 期 3 个 蓝 莓 品 种 的 花 芽 分 化 主 要 阶 段 有 6 个 依 次 为 开 始 分 化 期 花 序 原 基 分 化 期 萼 片 原 基 分 化 期 花 瓣 原 基 分 化 期 雄 蕊 原 基 分 化 期 心 皮 原 基 分 化 期 3 个 蓝 莓 品 种 完 成 花 芽 分 化 的 时 间 不 同 蓝 丰 完 成 花 芽 分 化 的 时 间 最 长 需 53 d 其 次 是 双 丰 双 丰 2 次 花 芽 分 化 完 成 的 时 间 均 比 夏 普 蓝 3 次 花 芽 分 化 完 成 的 时 间 长 不 同 于 蓝 丰 和 双 丰 夏 普 蓝 在 云 南 省 不 需 要 低 温 诱 导 春 季 自 剪 之 后 立 刻 进 入 花 芽 分 化 蓝 莓 花 芽 孕 育 期 需 要 的 IAA CKs GAs 含 量 均 较 低 但 需 要 的 ABA ACC 含 量 均 较 高 要 想 对 花 器 官 后 期 的 花 芽 分 化 有 利 应 保 持 IAA CKs GAs 含 量 为 平 衡 状 态 关 键 词 高 丛 蓝 莓 多 次 花 芽 分 化 内 源 激 素 云 南 中 图 分 类 号 S663 9 文 献 标 志 码 A 文 章 编 号 1000 8047 2024 09 0048 09 Comparative study on the flower bud differentiation characteristics of three blueberry varieties HE Zhijiao YANG Yahan HE Jiawei BI Hailin YANG Hongtao SU Zechun HE Genqiang YANG Yanlin YANG Zhengsong Institute of Alpine Economics and Botany Yunnan Academy of Agricultural Sciences Lijiang 674199 Abstract In order to investigate the morphological changes flower bud differentiation flower bud differentiation rules and differences among varieties of Yunnan blueberry the phenological phase of Bluecrop Sweetheart and Sharpblue blueberry cultivars was observed and the flower bud differentiation process was analyzed by improved paraffin section method MRM method was used to determine the content of 5 kinds of endogenous hormones in Sharpblue during 3 times of flower bud differentiation The results showed that Bluecrop buds blossoms and fruits once a year Sweetheart appears buds flowers and fruits twice a year denoted as the first Sweetheart and the second Sweetheart respectively Sharpblue blooms and fruits three times a year denoted as the first Sharpblue the second Sharpblue and the third Sharpblue respectively The time interval between the bud stage and the end of fruit ripening was significant between the first Sweetheart and the second Sweetheart From bud to fruit ripening stage the first Sharpblue and the second Sharpblue had the same growth period and the second Sharpblue and the third Sharpblue also had the same growth period There were six main stages of differentiation The first stage was the