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甘 肃农业科技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 8 2018 2018年 第 8 期 甘肃农业科技 摘要： 为筛选出防治梨黑斑病的高效低毒杀菌剂，采用菌丝生长速率法测定了 11种杀菌剂对梨树黑斑病 菌的毒力。 结果表明： 40%氟硅唑乳油对梨树黑斑病菌丝的毒力最强， EC 50值最低， 为 0.401 6 g/mL ； 其次是 10%苯醚甲环唑乳油、 20%丙环唑乳油、 25%戊唑醇乳油， EC 50值分别为 1.478 0、 2.018 5、 4.101 0 g/mL ； 1.5% 噻霉酮乳油和 75%百菌清可湿性粉对菌丝的抑制效果相对较差， EC 50较高， 分别为 886.52 、 759.468 g/mL 。 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌菌丝生长均有抑制作用。 关键词： 梨树； 黑斑病菌； 杀菌剂； 毒力测定 中图分类号： S436.612.1         文献标志码： A         文章编号： 1001-1463 （ 2018） 08-0070-03doi ： 10.3969/j.issn.1001-1463.2018.08.021 收稿日期： 2018-04-02 基金项目 ： 现代农业产业技术体系建设专项资金资助（ CARS-29-41 ）； 梨现代省力高效栽培技术模式创新及配套关键技术 研究与示范（ 1604NKCA063-2 ）； 农业部园艺作物生物学与种质创制学科群西北果树科学观测实验站。 作者简介： 曹素芳（ 1979-），女，河南新乡人，助理研究员，主要从事植物病虫害及其综合防治研究。 Email ： caosufang1210sina.com 。 通信作者 ： 李红旭（ 1974-）， 男， 陕西岐山人， 副研究员， 主要从事梨树育种及栽培技术研究。 Email ： lihongxu8588sina. com 。 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌的室内毒力测定 曹素芳， 王 玮， 赵明新， 曹 刚， 李红旭 （ 甘肃省农业科学院林果花卉研究所， 甘肃 兰州 730070） 梨是世界和我国的重要水果之一，在我国的 栽培面积仅次于苹果 1 - 2 。由互隔交链孢（ Alternar - ia alternata ）引起的梨黑斑病是梨主产区危害严重 的主要病害之一 3 - 4 ， 导致梨叶与果实产生黑斑症 状及早期落叶，对梨树体健康构成严重威胁。该 病在甘肃省各地均有发生， 尤其在天水秦州区普 遍发生， 严重影响了梨的产量与品质， 已成为制 约当地梨产业发展的主要因素之一。 目前，生产上防治梨黑斑病主要依靠化学药 剂。 为了减少果农在农田用药时的盲目性， 有效 降低梨黑斑病菌的侵染概率，减少因该病害造成 的经济损失，我们对近年来生产上应用比较多的 11种杀菌剂在室内采用菌丝生长速率法对梨黑斑 病菌进行了毒力测定，以期筛选出对黑斑病菌高 效低毒的杀菌剂， 为生产上科学合理用药和病害 的有效控制提供参考依据。 1   材料与方法 1.1 供试菌株 病菌分离自天水市秦州区梨园发病严重且症 状典型的梨树黑斑病病斑，根据菌落特征和病菌 显微镜检确认为梨树黑斑病菌，试验前将菌种转 接到 PDA 平板进行培养待用。 1.2 供试药剂 10%苯醚甲环唑乳油（中国农科院植保所廊坊 农药中试厂）， 20%丙环唑乳油（中国农科院植保所 廊坊农药中试厂）， 40%氟硅 唑乳油（ 美 国 杜邦公司 产品）， 25%戊 唑 醇 乳油（ 浙江永 农化 工 有 限公司 ）， 1.5%噻霉酮 乳油（ 陕西西大华 特科技有 限公司 ）， 50% 多 菌 灵可湿 性 粉 剂（ 山东华阳 科技 股份 有 限公 司 ）， 70% 代森锰锌可湿 性 粉 剂（ 利民 化 工股份 有 限 公司 ）， 25%嘧 菌 酯悬浮 剂（ 英 国 先正达 有 限公司 ）， 12.5%腈 菌唑乳油（ 华北 制药 集团爱诺 有 限公司 ），                                                      2 王 珍、 陈彦锋、 范 荣 . 