一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法.pdf

19 中华人民共和国 国家知识产权局 12 发明专利申请 10 申请公布号 43 申请公布日 21 申请号 202010596339 8 22 申请日 2020 06 28 71 申请人 甘肃省农业科 学院马铃薯研究所 地址 730050 甘肃省兰州市安宁区农科院 新村1号 72 发明人 张武 吕和平 吴雁斌 梁宏杰 高彦萍 王敏 74 专利代理机构 兰州锦知源专利代理事务所 普通 合 伙 62 204 代理人 勾昌羽 51 Int Cl A01H 4 00 2006 01 54 发明名称 一种马铃薯组培苗 开 放式快繁的方法 57 摘要 本发明提供一种马铃薯组培苗开放式快繁 的方法 包括以下步骤 1 将培养基质平铺到苗 床上 浇透水 2 将马铃薯脱毒组培苗去根 弃 培养基 剪 成茎段 3 将马铃薯脱毒组培苗茎 段 均匀撒播于苗床上 4 喷水固定 5 喷施80 120ppm萘乙酸 10 2 0ppm 6 糠 基氨基嘌呤混合 液1次 6 在马铃薯脱毒组培苗上覆 盖透光薄膜 进行培养 7 将马铃薯脱毒组培苗培养一周 浇 施营养液 揭开透光薄膜 继续培养 8 继续培 养至苗长8 9 cm 连根拔出 进行定植 本发明显 著地降低了马铃薯脱毒组培苗工厂化生产成本 提高了繁殖效率 生产的优质健壮脱毒组培苗为 马铃薯原原种或假植大田原种生产提供了技术 支撑 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 111602595 A 2020 09 01 CN 111602595 A 1 一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 包括以下步骤 1 准备培养基质 将培养基质平铺到温网棚的苗床上 将培养基质浇透水 所述培养 基质为椰糠 2 将马铃薯脱毒组培苗在开放的环境中去根 弃培养基 剪成带1 2个叶片的茎段 3 将步骤 2 剪切的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于步骤 1 的苗床上 4 将步骤 3 均匀摆布的马铃薯脱毒组培苗茎段喷水固定 5 对步骤 4 固定的马铃薯脱毒组培苗茎段喷施80 120ppm萘乙酸 10 20ppm 6 糠 基氨基嘌呤混合液1次 6 在步骤 5 的马铃薯脱毒组培苗上覆盖具有一定透光率的透光薄膜 在部分遮光 光照1500 2500LX的条件下培养 7 将步骤 6 的马铃薯脱毒组培苗培养一周 浇施营养液 揭开透光薄膜 不再遮光 继续培养 8 将步骤 7 的马铃薯脱毒组培苗继续培养 待苗长至8 9cm 5片叶时 连根拔出 进 行定植 2 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 1 和步骤 2 的顺序互换 3 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 3 中 所述温网棚内温度为18 25 湿度保持在90 4 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 3 中 撒播的密度为1800 2500株 5 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 4 中 所述喷水固定是使马铃薯脱毒组培苗茎段和培养基质紧密接触 但不能被培养基质掩 埋 6 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 5 中 所述混合液的喷施量为100ppm萘乙酸 15ppm 6 糠基氨基嘌呤 或 所述混合液的喷施量为80ppm萘乙酸 10ppm 6 糠基氨基嘌呤 或 所述混合液的喷施量为120ppm萘乙酸 20ppm 6 糠基氨基嘌呤 7 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 6 中 所述部分遮光为遮光50 8 根据权利要求1所述的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其特征在于 步骤 7 中 所述营养液为不含琼脂和有机物的MS培养基大量元素和微量元素营养液 浇施营养液 的量为0 5L 权 利 