beginning stage of differentiation followed by the differentiation stage of inflorescence primordium sepal primordium and petal primordium and finally the differentiation stage of stamen 49中 国 果 树 2024 9 48 56 本 文 于 2023 11 24 收 到 2024 01 25 收 到 修 改 稿 国 家 自 然 科 学 基 金 32160695 丽 江 市 后 备 人 才 培 养 计 划 2022HBRC01 2021rc04 云 南 省 重 大 科 技 专 项 计 划 项 目 202302AE090005 云 南 省 科 技 人 才 与 平 台 计 划 项 目 院 士 专 家 工 作 站 202205AF150029 高 山 农 业 科 技 创 新 及 成 果 展 示 转 化 专 项 经 费 530000210000000017045 和 志 娇 杨 雅 涵 为 共 同 第 一 作 者 E mail hezhijiao yangyahan11 和 加 卫 为 通 信 作 者 E mail hejw4522 DOI 10 16626 ki issn1000 8047 2024 09 007 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 毕 海 林 杨 洪 涛 苏 泽 春 和 根 强 杨 燕 林 杨 正 松 云 南 省 农 业 科 学 院 高 山 经 济 植 物 研 究 所 丽 江 674199 摘 要 为 探 讨 云 南 省 蓝 莓 多 次 花 芽 分 化 的 形 态 变 化 花 芽 分 化 规 律 和 品 种 间 的 差 异 对 蓝 丰 双 丰 及 夏 普 蓝 的 物 候 期 进 行 调 查 利 用 改 良 的 石 蜡 切 片 方 法 对 其 花 芽 分 化 过 程 进 行 观 察 和 分 析 并 采 用 MRM 方 法 测 定 了 夏 普 蓝 3 次 花 芽 分 化 过 程 中 5 种 内 源 激 素 含 量 结 果 表 明 蓝 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 1 次 双 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 2 次 分 别 表 示 为 双 丰 第 1 次 双 丰 第 2 次 夏 普 蓝 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 3 次 分 别 表 示 为 夏 普 蓝 第 1 次 夏 普 蓝 第 2 次 夏 普 蓝 第 3 次 双 丰 第 1 次 的 果 熟 末 期 与 双 丰 第 2 次 的 现 蕾 期 之 间 的 时 间 间 隔 比 较 明 显 从 现 蕾 到 果 熟 期 夏 普 蓝 第 1 次 与 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 重 合 的 生 育 期 夏 普 蓝 第 2 次 与 夏 普 蓝 第 3 次 也 具 有 重 合 的 生 育 期 3 个 蓝 莓 品 种 的 花 芽 分 化 主 要 阶 段 有 6 个 依 次 为 开 始 分 化 期 花 序 原 基 分 化 期 萼 片 原 基 分 化 期 花 瓣 原 基 分 化 期 雄 蕊 原 基 分 化 期 心 皮 原 基 分 化 期 3 个 蓝 莓 品 种 完 成 花 芽 分 化 的 时 间 不 同 蓝 丰 完 成 花 芽 分 化 的 时 间 最 长 需 53 d 其 次 是 双 丰 双 丰 2 次 花 芽 分 化 完 成 的 时 间 均 比 夏 普 蓝 3 次 花 芽 分 化 完 成 的 时 间 长 不 同 于 蓝 丰 和 双 丰 夏 普 蓝 在 云 南 省 不 需 要 低 温 诱 导 春 季 自 剪 之 后 立 刻 进 入 花 芽 分 化 蓝 莓 花 芽 孕 育 期 需 要 的 IAA CKs GAs 含 量 均 较 低 但 需 要 的 ABA ACC 含 量 均 较 高 要 想 对 花 器 官 后 期 的 花 芽 分 化 有 利 应 保 持 IAA CKs GAs 含 量 为 平 衡 状 态 关 键 词 高 丛 蓝 莓 多 次 花 芽 分 化 内 源 激 素 云 南 中 图 分 类 号 S663 9 文 献 标 志 码 A 文 章 编 号 1000 8047 2024 09 0048 09 Comparative study on the flower bud differentiation characteristics of three blueberry varieties HE