相同密度条件下不同种植 模式对大豆产量的影响 J . 甘肃农业科技， 2017（ 9）： 50-52. 3 环县志编纂委员会 . 环县志 M . 兰州： 甘肃省人民 出版社， 1993： 10-17. 4 刘生瑞， 陈彦锋 . 环县耕地质量评价 M . 兰州： 甘 肃科学技术出版社， 2015： 62. 5 范 荣， 刘生瑞， 刘丰渊 . 环县大豆全膜垄作膜侧栽 培技术 J . 甘肃农业科技， 2015（ 5）： 44-45. 6 王 珍 . 环县玉米全膜双垄沟播技术推广中存在的问 题和对策 J . 甘肃农业科技， 2015（ 4）： 52-54 （ 本文责编： 杨 杰） 70 甘 肃农业科技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 8 2018 2018 年 第 8 期 药剂名称 毒力回归方程（ y = bx+a ） EC 50 / （ g/mL ） 相关系数 / r 1.5%噻霉酮乳油 y =0.919 2 x + 2.290 4 886.520 0 0.995 7* 70%代森锰锌可湿性粉剂 y =1.528 9 x +2.179 9 69.920 0 0.997 0* 12.5% 烯唑醇可湿性粉剂 y =0.862 0 x + 4.295 1 6.572 6 0.986 2* 10%苯醚甲环唑乳油 y =0.891 4 x +4.848 8 1.478 0 0.987 3* 25% 戊唑醇乳油 y =1.064 7 x + 4.347 5 4.101 0 0.971 6* 20% 丙环唑乳油 y =0.904 0 x + 4.724 3 2.018 5 0.988 2* 75%百菌清可湿性粉剂 y =0.530 7 x + 3.471 2 759.468 0 0.876 1 50%多菌灵可湿性粉剂 y =1.430 5 x + 2.143 1 98.930 8 0.990 7* 12.5% 腈菌唑乳油 y =1.313 5 x + 2.752 7 51.398 0 0.997 7* 40%氟硅唑乳油 y =1.465 7 x +5.580 7 0.401 6 0.972 5* 25% 嘧菌酯悬浮剂 y =0.611 2 x + 4.474 4 7.244 9 0.974 3* 药剂名称 药剂浓度梯度 / （ g/mL ） 抑制率 /% 浓度 1 浓度 2 浓度 3 浓度 4 浓度 5 浓度 1 浓度 2 浓度 3 浓度 4 浓度 5 1.5%噻霉酮乳油 50 100 400 1 000 2 000 14.52 19.35 35.48 50.54 65.05 70%代森锰锌可湿性粉剂 6.25 25.00 50.00 200.00 800.00 17.20 35.48 65.05 79.03 91.40 12.5% 烯唑醇可湿性粉剂 1.25 5.00 10.00 40.00 160.00 25.81 46.24 59.68 68.82 92.47 10%苯醚甲环唑乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 28.49 47.85 67.74 72.04 96.24 25% 戊唑醇乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 15.05 32.80 48.39 59.68 96.24 20% 丙环唑乳油 0.312 5 1.250 0 5.000 0 10.000 0 40.000 0 20.97 46.24 65.05 67.74 91.40 75%百菌清可湿性粉剂 6.25 25.00 200.00 400.00 800.00 16.67 24.73 29.03 37.10 61.83 50%多菌灵可湿性粉剂 6.25 12.50 25.00 50.00 200.00 5.91 13.98 19.35 29.03 69.35 12.5% 腈菌唑乳油 5 10 20 400 160 11.29 18.28 28.49 42.47 75.81 40%氟硅唑乳油 0.062 5 0.250 0 0.500 0 1.000 0 2.000 0 16.13 40.86 47.31 69.35 94.09 25% 嘧菌酯悬浮剂 1.25 2.50 5.00 10.00 40.00 27.96 43.55 54.84 58.06 67.74 75%百菌清可湿性粉剂（江阴苏利化学有限公司）， 12.5% 烯唑醇可湿性粉剂（江苏剑牌农药化工有限 公司）。 