要 求 书 1 1 页 2 CN 111602595 A 一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 背景技术 0002 目前 世界马铃薯生产国中 对于马铃薯脱毒组培苗的繁殖均为采用培养基经高 压灭菌后在洁净环境条件下 在超净工作台上人工剪切扦插在组培瓶中 然后放置在灯光 培养室或日光培养室培养 生产成本高 繁殖系数低 且培养苗纤弱 定植成活率较低 发明内容 0003 为了解决现有技术中存在的问题 本发明提供了一种马铃薯组培苗开放式快繁的 方法 本发明马铃薯组培苗开放式快繁技术是在自然环境中将脱毒组培苗剪切 然后撒播 于椰糠基质中 扩繁系数为4 8 5 5 较组培瓶提高4 5倍 培养成的定植苗健壮 叶片大 茎节短 对环境的适应性强 定植成活率达100 生产成本为0 04 0 05元 株 是组培瓶扩 繁的30 40 0004 本发明提供一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 包括以下步骤 1 准备培养基质 将培养基质平铺到温网棚的苗床上 将培养基质浇透水 所述培养 基质为椰糠 2 将马铃薯脱毒组培苗在开放的环境中去根 弃培养基 剪成带1 2个叶片的茎段 3 将步骤 2 剪切的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于步骤 1 的苗床上 4 将步骤 3 均匀摆布的马铃薯脱毒组培苗茎段喷水固定 5 对步骤 4 固定的马铃薯脱毒组培苗茎段喷施80 120ppm萘乙酸 10 20ppm 6 糠 基氨基嘌呤混合液1次 6 在步骤 5 的马铃薯脱毒组培苗上覆盖具有一定透光率的透光薄膜 在部分遮光 光照1500 2500LX的条件下培养 7 将步骤 6 的马铃薯脱毒组培苗培养一周 浇施营养液 揭开透光薄膜 不再遮光 继续培养 8 将步骤 7 的马铃薯脱毒组培苗继续培养8 10天 组培苗长至8 5 9 5cm 5片叶时 连根拔出 进行定植 0005 作为优选 步骤 1 和步骤 2 的顺序互换 0006 作为优选 步骤 3 中 所述温网棚内温度为18 25 湿度保持在90 0007 作为优选 步骤 3 中 撒播的密度为1800 2500株 0008 作为优选 步骤 4 中 所述喷水固定是使马铃薯脱毒组培苗茎段和培养基质紧密 接触 但不能被培养基质掩埋 0009 作为优选 步骤 5 中 所述混合液的喷施量为100ppm萘乙酸 15ppm 6 糠基氨基 嘌呤 或 所述混合液的喷施量为80ppm萘乙酸 10ppm 6 糠基氨基嘌呤 或 说 明 书 1 5 页 3 CN 111602595 A 所述混合液的喷施量为120ppm萘乙酸 20ppm 6 糠基氨基嘌呤 0010 作为优选 步骤 6 中 所述部分遮光为遮光50 0011 作为优选 步骤 7 中 所述营养液为不含琼脂和有机物的MS培养基大量元素和微 量元素营养液 浇施营养液的量为0 5L 0012 本发明是在开放的环境条件下扩繁培养马铃薯脱毒组培苗 操作技术简单 易掌 握 对人员的要求不严格 该繁殖方法的扩繁效率为5 6万株 人 是在组培室超净工作台 上 人工在培养瓶中剪插的8 12倍 培养时间15 17天 在开放的环境内培养的马铃薯脱 毒组培苗生长健壮 叶片大 茎节短 由于是在太阳光下培养 对环境的适应性强 移植生产 原原种成活率达100 结薯数量为2 3粒 株 是用组培瓶快繁苗的1 5倍左右 生产成本为 0 08 0 1元 粒 组培瓶扩繁的30 40 本发明显著地降低了马铃薯脱毒组培苗工厂化生 产成本 提高了繁殖效率 生产的优质健壮脱毒组培苗为马铃薯原原种或假植大田原种生 产提供了技术支撑 附图说明 0013 附图用来提供对本发明的进一步理解 并且构成说明书的一部分 与本发明的实 施例一起用于解释本发明 并不构成对本发明的限制 在附图中 图1为马铃薯组培苗开放式撒播快繁流程图 0014 图2为马铃薯脱毒苗撒播浇水固定 0015 图3为开放式马铃薯脱毒苗生长状况 0016 图4为采用本发明方法培养好的马铃薯脱毒苗 具体实施方式 0017 以下的实施例便于更好地理解本发明 但并不限定本发明 下述实施例中的实验 方法 如无特殊说明 均为常规方法 下述实施例中所用的试验材料 如无特殊说明 均为市 售 0018 本发明的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其技术方案步骤如下 