Zhijiao YANG Yahan HE Jiawei BI Hailin YANG Hongtao SU Zechun HE Genqiang YANG Yanlin YANG Zhengsong Institute of Alpine Economics and Botany Yunnan Academy of Agricultural Sciences Lijiang 674199 Abstract In order to investigate the morphological changes flower bud differentiation flower bud differentiation rules and differences among varieties of Yunnan blueberry the phenological phase of Bluecrop Sweetheart and Sharpblue blueberry cultivars was observed and the flower bud differentiation process was analyzed by improved paraffin section method MRM method was used to determine the content of 5 kinds of endogenous hormones in Sharpblue during 3 times of flower bud differentiation The results showed that Bluecrop buds blossoms and fruits once a year Sweetheart appears buds flowers and fruits twice a year denoted as the first Sweetheart and the second Sweetheart respectively Sharpblue blooms and fruits three times a year denoted as the first Sharpblue the second Sharpblue and the third Sharpblue respectively The time interval between the bud stage and the end of fruit ripening was significant between the first Sweetheart and the second Sweetheart From bud to fruit ripening stage the first Sharpblue and the second Sharpblue had the same growth period and the second Sharpblue and the third Sharpblue also had the same growth period There were six main stages of differentiation The first stage was the beginning stage of differentiation followed by the differentiation stage of inflorescence primordium sepal primordium and petal primordium and finally the differentiation stage of stamen 和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 等 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 primordium and carpel primordium The differentiation time of the three blueberry varieties was different Bluecrop took the longest time to complete flower bud differentiation 53 days followed by Sweetheart which had longer differentiation time than Sharpblue Under the same environmental conditions there was a significant time interval between the two growth periods