1.3 供试培养基 培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ PDA ）， 采用常规方法制备，分装入 150 mL 三角瓶（每瓶 49 mL ）， 高压蒸汽灭菌后备用。 1.4 供试药剂母液的配制及保存 根据预试验的测定结果，在无菌环境下配制 各供试药剂的母液，置于消毒的三角瓶中在 4 冰箱保存备用。 1.5 毒力测定方法 采用菌丝生长速率法 5 。将供试药剂母液分 别稀释 5个系列浓度（表 1）， 各取 1 mL 加入 49  mL 定量灭菌冷却至 5055 的 PDA 培养基中， 摇匀， 制成不同浓度带药平板， 以加入 1 mL 无 菌水的培养基平板为对照， 4次重复。 在无菌条 件下，用灭菌打孔器自菌落边缘切取直径 5 mm 菌饼，接入带药和对照培养基平板中央，菌丝面 朝下。 各处理培养皿置于 25 恒温培养， 对照菌落 直径长到培养皿直径的 90%时，用十字交叉法测 量各处理的菌落直径，计算各药剂处理对病菌菌 丝生长的抑制率。采用唐启义和冯明光 6 的实用 统计分析及其 DPS 数据处理系统 软 件， 用生 物 测 定 -数 量型 数据 机 率 值 分析 模型 计算各 种 药剂的 毒力回归方 程 （ y = bx +a） 、 EC 50 和相关系数 r。 2   结果与分析 2.1 不同药剂对病原菌的抑制效果 从 表 1看出 ， 11种 药剂在 设 计浓度下 均 对 梨 树黑斑 病病 原 菌有抑制 作 用。 随着 药剂浓度的 升 高， 其对病 原 菌的抑制率 增 加。 70%代森锰锌可湿 性粉剂 800.00 g/mL 、 12.5% 烯唑醇可湿性粉剂 160.00 g/mL 、 10%苯醚甲环唑乳油 40.000 0 g/mL 、 25% 戊唑醇乳油 40.000 0 g/mL 、 20% 丙环唑乳油 40.000 0 g/mL 和 40%氟硅唑乳油 2.000 0 g/mL 对病 原 菌的抑制率 均 在 91%以 上 ， 表明 这 6种 药 剂在 该 浓度下对病 原 菌的抑制 效 果 较好 。 2.2 不同杀菌剂对病原菌的毒力测定 各药剂对 梨树黑斑 病菌的毒力 大小 不同（表 2）。 表 1 11 种杀菌剂对梨树黑斑病菌的抑制率 表 2 11 种杀菌剂对病原菌的毒力测定结果 71 甘 肃农业科技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 8 2018 2018 年 第 8 期 甘肃农业科技 40%氟硅唑乳油 EC 50 值最低， 为 0.401 6 g/mL ， 表明 40%氟硅唑乳油对病原菌的毒力作用最强； 其次是 10%苯醚甲环唑乳油、 20%丙环唑乳油和 25%戊唑醇乳油， EC 50 值分别为 1.4780 g/mL 、 2.018 5 g/mL 和 4.101 0 g/mL ； 而 1.5%噻霉酮乳 油和 75% 百菌清可湿性粉剂 EC 50 较高， 分别达 886.520 0 g/mL 和 759.468 0 g/mL ， 表明这两种 药剂对病原菌的毒力作用最弱。相关性（ r）分析表 明， 75% 百菌清可湿性粉剂对病原菌的相关性系数 为 0.876 1， 没有达到显著水平， 其它 10种供试药 剂均达到极显著水平。 2.3 病原菌对不同药剂的敏感性 从毒力回归方程看出，不同药剂处理的斜率 （ b 值）不同（表 2）。 40%氟硅唑乳油、 50%多菌灵可 湿性粉剂和 70% 代森锰锌可湿性粉剂的 b 值较大， 分别达到 1.465 7 、 1.430 4和 1.528 9， 表明病原菌 对 40%氟硅唑乳油、 50%多菌灵可湿性粉剂和 70% 代森锰锌可湿性粉剂较敏感。 