1 培养基质准备 培养基质为椰糠 2 将步骤 1 的椰糠基质均匀平铺到温网棚的离地或接地苗床上 平铺厚度至少为 4cm 温网棚内温度为18 25 湿度保持在90 0019 所述温网棚是指 日光温室 智能温室 防虫网棚等 只要能将棚内温度调节至18 25 的温室设备即可实现本发明 0020 3 给步骤 2 苗床上椰糠基质浇透水 4 将培养好马铃薯脱毒组培苗在开放的环境中去根 弃培养基 剪成带1 2个叶片的 茎段 步骤 4 中 开放的环境 是指 自然环境 没有空气净化 消毒灭菌的环境 0021 5 将步骤 4 剪切的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于苗床上 撒播密度为1800 2500株 6 将步骤 5 均匀摆布的马铃薯脱毒组培苗茎段喷水固定 使其和椰糠基质更加紧密 接触 但不能被椰糠基质掩埋 说 明 书 2 5 页 4 CN 111602595 A 0022 步骤 6 中 选择这种喷水固定紧密接触但不被基质掩埋的方式的理由为 浇水固 定能够使组培苗和椰糠基质更加紧密的接触 在不被基质掩盖的情况下 相对于不浇水 组 培苗更不容易移动位置 而掩埋后马铃薯脱毒组培苗茎段就会死亡 0023 7 对步骤 6 固定的马铃薯脱毒组培苗茎段喷施80 120ppm萘乙酸 10 20ppm 6 糠基氨基嘌呤混合液1次 步骤 7 中 喷施80 120ppm萘乙酸 10 20ppm 6 糠基氨基嘌呤混合液的作用为 促 进剪切茎秆生根 0024 混合液的优化过程如下 2020年3月31日 组培苗剪撒于椰糠基质效果良好 其中两种基质中萘乙酸 00mg 升 6 糠基氨基嘌呤15mg 升处理效果最佳 剪撒茎段各部位均生根 成苗率达96 其次为萘乙 酸80mg 升 6 糠基氨基嘌呤10mg 升 剪撒茎段生根良好 成苗率达94 2 萘乙酸120mg L 6 糠基氨基嘌呤20mg L剪撒茎段生根效果较好 成苗率达93 7 而用萘乙酸60mg L 6 糠基氨基嘌呤5mg L处理效果最差 剪撒茎段部分生根 成苗率 达63 7 0025 8 在步骤 7 马铃薯脱毒组培苗上覆盖0 01mm厚的透光率为50 的透光薄膜保 湿 在遮光50 光照1500 2500LX培养 9 将步骤 8 马铃薯脱毒组培苗培养7天 株高达到2 3cm时浇施不含琼脂和有机物 的MS培养基大量元素和微量元素营养液0 5L 揭开透光率为50 的透光薄膜 继续培养 10 将步骤 9 马铃薯脱毒组培苗继续培养 待组培苗长至8 cm 5片叶 将组培苗连 根拔出 定植生产原原种或原种 0026 应用本发明方法培养的马铃薯脱毒苗扩繁效率5 6万株 人 扩繁系数为4 8 5 5 培养成的定植苗健壮 叶片大 茎节短 对环境的适应性强 培养时间15 17天 定植成 活率达100 结薯数量为2 3粒 株 生产成本为0 08 0 1元 粒 由于是在18 25 的温网 棚中进行快繁 故本发明的方法一年四季均可实施 对于快繁的时间没有具体要求 0027 实施例1 以在椰糠基质中开放式快繁马铃薯新品种陇薯7号脱毒组培苗为例 本发明的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其技术方案步骤如下 1 材料准备 陇薯7号马铃薯脱毒组培苗若干瓶 椰糠基质 苗床 塑料薄膜及剪刀等 0028 2 将椰糠均匀平铺于日光温室的离地苗床上 平铺厚度为4cm 浇透水 日光温室 内温度为20 湿度保持在90 0029 将脱毒组培苗从培养瓶中取出 在开放的环境剔除根和培养基 剪切成带2叶片的 茎段 3 将剪切好的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于已铺好椰糠基质的苗床上 撒播密 度为2200株 摆布均匀 喷水固定 4 将固定的马铃薯脱毒组培苗剪切茎段喷施100ppm萘乙酸 15ppm 6 糠基氨基嘌呤 混合液 5 将马铃薯脱毒组培苗覆盖0 01mm厚的透光率为50 的透光塑料棚膜保湿 在遮光 50 光照强度2500LX的条件下培养一周 株高达到3cm时浇施不含琼脂和有机物的MS培养 基大量元素和微量元素营养液0 5L 揭开透光率为50 的透光薄膜 继续培养 说 明 书 3 5 页 5 CN 111602595 A 6 马铃薯脱毒苗培养共计15天长至9cm 5片叶时 连根拔出 定植生产原原种或原种 