of Sweetheart and the degree of overlap of Sharpblue in these growth periods was different and the time dividing line was not significant Unlike Bluecrop and Sweetheart require low temperature induction Sharpblue did not need to be induced in Yunnan and Sharpblue entered flower bud differentiation immediately after spring self cutting Blueberry flower buds at the gestation stage required lower content of IAA CKs and GAs but higher content of ABA and ACC In order to benefit the floral organs of flower bud differentiation at the later stage IAA CKs and GAs should be maintained in a balanced state Key words highbush blueberry multiple flower bud differentiation endogenous hormones Yunnan 蓝 莓 blueberry 又 称 为 越 橘 蓝 浆 果 是 越 橘 属 Vaccinium L 植 物 中 蓝 果 类 型 的 多 年 生 落 叶 或 常 绿 灌 木 小 浆 果 果 树 风 味 甜 美 外 皮 有 一 层 白 色 的 果 粉 皮 薄 籽 小 果 实 鲜 食 和 加 工 皆 宜 1 3 因 其 含 有 丰 富 的 营 养 保 健 成 分 且 具 有 较 高 的 经 济 价 值 和 开 发 利 用 前 景 在 世 界 各 地 以 功 能 性 水 果 进 行 引 种 栽 植 成 为 目 前 新 兴 的 水 果 之 一 目 前 蓝 莓 在 全 国 规 模 化 种 植 且 发 展 迅 速 国 内 绝 大 多 数 蓝 莓 种 植 区 因 蓝 莓 花 期 不 同 果 实 成 熟 期 也 不 同 可 分 为 春 花 夏 熟 果 夏 花 秋 熟 果 和 秋 花 春 熟 果 即 夏 季 果 和 秋 季 果 分 别 占 整 个 熟 期 的 75 20 和 5 4 国 内 大 多 数 蓝 莓 品 种 每 年 开 花 结 果 1 次 极 少 蓝 莓 品 种 每 年 开 花 结 果 2 次 每 年 多 次 开 花 结 果 的 蓝 莓 品 种 是 种 植 在 云 南 省 的 南 高 丛 蓝 莓 多 次 开 花 结 果 作 为 果 树 的 一 种 生 物 学 习 性 存 在 于 自 然 界 中 5 6 如 板 栗 荔 枝 等 果 树 多 次 开 花 意 味 着 二 次 花 芽 分 化 和 多 次 花 芽 分 化 花 芽 分 化 是 植 物 正 常 成 花 过 程 中 经 成 花 诱 导 以 后 不 产 生 叶 原 基 和 腋 芽 原 基 而 分 化 成 花 原 基 形 成 花 或 花 序 的 过 程 7 目 前 许 多 学 者 对 杏 李 葡 萄 油 梨 等 果 树 开 展 了 花 芽 分 化 方 面 的 相 关 研 究 8 10 周 强 11 万 洪 波 等 12 方 仲 相 13 对 一 年 开 花 结 果 1 次 的 北 陆 Northland 美 登 Blomidon 都 克 Duke 奥 尼 尔 O Neal 梯 芙 蓝 Tifblue 园 蓝 Gardenblue 等 蓝 莓 品 种 的 花 芽 分 化 进 行 了 观 察 研 究 把 蓝 莓 的 花 芽 形 态 分 化 分 成 6 个 分 化 阶 段 整 个 花 芽 形 态 分 化 基 本 在 2 个 月 内 完 成 但 不 同 品 种 具 体 的 用 时 不 同 陈 英 敏 等 14 对 不 同 蓝 莓 品 种 的 花 芽 萌 动 率 花 芽 数 枝 条 长 度 抽 梢 成 花 能 力 等 进 行 了 调 查 但 没 有 进 行 花 芽 形 态 分 化 的 观 察 蓝 莓 本 身 是 属 于 需 要 低 温 成 花 的 植 物 即 使 有 促 花 措 施 也 需 要 在 秋 冬 季 低 温 后 启 动 花 芽 分 化 2 15 16 然 而 在 云 南 省 蓝 莓 无 需 低 温 诱 导 而 存 在 多 次 开 花 的 现 象 目 前 有 关 蓝 莓 多 次 开 花 的 花 芽 分 化 特 性 研 究 尚 未 见 报 道 本 研 究 以 具 有 代 表 性 的 蓝 莓 