而 75% 百菌清 可湿性粉剂和 25%嘧菌酯悬浮剂的 b 值较小， 分别 为 0.530 7和 0.611 2 ， 表明病原菌对 75% 百菌清可 湿性粉剂和 25%嘧菌酯悬浮剂不敏感。 3   小结与讨论 选用 11种杀菌剂测定了对梨黑斑病菌菌丝生 长抑制作用， 结果表明， 10%苯醚甲环唑乳油、 25%戊唑醇乳油、 40%氟硅唑、 12.5%烯唑醇可湿 性粉剂、 20%丙环唑乳油及 70% 代森锰锌可湿性 粉剂对梨黑斑病菌菌丝生长抑制率均能达到 90% 以上。 在供试的 11 种杀菌剂中， 对病原菌菌丝生 长毒力最强的是 40%氟硅唑乳油； EC 50 为 0.401 6   g/mL ； 其次为 10%苯醚甲环唑乳油、 20%丙环唑 乳油和 25%戊唑醇乳油； 1.5%噻霉酮乳油的毒力 最弱， 为 886.520 0 g/mL ，从毒力回归方程的 b 值分析看出， 梨树黑斑病病菌对 70% 代森锰锌可 湿性粉剂、 40%氟硅唑乳油和 50%多菌灵可湿性 粉剂敏感性较高。 综合比较分析， 40%氟硅唑乳 油、 10%苯醚甲环唑乳油、 20%丙环唑乳油及 25% 戊唑醇乳油这 4个处理可以作为防治梨黑斑病的 首选药剂和剂量。 化学杀菌剂是防治梨黑斑病的主要手段。本 研究通过对梨黑斑病菌的药剂筛选，初步明确了 对病菌有较高毒力的杀菌剂，结果与付余波 7 和 崔建潮 8 的报道基本一致。 本试验所测的药剂 EC 50 值相对较高， 这可能与菌株地理来源不同有 关。 朱红艳 9 研究表明， 苯醚甲环唑对梨黑斑病 菌菌株的 EC 50 分布在 0.719 01.488 6 g/mL 范围 内，菌株表现为敏感， 但存在敏感性降低的菌株。 本研究测得的苯醚甲环唑的 EC 50 值为 1.478 0   g/mL ，也可能与病原菌对药剂的敏感性降低有 关。黑斑病菌分生孢子产生在病害循环中是非常 关键的一环，本研究仅测定了供试药剂对病原菌 菌丝的毒力大小，对分生孢子的毒力大小还需进 一步研究。 在长期的农药使用过程中， 梨树病害对常规 性的杀菌剂 势必会 产生一定的 抗 药性， 还 易造成 农药 残留 和环 境污染 。 在生产 实际 中， 还 应根据 根据 梨黑斑病的 发 病规 律 ， 交替 使用药剂， 以有 效控 制梨黑斑病的 发 生。 还 应 通过 整形修剪改善 田间 通 风透光条件 及 温 湿 度变 化 等 其它农业 措施 ， 降低 发 病 条件 ， 减少 农药的使用量， 以 延缓 病原 菌 抗 药性的产生， 延 长这 些 杀菌剂的使用 寿命 。 本试验 只 供 田间 病害防治 时 选药 提 供 参考 ， 为了 更 进一步明确药 效 ， 还 应 对这 些 杀菌剂进 行 系 统 的 田间 防 效 试验。 参考文献： 1 李秀根， 张绍铃 .世界梨产业现状与发展趋势分析 J .烟台果树， 2007 （ 1）： 1-3. 2 赵明新， 王 玮， 毕淑海， 等 .不同砧木建园方式对 一年生早酥梨生长发育的影响 J . 甘肃农业科技， 2017 （ 10）： 48-50. 3 李永才， 毕 阳 .苹果梨黑斑病的发生及侵染过程 J .植物保护学报， 2006， 33（ 2）： 131-135. 4 刁春英， 毕 阳， 李永才 .壳聚糖对互隔交链孢菌 （ Alternaria alternate ）的离体抑制作用 J .中国农学通 报， 2010， 26 （ 10）： 91-94. 5 方中达 .植物病害研究法 M .北京： 中国农业出版 社， 1998. 6 唐启义， 冯明光 .实用统计分析及其 DPS 数据处理系 统 M .北京： 科学出版社， 2002. 7 付余波， 钱国良， 胡白石， 等 . 21种杀菌剂对梨炭疽 病菌、 轮纹病菌、 黑斑病菌的室内毒力测定 J .江苏 农业科学， 2011， 39（ 2）： 178-180. 8 崔建潮， 贾晓辉， 孙平平， 等 . 14种杀菌剂对梨黑斑 病菌的室内毒力测定 J .中国南方果树， 2016， 45 （ 3）： 49-54. 9 朱红艳， 蒋小芬， 李先明， 等 .梨黑斑病菌对苯醚甲 环唑的敏感性分析 J .湖北农业科学， 2016， 35（ 24 ）： 6448-6450. （ 本文责编： 陈 珩） 72