0030 图1为马铃薯组培苗开放式撒播快繁流程图 0031 图2为马铃薯脱毒苗撒播浇水固定 0032 图3为开放式马铃薯脱毒苗生长状况 0033 图4为采用本发明方法培养好的马铃薯脱毒苗 0034 应用上述方法培养的马铃薯脱毒苗扩繁效率6万株 人 扩繁系数为5 5 培养成的 定植苗健壮 叶片大 茎节短 对环境的适应性强 培养时间15天 定植成活率达100 结薯 数量为3粒 株 生产成本为0 08元 粒 0035 实施例2 以在椰糠基质中开放式快繁马铃薯新品种陇薯7号脱毒组培苗为例 本发明的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其技术方案步骤如下 1 材料准备 陇薯7号马铃薯脱毒组培苗若干瓶 椰糠基质 苗床 塑料薄膜及剪刀等 0036 2 将椰糠均匀平铺于智能温室的离地苗床上 平铺厚度为4 5cm 浇透水 智能温 室内温度为18 湿度保持在90 0037 将脱毒组培苗从培养瓶中取出 在开放的环境剔除根和培养基 剪切成带1叶片的 茎段 3 将剪切好的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于已铺好椰糠基质的苗床上 撒播密 度为2500株 摆布均匀 喷水固定 4 将固定的马铃薯脱毒组培苗剪切茎段喷施80ppm萘乙酸 10ppm 6 糠基氨基嘌呤混 合液 5 将马铃薯脱毒组培苗覆盖0 01mm厚的透光率为50 的透光塑料棚膜保湿 在遮光 50 光照强度1500LX的条件下培养一周 株高达到2 5cm时浇施不含琼脂和有机物的MS培 养基大量元素和微量元素营养液0 5L 揭开透光率为50 的透光薄膜 继续培养 6 马铃薯脱毒组培苗继续培养 待组培苗长至9cm 5片叶 连根拔出 定植生产原原种 或原种 0038 应用上述方法培养的马铃薯脱毒苗扩繁效率5万株 人 扩繁系数为5 培养成的定 植苗健壮 叶片大 茎节短 对环境的适应性强 培养时间16天 定植成活率达100 结薯数 量为2粒 株 生产成本为0 09元 粒 0039 实施例3 以在椰糠基质中开放式快繁马铃薯新品种陇薯7号脱毒组培苗为例 本发明的一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法 其技术方案步骤如下 1 材料准备 陇薯7号马铃薯脱毒组培苗若干瓶 椰糠基质 苗床 塑料薄膜及剪刀等 0040 2 将椰糠均匀平铺于防虫网棚的接地苗床上 平铺厚度为5cm 浇透水 防虫网棚 内温度为25 湿度保持在90 0041 将脱毒组培苗从培养瓶中取出 在开放的环境剔除根和培养基 剪切成带1叶片的 茎段 3 将剪切好的马铃薯脱毒组培苗茎段均匀撒播于已铺好椰糠基质的苗床上 撒播密 度为1800株 摆布均匀 喷水固定 4 将固定的马铃薯脱毒组培苗剪切茎段喷施120ppm萘乙酸 20ppm 6 糠基氨基嘌呤 说 明 书 4 5 页 6 CN 111602595 A 混合液 5 将马铃薯脱毒组培苗覆盖0 01mm厚的透光率为50 的透光塑料棚膜保湿 在遮光 50 光照强度2000LX的条件下培养一周 株高达到2cm时浇施不含琼脂和有机物的MS培养 基大量元素和微量元素营养液0 5L 揭开透光率为50 的透光薄膜 继续培养 6 马铃薯脱毒组培苗共计培养17天 此时组培苗长至9cm 5片叶 连根拔出 定植生产 原原种或原种 0042 应用上述方法培养的马铃薯脱毒苗扩繁效率5 5万株 人 扩繁系数为4 8 培养成 的定植苗健壮 叶片大 茎节短 对环境的适应性强 培养时间17天 定植成活率达100 结 薯数量为2粒 株 生产成本为0 1元 粒 0043 最后应说明的是 以上所述仅为本发明的优选实施例而已 并不用于限制本发明 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明 对于本领域的技术人员来说 其依然可 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改 或者对其中部分技术特征进行等同替换 凡在本发明的精神和原则之内 所作的任何修改 等同替换 改进等 均应包含在本发明的 保护范围之内 说 明 书 5 5 页 7 CN 111602595 A 图1 图2 说 明 书 附 图 1 2 页 8 CN 111602595 A 图3 图4 说 明 书 附 图 2 2 页 9 CN 111602595 A