品 种 蓝 丰 双 丰 夏 普 蓝 为 研 究 对 象 在 同 等 栽 培 条 件 下 对 其 物 候 期 进 行 调 查 并 利 用 石 蜡 切 片 技 术 对 其 花 芽 形 态 分 化 的 组 织 结 构 和 分 化 时 期 进 行 观 察 和 比 较 分 析 其 花 芽 分 化 的 规 律 和 品 种 间 的 差 异 进 一 步 分 析 多 次 花 芽 分 化 与 内 源 激 素 含 量 的 关 系 旨 在 了 解 和 掌 握 云 南 省 蓝 莓 多 次 花 芽 分 化 特 性 以 及 各 分 化 时 期 的 形 态 特 征 和 花 芽 分 化 规 律 为 有 效 防 止 蓝 莓 多 次 开 花 生 产 实 践 提 供 支 持 1 材 料 与 方 法 1 1 试 验 地 概 况 试 验 地 位 于 云 南 省 大 理 市 银 桥 镇 蓝 莓 种 植 基 地 海 拔 2 014 m 主 要 为 低 纬 高 原 季 风 气 候 四 季 温 差 变 化 不 大 干 湿 分 明 年 平 均 气 温 16 2 小 于 7 的 低 温 280 h 平 均 年 降 水 量 800 mm 土 壤 pH 值 4 96 土 壤 有 机 质 平 均 含 量 58 69 g kg 1 2 试 验 材 料 供 试 材 料 是 北 高 丛 蓝 莓 品 种 蓝 丰 具 有 15 南 高 丛 基 因 的 北 高 丛 蓝 莓 品 种 双 丰 南 高 丛 蓝 莓 品 种 夏 普 蓝 各 供 试 材 料 均 为 栽 培 管 理 条 件 一 致 生 长 发 育 情 况 良 好 且 无 病 虫 害 发 生 的 5 年 生 蓝 莓 1 3 试 验 方 法 1 3 1 物 候 期 调 查 于 2018 2019 年 对 供 试 材 料 的 物 候 期 进 行 50 和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 等 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 调 查 每 个 品 种 随 机 划 出 8 个 30 m 2 样 方 每 个 样 方 固 定 单 株 作 为 观 察 株 挂 牌 从 花 芽 萌 动 开 始 观 测 每 隔 3 d 观 察 1 次 待 现 蕾 后 每 隔 1 d 调 查 1 次 直 至 90 果 实 成 熟 为 止 调 查 结 果 主 要 参 照 廖 明 安 17 和 梁 立 峰 18 的 方 法 将 物 候 期 分 成 现 蕾 期 70 现 蕾 初 花 期 5 花 开 放 盛 花 期 90 花 开 放 坐 果 期 5 坐 果 果 熟 初 期 5 果 实 成 熟 果 熟 末 期 90 果 实 成 熟 等 6 个 阶 段 1 3 2 切 片 观 察 2019 年 3 月 至 2020 年 1 月 对 蓝 丰 双 丰 夏 普 蓝 进 行 花 芽 分 化 观 察 样 品 采 集 每 个 品 种 随 机 选 3 株 作 为 试 验 植 株 花 芽 分 化 前 的 采 样 频 率 为 每 7 10 d 采 样 1 次 分 化 后 的 采 样 频 率 为 每 7 d 采 样 2 次 每 次 采 样 的 花 芽 数 量 为 20 个 且 发 育 良 好 采 用 周 强 11 的 石 蜡 切 片 方 法 并 经 过 改 良 样 品 首 先 用 FAA 固 定 液 70 酒 精 配 制 固 定 保 存 于 4 冰 箱 12 h 以 上 备 用 经 不 同 含 量 的 乙 醇 70 80 90 无 水 乙 醇 逐 级 脱 水 van clear 剂 透 明 和 浸 蜡 包 埋 制 作 石 蜡 片 利 用 轮 转 式 Leica RM 2145 切 片 机 切 片 切 片 厚 6 10 m 用 中 性 树 胶 经 番 红 固 绿 双 重 染 色 后 封 固 镜 检 选 取 蓝 莓 不 同 时 期 花 芽 分 化 结 构 完 整 且 清 晰 的 切 片 进 行 拍 照 保 存 1 3 3 内 源 激 素 含 量 测 定 根 据 花 芽 分 化 的 切 片 结 果 在 枝 梢 停 止 生 长 后 按 不 同 花 芽 分 化 时 期 在 植 株 枝 条 顶 部 选 取 25 个 花 芽 液 氮 速 冻 后 于 80 保 存 备 用 样 品 送 至 上 海 中 科 新 生 命 生 物 科 技 有 限 公 司 结 合 UHPLC MS MS 方 法 用 MRM 方 法 检 测 脱 落 酸 ABA 细 胞 分 裂 素 CKs 赤 霉 素 GAs 生 长 素 IAA 乙 烯 前 体 ACC 5 种 内 源 激 素 含 量 重 复 3 次 1 4 数 据 处 理 采 用 Excel 软 件 对 数 据 进 行 整 理 及 制 图 2 结 果 与 分 析 2 1 3 个 蓝 莓 品 种 物 候 期 的 差 异 通 过 对 供 试 的 3 个 蓝 莓 品 种 物 候 期 进 行 调 查 发 现 蓝 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 1 次 双 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 2 次 分 别 表 示 为 双 丰 第 1 次 双 丰 第 2 次 夏 普 蓝 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 3 次 分 别 表 示 为 夏 普 蓝 第 1 次 夏 普 蓝 第 2 次 夏 普 蓝 第 3 次 从 图 1 可 以 看 出 蓝 丰 具 有 最 长 的 现 蕾 期 持 续 天 数 为 13 d 其 次 是 双 丰 第 2 次 8 d 夏 普 蓝 第 3 次 7 d 夏 普 蓝 第 2 次 和 双 丰 第 1 次 均 是 6 d 夏 普 蓝 第 1 次 现 蕾 期 持 续 天 数 最 短 为 4 d 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 最 长 的 花 期 持 续 天 数 为 38 d 其 次 是 双 丰 第 2 次 36 d 双 丰 第 1 次 34 d 夏 普 蓝 第 3 次 33 d 夏 普 蓝 第 1 次 20 d 蓝 丰 花 期 持 续 天 数 最 短 为 14 d 夏 普 蓝 第 3 次 的 坐 果 期 持 续 天 数 最 长 为 72 d 双 丰 第 1 次 最 短 为 30 d 夏 普 蓝 第 1 次 的 果 熟 期 持 续 天 数 最 长 为 38 d 夏 普 蓝 第 2 次 最 短 为 19 d 双 丰 第 1 次 的 果 熟 末 期 与 双 丰 第 2 次 的 现 蕾 期 之 间 的 时 间 间 隔 比 较 明 显 从 现 蕾 期 到 果 熟 期 夏 普 蓝 第 1 次 与 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 重 合 的 生 育 期 夏 普 蓝 第 2 次 与 夏 普 蓝 第 3 次 也 具 有 重 合 的 生 育 期 7 6 4 8 6 13 33 38 20 36 34 14 72 55 42 41 30 51 35 19 38 24 30 27 2019 02 09 2019 03 31 2019 05 20 2019 07 09 2019 08 28 2019 10 17 2019 12 06 夏 普 蓝 第 3次 夏 普 蓝 第 2次 夏 普 蓝 第 1次 双 丰 第 2次 双 丰 第 1次 蓝 丰 调 查 日 期 年 月 日 现 蕾 期 天 数 花 期 天 数 坐 果 期 天 数 果 熟 期 天 数 图 1 不 同 蓝 莓 品 种 物 候 期 及 持 续 天 数 2 2 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 不 同 时 期 和 特 征 通 过 石 蜡 切 片 技 术 观 察 蓝 丰 双 丰 夏 普 蓝 51和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 等 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 调 查 每 个 品 种 随 机 划 出 8 个 30 m 2 样 方 每 个 样 方 固 定 单 株 作 为 观 察 株 挂 牌 从 花 芽 萌 动 开 始 观 测 每 隔 3 d 观 察 1 次 待 现 蕾 后 每 隔 1 d 调 查 1 次 直 至 90 果 实 成 熟 为 止 调 查 结 果 主 要 参 照 廖 明 安 17 和 梁 立 峰 18 的 方 法 将 物 候 期 分 成 现 蕾 期 70 现 蕾 初 花 期 5 花 开 放 盛 花 期 90 花 开 放 坐 果 期 5 坐 果 果 熟 初 期 5 果 实 成 熟 果 熟 末 期 90 果 实 成 熟 等 6 个 阶 段 1 3 2 切 片 观 察 2019 年 3 月 至 2020 年 1 月 对 蓝 丰 双 丰 夏 普 蓝 进 行 花 芽 分 化 观 察 样 品 采 集 每 个 品 种 随 机 选 3 株 作 为 试 验 植 株 花 芽 分 化 前 的 采 样 频 率 为 每 7 10 d 采 样 1 次 分 化 后 的 采 样 频 率 为 每 7 d 采 样 2 次 每 次 采 样 的 花 芽 数 量 为 20 个 且 发 育 良 好 采 用 周 强 11 的 石 蜡 切 片 方 法 并 经 过 改 良 样 品 首 先 用 FAA 固 定 液 70 酒 精 配 制 固 定 保 存 于 4 冰 箱 12 h 以 上 备 用 经 不 同 含 量 的 乙 醇 70 80 90 无 水 乙 醇 逐 级 脱 水 van clear 剂 透 明 和 浸 蜡 包 埋 制 作 石 蜡 片 利 用 轮 转 式 Leica RM 2145 切 片 机 切 片 切 片 厚 6 10 m 用 中 性 树 胶 经 番 红 固 绿 双 重 染 色 后 封 固 镜 检 选 取 蓝 莓 不 同 时 期 花 芽 分 化 结 构 完 整 且 清 晰 的 切 片 进 行 拍 照 保 存 1 3 3 内 源 激 素 含 量 测 定 根 据 花 芽 分 化 的 切 片 结 果 在 枝 梢 停 止 生 长 后 按 不 同 花 芽 分 化 时 期 在 植 株 枝 条 顶 部 选 取 25 个 花 芽 液 氮 速 冻 后 于 80 保 存 备 用 样 品 送 至 上 海 中 科 新 生 命 生 物 科 技 有 限 公 司 结 合 UHPLC MS MS 方 法 用 MRM 方 法 检 测 脱 落 酸 ABA 细 胞 分 裂 素 CKs 赤 霉 素 GAs 生 长 素 IAA 乙 烯 前 体 ACC 5 种 内 源 激 素 含 量 重 复 3 次 1 4 数 据 处 理 采 用 Excel 软 件 对 数 据 进 行 整 理 及 制 图 2 结 果 与 分 析 2 1 3 个 蓝 莓 品 种 物 候 期 的 差 异 通 过 对 供 试 的 3 个 蓝 莓 品 种 物 候 期 进 行 调 查 发 现 蓝 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 1 次 双 丰 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 2 次 分 别 表 示 为 双 丰 第 1 次 双 丰 第 2 次 夏 普 蓝 一 年 现 蕾 和 开 花 结 果 3 次 分 别 表 示 为 夏 普 蓝 第 1 次 夏 普 蓝 第 2 次 夏 普 蓝 第 3 次 从 图 1 可 以 看 出 蓝 丰 具 有 最 长 的 现 蕾 期 持 续 天 数 为 13 d 其 次 是 双 丰 第 2 次 8 d 夏 普 蓝 第 3 次 7 d 夏 普 蓝 第 2 次 和 双 丰 第 1 次 均 是 6 d 夏 普 蓝 第 1 次 现 蕾 期 持 续 天 数 最 短 为 4 d 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 最 长 的 花 期 持 续 天 数 为 38 d 其 次 是 双 丰 第 2 次 36 d 双 丰 第 1 次 34 d 夏 普 蓝 第 3 次 33 d 夏 普 蓝 第 1 次 20 d 蓝 丰 花 期 持 续 天 数 最 短 为 14 d 夏 普 蓝 第 3 次 的 坐 果 期 持 续 天 数 最 长 为 72 d 双 丰 第 1 次 最 短 为 30 d 夏 普 蓝 第 1 次 的 果 熟 期 持 续 天 数 最 长 为 38 d 夏 普 蓝 第 2 次 最 短 为 19 d 双 丰 第 1 次 的 果 熟 末 期 与 双 丰 第 2 次 的 现 蕾 期 之 间 的 时 间 间 隔 比 较 明 显 从 现 蕾 期 到 果 熟 期 夏 普 蓝 第 1 次 与 夏 普 蓝 第 2 次 具 有 重 合 的 生 育 期 夏 普 蓝 第 2 次 与 夏 普 蓝 第 3 次 也 具 有 重 合 的 生 育 期 7 6 4 8 6 13 33 38 20 36 34 14 72 55 42 41 30 51 35 19 38 24 30 27 2019 02 09 2019 03 31 2019 05 20 2019 07 09 2019 08 28 2019 10 17 2019 12 06 夏 普 蓝 第 3次 夏 普 蓝 第 2次 夏 普 蓝 第 1次 双 丰 第 2次 双 丰 第 1次 蓝 丰 调 查 日 期 年 月 日 现 蕾 期 天 数 花 期 天 数 坐 果 期 天 数 果 熟 期 天 数 图 1 不 同 蓝 莓 品 种 物 候 期 及 持 续 天 数 2 2 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 不 同 时 期 和 特 征 通 过 石 蜡 切 片 技 术 观 察 蓝 丰 双 丰 夏 普 蓝 和 志 娇 杨 雅 涵 和 加 卫 等 3 个 蓝 莓 品 种 花 芽 分 化 特 性 比 较 研 究 3 个 蓝 莓 品 种 的 花 芽 分 化 图 2 图 4 结 果 表 明 3 个 蓝 莓 品 种 的 花 芽 分 化 主 要 阶 段 有 6 个 依 次 为 开 始 分 化 期 花 序 原 基 分 化 期 萼 片 原 基 分 化 期 花 瓣 原 基 分 化 期 雄 蕊 原 基 分 化 期 心 皮 原 基 分 化 期 但 各 个 品 种 每 个 时 期 的 花 芽 分 化 特 征 不 同 注 1 没 有 开